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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 黑龍江省科技廳項(xiàng)目（編號(hào)：GB06B204-4）和黑龍江農(nóng)墾總局項(xiàng)目（HNKXIV-08-05a）
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 無(wú)
- 詳細(xì)介紹：
- 無(wú)
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本試驗(yàn)以初生籽鵝為研究對(duì)象，選擇GAPDH、ACTB、SDH、HPRT1、18S rRNA、28S rRNA、和β-tubulin共7個(gè)內(nèi)參基因，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)檢測(cè)新生籽鵝五種組織中各內(nèi)參基因表達(dá)水平，比較這些常用內(nèi)參基因的表達(dá)穩(wěn)定性，為進(jìn)一步研究籽鵝組織相關(guān)基因表達(dá)奠定基礎(chǔ)。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 本研究通過(guò)SYBR Green Ⅰ實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法對(duì)籽鵝組織中內(nèi)參基因的選擇做了系統(tǒng)的比較分析。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 確定了新生籽鵝五種組織中常用的7個(gè)候選內(nèi)參基因表達(dá)水平，最終確定了新生籽鵝組織中最佳的內(nèi)參基因及其數(shù)目，為進(jìn)一步研究籽鵝組織相關(guān)基因表達(dá)奠定基礎(chǔ)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 分別以1日齡健康籽鵝肝臟、腎臟、心臟、肌肉和卵巢為研究對(duì)象，應(yīng)用實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)，探討28S rRNA、18S rRNA、GAPDH和ACT、HPRT1、SDH和TUB七個(gè)內(nèi)參基因mRNA的表達(dá)水平。經(jīng)過(guò)geNorm和NormFinder程序分析，結(jié)果顯示7個(gè)內(nèi)參基因穩(wěn)定度由高到低為GAPDH=HRPT1 >28S rRNA > TUB > SDH > ACT > 18S rRNA；基因表達(dá)的穩(wěn)定值分別為0.215(GAPDH)、0.215(HRPT1)、0.339(28S rRNA)、0.471(TUB)、0.721(SDH)、0.888(ACT)、1.177(18S rRNA)，結(jié)果表明GAPDH和HRPT1兩個(gè)內(nèi)參基因適合用于目的基因表達(dá)的校正。
獲獎(jiǎng)情況
- 無(wú)
鑒定結(jié)果
- 無(wú)
參考文獻(xiàn)
- [4] Vandesompele J，De Preter K，Pattyn F，et al．Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multipleinternal control genes[J]．Genome Biology，2002，3(7)：1~11． [5] Claus L A，Jens L J，Torben F O．Normalization of real-time quantitative reverse transcription-PCR data：A model-based variance estimation approach to identify genes suited for normalization，applied to bladder and colon data sets[J]．Cancer Research，2004，64：5245~5250． [6] Infante C，Matsuoka M P，Asensio E，et al．Selection of house-keeping genes for gene expression studies in larvae from flatfish using real-time PCR[J]．BMC Mol Biol，2008(9)：28． [8] Suzuki T，Higgins P J，Crawford D R．Control selection for RNA quantitation[J]．Biotechniques，2000，29(2)：332~337．
同類課題研究水平概述
- 目前關(guān)于內(nèi)參基因選擇方面的研究尚不全面，且籽鵝組織中內(nèi)參的選擇尚未見(jiàn)報(bào)道。
