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本研究采用ELISA、RT-PCR及Western blot技術(shù)檢測(cè)了八肽膽囊收縮素(CCK-8)對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞 IL-1β及p38 MAPK磷酸化的影響,旨在探討CCK-8抗內(nèi)毒素休克的作用機(jī)制。結(jié)果發(fā)現(xiàn)CCK-8可劑量依賴地抑制LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞IL-1β蛋白及mRNA的表達(dá),并可能通過(guò)抑制 p38 MAPK磷酸化來(lái)實(shí)現(xiàn)。
目的:研究八肽膽囊收縮素(CCK-8)對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞IL-1β表達(dá)的影響及相關(guān)機(jī)制。方法: 用ELISA及RT-PCR法檢測(cè) CCK-8(SB)對(duì)LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞 IL-1β蛋白及mRNA表達(dá)的影響;應(yīng)用 Western blot檢測(cè) CCK-8對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞p38 MAPK磷酸化的影響。結(jié)果:①LPS可時(shí)間依賴性地誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞IL-1β蛋白及mRNA表達(dá),分別于刺激后6 h及3 h達(dá)到高峰;②低劑量(10^-10 mol/L、10^-9 mol/L)CCK-8對(duì)LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞IL-1β表達(dá)無(wú)明顯影響;高劑量(10^-8 mol/L~10^-6 mol/L)CCK-8劑量依賴性抑制了LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞IL-1β表達(dá);③10-10 mol/L CCK-8未影響LPS誘導(dǎo)的 p-p38 MAPK水平,10^-8、10^-6 mol/L CCK-8劑量依賴性地抑制了LPS誘導(dǎo)的p-p38 MAPK水平;④ p38 MAPK特異性抑制劑SB203580可明顯抑制LPS誘導(dǎo)RAW264.7細(xì)胞IL-1β表達(dá),與CCK-8共同作用后,抑制作用進(jìn)一步加強(qiáng)。結(jié)論 CCK-8劑量依賴性抑制了LPS誘導(dǎo)的RAW264.7細(xì)胞IL-1β蛋白及mRNA表達(dá),并可能通過(guò)抑制 p38 MAPK磷酸化而實(shí)現(xiàn)的。
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”作品 三等獎(jiǎng)
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