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在電化學(xué)免疫傳感器的構(gòu)建中免疫傳感界面的長期穩(wěn)定性是一個很重要的問題。本論文制備了一種新型穩(wěn)定的癌胚抗原（CEA）電化學(xué)免疫傳感器。該免疫傳感器是由金納米顆粒修飾玻碳電極所形成的傳感界面（GC-Ph-AuNP）構(gòu)建而得的。首先在玻碳電極上修士一層對苯二胺，然后金納米顆粒通過碳金鍵被固定到玻碳電極表面。癌胚抗原的抗體（anti-CEA）通過吸附在金納米顆粒表面從而被固定在玻碳電極上。本論文所制備的電化學(xué)免疫傳感器的線性范圍是10 fg 到 100 ng mL-1，檢出限為3 fg mL-1 (信噪比=3)。該免疫傳感器的響應(yīng)電流在一個月內(nèi)僅降低了4?。本論文所制的免疫傳感器展現(xiàn)了較高的靈敏性，較寬的線性范圍，較低的檢出限以及較好的選擇性和穩(wěn)定性。同時這種免疫傳感界面的構(gòu)建方式可以被廣泛的應(yīng)用在其他免疫傳感器的構(gòu)建中。

關(guān)鍵詞：癌胚抗原；電化學(xué)免疫傳感器；金納米顆粒；碳金鍵

疾病相關(guān)蛋白的精確及靈敏測定在臨床診斷、生物利用和生物化學(xué)研究中是非常重要的（Lefkowitz et al., 2010; Dutsch-Wicherek, 2010）。特別是，腫瘤和傳染性疾病相關(guān)蛋白的臨床測定是能盡早發(fā)現(xiàn)腫瘤、癌癥等疾病的高度可靠的診斷方法（Gunaseelan et al., 2010; Coyle and Johnston, 2010）。近年來免疫測定法由于其較好的選擇性和較高的靈敏度已經(jīng)在腫瘤標(biāo)志物的定量檢測和癌癥篩查中得到了越來越多的關(guān)注（Gas et al., 2010; Bosker and Huestis, 2009）。目前我們已經(jīng)形成了多種能夠精確檢測腫瘤標(biāo)志物的免疫分析方法，包括化學(xué)發(fā)光免疫分析法，熒光免疫分析法，拉曼光譜免疫分析法，電化學(xué)免疫分析法和表面等離子體共振免疫分析法（Xu et al., 2011; Tang et al., 2010; Song et al., 2009; Chen et al., 2009; Bi et al., 2009; Dai et al., 2011）。其中電化學(xué)免疫分析法由于具有靈敏度高、檢測限低，分析快速等優(yōu)點而引起了廣泛的關(guān)注（Wang et al., 2004; Centi et al., 2007; Zhang et al., 2010; Malhotra et al., 2010）。
由于納米技術(shù)的迅猛發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)將納米技術(shù)運用于電化學(xué)免疫傳感器可以進一步改善電化學(xué)免疫傳感器的性質(zhì)（Ma et al., 2002; Wang et al., 2007; Li et al., 2006）。最近，報道了一系列的將金納米材料應(yīng)用于固定生物分子的文章（Liu et al., 2006; Wang et al., 2006a,b; Wang et al., 2008）。其中金顆納米粒因其具有合成簡便、比表面積大和吸附能力強等優(yōu)勢而受到人們的格外關(guān)注。金納米顆粒良好的生物相容性和電子傳導(dǎo)能力可以在電極表面提供一個溫和的不受限制的微環(huán)境并促進表面生物分子和電極之間的電子傳遞，因而金納米顆粒常作為一種膜修飾材料而被用于電化學(xué)免疫傳感器的構(gòu)建（Ma et al., 2002; Shi et al., 2011; Wang et al., 2011; Xu et al., 2010; Su et al., 2006）。然而，含有金納米顆粒的修飾膜的長期穩(wěn)定性是其進一步應(yīng)用中一個亟待解決的問題。常見的固定金納米顆粒方法有靜電吸引法、包埋法以及利用化學(xué)鍵（S-Au、NH-Au鍵）的方法（Wang et al., 2003; Xu et al., 2007; Haryono et al., 2006; Shenhar et al., 2005; Pacifico et al., 2005; Tognarelli et al., 2005; Yamanoi et al., 2004）。這些方法存在著以下一些缺點：1）對基底物質(zhì)的附著力不夠（包埋法、S-Au、NH-Au鍵法）；2）在特定的化學(xué)環(huán)境里不穩(wěn)定（靜電吸引法、包埋法）；3）金納米顆粒固定的多少及方向不可控（包埋法、S-Au、NH-Au鍵法）以及4）固定金納米顆粒的用時太長（靜電吸引法）（Wohltgen et al., 1998; Leibowitz et al., 1999; Templeton et al., 2000）。
本項工作中，研究出一種新型的含有被穩(wěn)定固定到玻碳電極表面的金納米顆粒的免疫傳感界面（GC-Ph-AuNP），并以此免疫傳感界面制備了用于癌胚抗原（CEA）檢測的新型電化學(xué)免疫傳感器。該傳感器具有良好的穩(wěn)定性及重現(xiàn)性、較廣的線性范圍（10 pg-100 ng mL?1）、較低的檢出限（3 fg mL?1，信噪比=3）以及簡單快速的制備方法。

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