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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 大鼠新型挫傷型脊髓損傷模型的建立及評(píng)價(jià)
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 通過對(duì)經(jīng)典的Allen法進(jìn)行創(chuàng)新，采用打擊并加壓的方法制備新型挫傷型脊髓損傷模型，模擬臨床實(shí)際損傷狀態(tài)。根據(jù)不同受壓時(shí)間對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的損傷，應(yīng)用BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分觀察大鼠脊髓損傷后活動(dòng)情況，組織學(xué)和病理學(xué)方法觀察大鼠脊髓損傷后變化，免疫組織化學(xué)方法對(duì)HMGB1在脊髓損傷中的表達(dá)變化進(jìn)行檢測(cè)，建立穩(wěn)定的、理想的脊髓損傷動(dòng)物模型。
- 詳細(xì)介紹：
- 本實(shí)驗(yàn)對(duì)于經(jīng)典的Allen法建模創(chuàng)新，采用改良Allen法并實(shí)行加壓的方法制備新型挫傷型脊髓損傷模型，對(duì)照組采用改良的Allen法制備急性脊髓挫傷模型,實(shí)驗(yàn)組在打擊的基礎(chǔ)上分別受壓3s、5s、10 s,制備新型挫傷型脊髓損傷模型;各組分別于術(shù)后1、3、7、14、21 d觀察其行為學(xué)評(píng)分和病理學(xué)改變;免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)促炎因子高遷移率族蛋白B1 (HMGB1)在各組不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化。制備客觀穩(wěn)定、適用臨床研究的模型,為脊髓損傷發(fā)生的機(jī)制和及時(shí)有效的臨床治療措施奠定基礎(chǔ)。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的:對(duì)Allen法創(chuàng)新，制備新型SCI模型,通過行為學(xué)評(píng)分和形態(tài)學(xué)方法進(jìn)行評(píng)價(jià)。思路：傳統(tǒng)重物打擊模型僅模擬了最初打擊損傷狀態(tài),而忽略了人類SCI脊柱骨折的持續(xù)擠壓作用。本實(shí)驗(yàn)對(duì)Allen法創(chuàng)新，制備新型SCI模型，對(duì)照組為急性SCI模型,實(shí)驗(yàn)組打擊并分別受壓3s、5s、10s;各組分別于術(shù)后1、3、7、14、21 d觀察其行為學(xué)評(píng)分和病理學(xué)改變;檢測(cè)HMGB1在各組不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)經(jīng)典的Allen法進(jìn)行創(chuàng)新，采用打擊并實(shí)行加壓的方法制備新型挫傷型脊髓損傷模型，模擬臨床實(shí)際損傷狀態(tài)。根據(jù)不同受壓時(shí)間對(duì)機(jī)體產(chǎn)生的損傷，應(yīng)用BBB運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分觀察大鼠脊髓損傷后活動(dòng)情況，HE染色、甲苯胺蘭染色法觀察大鼠脊髓損傷后組織學(xué)變化，免疫組織化學(xué)方法對(duì)HMGB1在脊髓損傷中的表達(dá)變化進(jìn)行檢測(cè)，分析在脊髓損傷不同時(shí)期的變化規(guī)律，建立穩(wěn)定的、理想的脊髓損傷動(dòng)物模型。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 脊髓損傷是一種致殘率很高的疾病，患者呈逐年上升趨勢(shì)。脊髓損傷后的病理生理機(jī)制非常復(fù)雜,由于不能依靠臨床開展系統(tǒng)的研究,因而建立理想的動(dòng)物模型是實(shí)驗(yàn)研究的基本前提，目前挫傷型脊髓損傷模型接近人類脊髓損傷的病理生理特點(diǎn)及變化規(guī)律,但忽略了持續(xù)性的擠壓作用。 本實(shí)驗(yàn)創(chuàng)新新型SCI模型，充分模擬臨床實(shí)際損傷狀態(tài)，推動(dòng)SCI研究的不斷深入，為SCI患者功能障礙減輕，生活質(zhì)量改善提供幫助。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的:制備新型挫傷型脊髓損傷大鼠模型,通過行為學(xué)評(píng)分和形態(tài)學(xué)方法進(jìn)行評(píng)價(jià),為進(jìn)一步研究脊髓損傷的機(jī)制及早期治療提供依據(jù)。