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豬瘟(CSF)和豬繁殖與呼吸綜合征(PRRS)是嚴(yán)重危害云南養(yǎng)豬業(yè)的疾病,二者同時(shí)感染豬群的比例很大,且在臨床癥狀和病理變化上不易區(qū)分。為了建立一種能快速診斷CSF和PRRS混合感染的方法,根據(jù)NCBI上已發(fā)表的CSFV保守基因Erns和PRRSV保守基因M基因的核苷酸序列,設(shè)計(jì)了2對(duì)特異性引物,經(jīng)優(yōu)化PCR反應(yīng)條件后,建立了CSFV和PRRSV一步法RT-PCR的檢測(cè)方法。
近幾年,在云南省部分地區(qū)中經(jīng)常發(fā)生豬高熱病大部分診斷為藍(lán)耳病病毒與豬瘟病毒混合性感染所致。豬瘟是一種烈性傳染病,給世界養(yǎng)豬業(yè)造成了重大的經(jīng)濟(jì)損失。豬繁殖與呼吸綜合征是20世紀(jì)80年代后期出現(xiàn)的,以母豬繁殖障礙和各日齡豬呼吸道疾病為特征的傳染病。這兩種病在臨床癥狀和病理變化上不易區(qū)分,而且二者在云南地區(qū)同時(shí)感染豬群的比例很大。目前,常規(guī)方法大都無(wú)法同時(shí)檢測(cè)這2種病毒,所以建立一種同時(shí)檢測(cè)和區(qū)分這2種病毒的方法十分必要。針對(duì)云南省豬病發(fā)生情況,以及豬瘟病毒及藍(lán)耳病病毒均屬于RNA病毒這一特點(diǎn),本研究設(shè)計(jì)了一步法RT-PCR方法同時(shí)檢測(cè)這兩種病毒核酸的方法,大大節(jié)約時(shí)間和試劑,也避免了實(shí)驗(yàn)過(guò)程中反轉(zhuǎn)錄和PCR多個(gè)環(huán)節(jié)造成污染的機(jī)會(huì)。用本研究建立的一步法RT-PCR方法對(duì)云南地區(qū)部分豬場(chǎng)送檢的“高熱病”發(fā)病豬的樣品進(jìn)行了檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果與豬瘟病毒和藍(lán)耳病病毒商品化試劑盒檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較,證實(shí)本研究設(shè)計(jì)的引物的敏感性完全滿足一般實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)需要。本研究為云南豬瘟和藍(lán)耳病混合感染的快速檢測(cè)提供了重要的技術(shù)支持。
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品 省賽三等獎(jiǎng)
2011年5月獲云南農(nóng)業(yè)大學(xué)第九屆“挑戰(zhàn)杯”學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽一等獎(jiǎng);
2011年6月獲云南省第六屆高校青年學(xué)術(shù)科技作品競(jìng)賽三等獎(jiǎng);
2011年6月文章發(fā)表于核心期刊《動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展》;