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本研究以構(gòu)建的表達擬南芥熱激因子AtHsfA1a的大腸桿菌E coli M15為材料，用異丙基硫代-β-D-半乳糖苷誘導表達AtHsfA1a，再通過Ni-NTA-Agarose親和層析純化表達的AtHsfA1a，通過SDS-PAGE電泳分析表達蛋白和純化蛋白，獲得了表達純化的AtHsfA1a。從基因表達調(diào)控水平上研究植物對逆境適應(yīng)的分子機制和研究耐逆境基因的作用機理，提高植物各種抗逆性有重大意義。

熱激轉(zhuǎn)錄因子又稱為熱激因子（heat shock transcription factors，HSFs）是真核生物熱激反應(yīng)的主要轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子。在擬南芥中存在21個熱激因子的同源體，組成熱激因子家族。雖然目前對絕大多數(shù)同源體的功能還不了解，但研究顯示其中熱激因子AtHsfA1a是與耐逆境有關(guān)的主要調(diào)控因子，對AtHsfA1a逆境信號轉(zhuǎn)導機理研究顯示，與大多數(shù)HSFs相似，在非逆境條件下，AtHsfA1a以非活性的單體形式存在，逆境誘導AtHsfA1a單體形成三體（活性）、與靶DNA啟動子區(qū)熱激元件（HSE）特異性結(jié)合，從而調(diào)控逆境防御基因的表達。然而，AtHsfA1a在逆境應(yīng)答途徑下游中如何誘導防御基因的表達仍然不清楚。
因此本研究以構(gòu)建的表達擬南芥熱激因子AtHsfA1a的大腸桿菌E coli M15(pET30a/ His6- AtHsfA1a)為材料，用異丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）誘導表達AtHsfA1a，再通過Ni-NTA-Agarose親和層析純化表達的AtHsfA1a，通過SDS-PAGE電泳分析表達蛋白和純化蛋白，獲得了表達純化的AtHsfA1a。
本作品建立了穩(wěn)定的適用于逆境應(yīng)答研究的AtHsfA1a蛋白的表達、純化體系，為研究AtHsfA1a的逆境應(yīng)答行為提供研究材料，為進一步全面認識AtHsfA1a調(diào)控功能多樣性的生理代謝基礎(chǔ)奠定基礎(chǔ)。從基因表達調(diào)控水平上研究植物對逆境適應(yīng)的分子機制以及研究耐逆境基因的作用機理，對揭示植物耐逆境反應(yīng)機理亦具有顯著意義，也是進一步應(yīng)用耐逆境基因改善植物耐逆性的理論基礎(chǔ)，在農(nóng)業(yè)上對提高植物各種抗逆性具有重大意義。

第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品 省賽二等獎
本作品是指導教師的科研課題，國家自然科學基金項目（31060039）、云南省自然科學基金面上項目（2010ZC163）。