方法:SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組(A組)采用改良的Allen法制備急性脊髓挫傷模型,實(shí)驗(yàn)組在打擊的基礎(chǔ)上分別受壓3s(B組)、5s(C組)和10s(D組),制備新型挫傷型脊髓損傷模型;各組分別于術(shù)后1、3、7、14、21 d觀察其行為學(xué)評(píng)分和病理學(xué)改變;免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)促炎因子高遷移率族蛋白B1 (HMGB1)在各組不同時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)BBB評(píng)分和損傷程度與對(duì)照組比較均有顯著差異(P<0. 05),其中A組和B組術(shù)后損傷程度差別微小; C組后肢運(yùn)動(dòng)功能障礙明顯,脊髓損傷區(qū)域出現(xiàn)典型的病理改變;D組損傷最嚴(yán)重,死亡率高。HMGB1表達(dá)以損傷C組為典型代表,術(shù)后陽性表達(dá)明顯增多,第3d達(dá)高峰,主要表達(dá)部位為神經(jīng)元胞漿和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞核內(nèi)。結(jié)論:采用改良Allen法打擊再受壓5 s制備的脊髓損傷模型能很好地模擬臨床實(shí)際,且穩(wěn)定性高、可復(fù)制性好,為一種新型挫傷型脊髓損傷模型。
獲獎(jiǎng)情況
- 論文《實(shí)驗(yàn)性脊髓損傷模型的研究進(jìn)展》發(fā)表于解剖科學(xué)進(jìn)展2009,15(2):253—256 論文《大鼠新型挫傷型脊髓損傷模型的建立及評(píng)價(jià)發(fā)表于》神經(jīng)解剖學(xué)雜志2010,26(6):638-642 論文《人臍血MSCs移植修復(fù)大鼠脊髓損傷的效果及機(jī)制》已被中國臨床解剖學(xué)雜志接受，待發(fā)
鑒定結(jié)果
- 此模型充分模擬臨床實(shí)際損傷狀態(tài)，穩(wěn)定性強(qiáng)，可靠性高，推動(dòng)了SCI研究的不斷深入，為脊髓損傷的臨床研究提供了很好應(yīng)用前景。
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)是一種致殘率很高的疾病。隨著交通業(yè)和建筑業(yè)的迅速發(fā)展，SCI患者呈逐年上升趨勢(shì)，是脊柱外科和神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域關(guān)注的熱點(diǎn)和難點(diǎn)。由于脊髓是許多神經(jīng)功能的中介通路，SCI及其繼發(fā)性病理生理反應(yīng)可直接導(dǎo)致神經(jīng)功能損傷，從而引起組織、器官功能障礙。脊髓損傷后的病理生理機(jī)制非常復(fù)雜,研究SCI的組織病理學(xué)、細(xì)胞和組織化學(xué)以及電生理變化,對(duì)于闡明SCI的自然病程和探索新的治療方法有極為重要的指導(dǎo)意義。由于不能依靠臨床開展系統(tǒng)的研究,因而建立理想的動(dòng)物模型是實(shí)驗(yàn)研究的基本前提。脊髓損傷研究已趨向于科學(xué)性、先進(jìn)性、創(chuàng)新性，對(duì)動(dòng)物模型的建立將提出更高、更新、更切實(shí)際的要求。壓迫型脊髓損傷模型為非瞬間損傷,便于進(jìn)行神經(jīng)功能和代謝改變的檢測(cè);銳性脊髓損傷模型適于進(jìn)行再生性實(shí)驗(yàn)研究,但與臨床之間相關(guān)性差;脊髓缺血及再灌注損傷模型尚不能滿足臨床治療的需要。動(dòng)物模型都有其優(yōu)缺點(diǎn)，完全理想化的模型是不存在的，在今后相當(dāng)長一段時(shí)間內(nèi)，進(jìn)一步研究和完善SCI模型，加深對(duì)其機(jī)制的理解，推動(dòng)SCI研究的不斷深入，最終使脊髓損傷后功能重建成為現(xiàn)實(shí)，使SCI患者功能障礙減輕，生活質(zhì)量改善。 本研究對(duì)于經(jīng)典的Allen法建模創(chuàng)新,采用打擊并壓迫的方法充分模擬臨床實(shí)際，觀察組織損傷信號(hào)HMGB1的表達(dá)規(guī)律符合損傷的病理變化特點(diǎn)，研究出一種通用的、具備穩(wěn)定性好、可復(fù)制性強(qiáng)、存活率高的SCI動(dòng)物模型，將為脊髓損傷發(fā)生的機(jī)制和及時(shí)有效的臨床治療措施奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
