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基本信息

作品名稱:
擬南芥熱激因子AtAtHsfA1a表達純化的研究
大類:
自然科學類學術(shù)論文
小類:
生命科學
簡介:

本研究以構(gòu)建的表達擬南芥熱激因子AtHsfA1a的大腸桿菌E coli M15為材料,用異丙基硫代-β-D-半乳糖苷誘導表達AtHsfA1a,再通過Ni-NTA-Agarose親和層析純化表達的AtHsfA1a,通過SDS-PAGE電泳分析表達蛋白和純化蛋白,獲得了表達純化的AtHsfA1a。從基因表達調(diào)控水平上研究植物對逆境適應的分子機制和研究耐逆境基因的作用機理,提高植物各種抗逆性有重大意義。

詳細介紹:

熱激轉(zhuǎn)錄因子又稱為熱激因子(heat shock transcription factors,HSFs)是真核生物熱激反應的主要轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。在擬南芥中存在21個熱激因子的同源體,組成熱激因子家族。雖然目前對絕大多數(shù)同源體的功能還不了解,但研究顯示其中熱激因子AtHsfA1a是與耐逆境有關(guān)的主要調(diào)控因子,對AtHsfA1a逆境信號轉(zhuǎn)導機理研究顯示,與大多數(shù)HSFs相似,在非逆境條件下,AtHsfA1a以非活性的單體形式存在,逆境誘導AtHsfA1a單體形成三體(活性)、與靶DNA啟動子區(qū)熱激元件(HSE)特異性結(jié)合,從而調(diào)控逆境防御基因的表達。然而,AtHsfA1a在逆境應答途徑下游中如何誘導防御基因的表達仍然不清楚。
因此本研究以構(gòu)建的表達擬南芥熱激因子AtHsfA1a的大腸桿菌E coli M15(pET30a/ His6- AtHsfA1a)為材料,用異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導表達AtHsfA1a,再通過Ni-NTA-Agarose親和層析純化表達的AtHsfA1a,通過SDS-PAGE電泳分析表達蛋白和純化蛋白,獲得了表達純化的AtHsfA1a。
本作品建立了穩(wěn)定的適用于逆境應答研究的AtHsfA1a蛋白的表達、純化體系,為研究AtHsfA1a的逆境應答行為提供研究材料,為進一步全面認識AtHsfA1a調(diào)控功能多樣性的生理代謝基礎奠定基礎。從基因表達調(diào)控水平上研究植物對逆境適應的分子機制以及研究耐逆境基因的作用機理,對揭示植物耐逆境反應機理亦具有顯著意義,也是進一步應用耐逆境基因改善植物耐逆性的理論基礎,在農(nóng)業(yè)上對提高植物各種抗逆性具有重大意義。

獲獎情況:

第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品 省賽二等獎
本作品是指導教師的科研課題,國家自然科學基金項目(31060039)、云南省自然科學基金面上項目(2010ZC163)。

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