湖南農(nóng)大專(zhuān)區(qū)
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基本信息
- 作品名稱：
- p14多肽——新型黃科病毒解螺旋酶抑制劑的克隆表達(dá)系統(tǒng)構(gòu)建及抗病毒研究
- 大類(lèi)：
- 自然科學(xué)類(lèi)學(xué)術(shù)論文
- 小類(lèi)：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
目的：研究新型抗病毒肽-豬瘟病毒p14肽對(duì)豬瘟病毒的抗性研究。方法：通過(guò)SOE PCR法擴(kuò)增目的基因，基因片段克隆至pET32a（+）質(zhì)粒中，構(gòu)建重組原核表達(dá)系統(tǒng)，表達(dá)出的原核蛋白純化后，采用實(shí)時(shí)定量PCR法和間接免疫熒光法對(duì)4種黃科病毒的進(jìn)行抗性研究。同時(shí)將TAT轉(zhuǎn)導(dǎo)域同p14肽相結(jié)合。結(jié)果：通過(guò)兩種方法的對(duì)比，豬瘟病毒p14肽抗豬瘟病毒效果最明顯，TAT-p14串聯(lián)肽抗病毒效果更強(qiáng)。
- 詳細(xì)介紹：
黃病毒科病是一種重要的引起嚴(yán)重疾病的動(dòng)物傳染病病原體，調(diào)查表明黃病毒科病毒存在一段保守蛋白：p14蛋白。這種蛋白表現(xiàn)出很強(qiáng)的抗病毒活性，也是一種發(fā)展?jié)摿薮蟮目共《镜闹委熕幬?。在本?xiàng)目中，我們主要研究作為豬瘟病毒NS3解旋酶抑制劑的p14蛋白對(duì)豬瘟病毒的抑制作用。我們首先鑒定了p14蛋白的抗病毒活性，然后將p14蛋白同HIV-1 TAT蛋白串聯(lián)結(jié)合，有利于蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞。p14蛋白在體外實(shí)驗(yàn)中表現(xiàn)出很高的抗病毒活性，我們就此猜測(cè)串聯(lián)多肽在p14蛋白的基礎(chǔ)上活性會(huì)有所提高。因此，在本項(xiàng)目中，我們首次將p14蛋白應(yīng)用于抗豬瘟病毒的活性研究，結(jié)果證實(shí)p14蛋白的確對(duì)豬瘟病毒具有良好的抗性。在此基礎(chǔ)上，我們又將p14蛋白同TAT轉(zhuǎn)導(dǎo)域相結(jié)合，研究串聯(lián)多肽的抗病毒性。結(jié)果證實(shí)，串聯(lián)多肽比單一的p14蛋白活性有一定的提高。
- 獲獎(jiǎng)情況：
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”作品 二等獎(jiǎng)
1.本項(xiàng)目立項(xiàng)于2009年，為我省大學(xué)生科技創(chuàng)新項(xiàng)目，2010年結(jié)題。編號(hào)為DFCS200902。
2.在《中國(guó)生物制品學(xué)》雜志上發(fā)表論文《HIV-Tat蛋白轉(zhuǎn)導(dǎo)域的研究進(jìn)展》。
3.核心內(nèi)容已投SCI雜志《Journal of veterinary medical science》。
