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本課題選取了一種在大腸桿菌中十分重要的多重抗藥性蛋白作為目標(biāo)傳感器的載體,結(jié)合一種高效的非天然氨基酸技術(shù),在蛋白質(zhì)的特定位點(diǎn)引入一活性基團(tuán)與熒光探針相連,使得銅的濃度信號(hào)轉(zhuǎn)化為光學(xué)信號(hào)。
作為一個(gè)能夠響應(yīng)銅(II)的生物大分子器件,除了在理論上能給蛋白質(zhì)-金屬相互作用帶來(lái)更為深入的了解之外,實(shí)踐應(yīng)用前景也較為廣闊,對(duì)于銅的細(xì)胞毒性、銅誘發(fā)的人類疾病等方面的研究有重大意義。
為了解決現(xiàn)有活體銅(II)成像工具缺失的狀況,使一些銅相關(guān)的疾病的研究能夠深入展開(kāi),本課題設(shè)計(jì)構(gòu)建了一種銅(II)熒光生物傳感器。主要的設(shè)計(jì)結(jié)合了非天然氨基酸、溶劑化顯色熒光染料和點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)三種前沿技術(shù)。
傳感器利用MarR在銅(II)的誘導(dǎo)下會(huì)產(chǎn)生巨大的結(jié)構(gòu)變化,從而使一些位點(diǎn)的氨基酸殘基周?chē)h(huán)境發(fā)生由富水到疏水,最終導(dǎo)致這些殘基上的熒光小分子開(kāi)啟,產(chǎn)生熒光變化。
此傳感器具有良好的檢測(cè)下限,熒光變化達(dá)到一般熒光探針的要求。相信在完成后續(xù)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)后,我們能夠?qū)⑦@項(xiàng)技術(shù)真正地推廣到分子醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域,為人類疾病的深入研究作出貢獻(xiàn)。
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”作品 三等獎(jiǎng)
1.在研項(xiàng)目,尚未公開(kāi)發(fā)表,論文已遞交美國(guó)化學(xué)會(huì)審閱,將發(fā)表于美國(guó)化學(xué)會(huì)期刊(Journal of American Chemistry Society, JACS,影響因子8.2)。
2.xx大學(xué)第十九屆挑戰(zhàn)杯--特等獎(jiǎng)
3.第六屆首都挑戰(zhàn)杯--一等獎(jiǎng)