湖南農(nóng)大專區(qū)
基本信息
- 作品名稱：
- 一株虎杖糖苷水解酶產(chǎn)生菌的篩選、鑒定及其酶學(xué)特性的研究
- 大類：
- 自然科學(xué)類學(xué)術(shù)論文
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
采用濾紙熒光斑點(diǎn)-薄層層析法同步測定，從瀏陽河附近土壤中分離獲得一株虎杖糖苷水解酶活力高的棘孢曲霉Lysgpj-10。粗酶液經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳電洗脫二步循環(huán)法分離純化，該酶為β-葡萄糖苷酶，為單體蛋白，分子量為27.3kDa，等電點(diǎn)為4.65。該酶水解虎杖苷的最適pH為5.0，最適溫度為55℃，在此條件下虎杖糖苷水解酶的米氏常數(shù)Km為5 mg/mL虎杖苷，白藜蘆醇轉(zhuǎn)化率達(dá)98.5%。
- 詳細(xì)介紹：
生物轉(zhuǎn)化與催化是生物技術(shù)革命的第三個浪潮，目前生物轉(zhuǎn)化法制備白藜蘆醇是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。本作品采用濾紙熒光斑點(diǎn)-薄層層析法同步測定，從瀏陽河附近土壤中分離獲得一株虎杖糖苷水解酶活力高的菌株Lysgpj-10。經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定，確定該菌為棘孢曲霉（Aspergillus.aculeatus CGMCC No.3876）。粗酶液經(jīng)Amicon XM-50超濾濃縮、聚丙烯酰胺凝膠電泳電洗脫二步循環(huán)法分離純化，該酶為β-葡萄糖苷酶，為單體蛋白，分子量為27.3kDa，等電點(diǎn)為4.65。酶學(xué)特性研究表明，該酶水解虎杖苷的最適pH為5.0，最適溫度為55℃，在此條件下虎杖糖苷水解酶的米氏常數(shù)Km為5 mg/mL虎杖苷，白藜蘆醇轉(zhuǎn)化率達(dá)98.5%。制備虎杖糖苷水解酶及其復(fù)合酶制劑，開發(fā)具有自主知識產(chǎn)權(quán)的制備高純度白藜蘆醇的工藝路線，并用于指導(dǎo)類似天然產(chǎn)物的開發(fā)，將促進(jìn)我國生物轉(zhuǎn)化與催化領(lǐng)域的發(fā)展。
- 獲獎情況：
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”作品 三等獎
2011年5月榮獲我校大學(xué)生學(xué)術(shù)科技作品競賽二等獎。
2011年5月榮獲我省大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽二等獎。
