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為提高云南松成熟胚胚性愈傷組織的誘導及增殖率，為其體胚發(fā)生體系提供支持。以云南松成熟合子胚為外植體，用正交設計探索誘導愈傷組織的最適激素濃度配比及消毒方式。用不同方法增殖胚性愈傷，觀察記錄胚性愈傷形成過程。采用正交設計，既減少工作量，又可得到準確結論，填補了激素濃度對云南松胚性愈傷誘導的研究空白。采用固體條件培養(yǎng)增殖法，可以顯著提高胚性愈傷增殖率，為體胚發(fā)生大規(guī)模繁殖云南松奠定了基礎。

為提高云南松成熟胚胚性愈傷組織的誘導及增殖率，為建立云南松成熟胚體細胞胚胎發(fā)生體系提供支持，以云南松成熟合子胚為外植體，使用正交實驗設計，在DCR培養(yǎng)基上誘導胚性愈傷組織，以確定最佳消毒劑用量及激素濃度范圍。在此基礎上，設計密集梯度的激素濃度配比實驗，確定最佳誘導激素濃度配比。用不同的培養(yǎng)方法增殖胚性愈傷組織，并對胚性愈傷組織形成過程中形態(tài)學與細胞學變化進行觀察。其后提高培養(yǎng)基中肌醇濃度，增大滲透壓，添加ABA，誘導早期原胚。
結果表明，經(jīng)5%次氯酸鈉消毒20min，使用添加8mg/L 2,4-D、1mg/L 6-BA、500mg/L CH以及500mg/L谷氨酰胺的DCR培養(yǎng)基接種，可獲得較高誘導率；采用在愈傷組織周圍添加少量培養(yǎng)過該愈傷組織的培養(yǎng)基的方式繼代，可以顯著提高胚性愈傷組織的增殖率。在增殖培養(yǎng)基中添加ABA后,胚性細胞可逐漸發(fā)育形成胚性胚柄團。
實驗中多次發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)過愈傷組織的培養(yǎng)基可能具有促進細胞分裂，提高細胞胚性及抑菌等作用，猜測是愈傷組織形成過程中的自身分泌了相應有促進作用的物質所致。
論文明確了云南松成熟胚胚性愈傷組織的最佳誘導條件，采用固體條件培養(yǎng)方式大幅度提高了胚性愈傷組織的增殖率。根據(jù)條件培養(yǎng)可以提高胚性愈傷組織的增殖效果的現(xiàn)象，針對胚性愈傷組織的增殖過程及條件培養(yǎng)作用的可能原因進行了初步的分析，對利用云南松成熟胚進行體細胞胚胎發(fā)生有較大意義。

第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品 省賽特等獎
曾作為本校唯一入選的參展項目，于2010年9月代表學校參加教育部高等教育司主辦的“第三屆全國大學生創(chuàng)新論壇”。
相關初期研究成果《云南松成熟合子胚的胚性愈傷組織誘導條件探究》一文已發(fā)表于中文核心期刊《浙江林業(yè)科技》。（2010年7月 第30卷 第4期）
本論文《云南松成熟胚胚性愈傷組織誘導及增殖》已被《西北植物學報》接收，將于年內(nèi)發(fā)表。