北林專(zhuān)區(qū)
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基本信息
- 作品名稱(chēng)：
- 云南松成熟胚胚性愈傷組織誘導(dǎo)及增殖
- 大類(lèi)：
- 自然科學(xué)類(lèi)學(xué)術(shù)論文
- 小類(lèi)：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
為提高云南松成熟胚胚性愈傷組織的誘導(dǎo)及增殖率，為其體胚發(fā)生體系提供支持。以云南松成熟合子胚為外植體，用正交設(shè)計(jì)探索誘導(dǎo)愈傷組織的最適激素濃度配比及消毒方式。用不同方法增殖胚性愈傷，觀察記錄胚性愈傷形成過(guò)程。采用正交設(shè)計(jì)，既減少工作量，又可得到準(zhǔn)確結(jié)論，填補(bǔ)了激素濃度對(duì)云南松胚性愈傷誘導(dǎo)的研究空白。采用固體條件培養(yǎng)增殖法，可以顯著提高胚性愈傷增殖率，為體胚發(fā)生大規(guī)模繁殖云南松奠定了基礎(chǔ)。
- 詳細(xì)介紹：
為提高云南松成熟胚胚性愈傷組織的誘導(dǎo)及增殖率，為建立云南松成熟胚體細(xì)胞胚胎發(fā)生體系提供支持，以云南松成熟合子胚為外植體，使用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，在DCR培養(yǎng)基上誘導(dǎo)胚性愈傷組織，以確定最佳消毒劑用量及激素濃度范圍。在此基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)密集梯度的激素濃度配比實(shí)驗(yàn)，確定最佳誘導(dǎo)激素濃度配比。用不同的培養(yǎng)方法增殖胚性愈傷組織，并對(duì)胚性愈傷組織形成過(guò)程中形態(tài)學(xué)與細(xì)胞學(xué)變化進(jìn)行觀察。其后提高培養(yǎng)基中肌醇濃度，增大滲透壓，添加ABA，誘導(dǎo)早期原胚。結(jié)果表明，經(jīng)5%次氯酸鈉消毒20min，使用添加8mg/L 2,4-D、1mg/L 6-BA、500mg/L CH以及500mg/L谷氨酰胺的DCR培養(yǎng)基接種，可獲得較高誘導(dǎo)率；采用在愈傷組織周?chē)砑由倭颗囵B(yǎng)過(guò)該愈傷組織的培養(yǎng)基的方式繼代，可以顯著提高胚性愈傷組織的增殖率。在增殖培養(yǎng)基中添加ABA后,胚性細(xì)胞可逐漸發(fā)育形成胚性胚柄團(tuán)。實(shí)驗(yàn)中多次發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)過(guò)愈傷組織的培養(yǎng)基可能具有促進(jìn)細(xì)胞分裂，提高細(xì)胞胚性及抑菌等作用，猜測(cè)是愈傷組織形成過(guò)程中的自身分泌了相應(yīng)有促進(jìn)作用的物質(zhì)所致。論文明確了云南松成熟胚胚性愈傷組織的最佳誘導(dǎo)條件，采用固體條件培養(yǎng)方式大幅度提高了胚性愈傷組織的增殖率。根據(jù)條件培養(yǎng)可以提高胚性愈傷組織的增殖效果的現(xiàn)象，針對(duì)胚性愈傷組織的增殖過(guò)程及條件培養(yǎng)作用的可能原因進(jìn)行了初步的分析，對(duì)利用云南松成熟胚進(jìn)行體細(xì)胞胚胎發(fā)生有較大意義。
- 獲獎(jiǎng)情況：
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”作品 三等獎(jiǎng)
曾作為本校唯一入選的參展項(xiàng)目，于2010年9月代表學(xué)校參加教育部高等教育司主辦的“第三屆全國(guó)大學(xué)生創(chuàng)新論壇”。相關(guān)初期研究成果《云南松成熟合子胚的胚性愈傷組織誘導(dǎo)條件探究》一文已發(fā)表于中文核心期刊《浙江林業(yè)科技》。（2010年7月 第30卷 第4期）本論文《云南松成熟胚胚性愈傷組織誘導(dǎo)及增殖》已被《西北植物學(xué)報(bào)》接收，將于年內(nèi)發(fā)表。
