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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 微波輔助提取孔鰩抗氧化和血管生成抑制活性軟骨多糖的研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 對微波輔助堿液提孔鰩軟骨多糖的方法及其抗氧化和血管生成抑制活性進(jìn)行研究。本實(shí)驗(yàn)采用微波輔助堿液提取與木瓜蛋白酶水解相結(jié)合的加工工藝，運(yùn)用正交試驗(yàn)法對提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，采用還原力、DPPH?和?OH 清除實(shí)驗(yàn)對多糖抗氧化能力進(jìn)行測定，采用雞胚絨毛尿囊膜（CAM）模型對其血管生成抑制活性進(jìn)行評價。
- 詳細(xì)介紹：
- 借鑒鯊魚和赤魟軟骨多糖的研究經(jīng)驗(yàn)，以孔鰩軟骨為原料，進(jìn)行其活性多糖的研究，將為鰩魚軟骨替代鯊魚軟骨進(jìn)行藥物開發(fā)提供理論依據(jù)，對微波輔助堿液提孔鰩軟骨多糖的方法及其抗氧化和血管生成抑制活性進(jìn)行研究。 本實(shí)驗(yàn)采用微波輔助堿液提取與木瓜蛋白酶水解相結(jié)合的加工工藝，運(yùn)用正交試驗(yàn)法對提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，采用還原力、DPPH?和?OH 清除實(shí)驗(yàn)對多糖抗氧化能力進(jìn)行測定，采用雞胚絨毛尿囊膜（CAM）模型對其血管生成抑制活性進(jìn)行評價。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明微波輔助堿液提取和木瓜蛋白酶脫蛋白所得的精制多糖具有很好的抗氧化和血管生成抑制活性。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 軟骨魚類魟魚又以赤魟（Dasyatis akajei）和孔鰩（Raja porosa）資源最為豐富且價格較低廉。并且魟魚下腳料軟骨尚未得到有效利用，常作為廢棄物丟棄，既污染環(huán)境，又浪費(fèi)了寶貴的資源。已有的研究表明，赤魟軟骨多糖具有顯著的抗凝血、抗腫瘤和抑制新生血管生成的作用，與鯊魚軟骨多糖的活性極為接近。因此，以魟魚軟骨替代鯊魚軟骨進(jìn)行開發(fā)，對于鯊魚物種保護(hù)和魟魚資源高效利用均具有重要意義。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 論文以活性明確、資源豐富的孔鰩軟骨為研究對象，以微波提取技術(shù)進(jìn)行軟骨多糖的制備，以血管生成抑制活性和抗氧化活性作為其評價模型。論文所選的材料具有資源豐富，活性顯著的特點(diǎn)；所選用的多糖制備方法具有高效、快捷、節(jié)省能源和試劑的優(yōu)點(diǎn)；所采用的活性評價方法具有操作簡單、針對性強(qiáng)的好處。因此，本實(shí)驗(yàn)無論從實(shí)驗(yàn)材料，還是從實(shí)驗(yàn)方法上均能保證實(shí)驗(yàn)的順利進(jìn)行，而后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也充分的證實(shí)了實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的可行性。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實(shí)意義
- （1）本論文為孔鰩軟骨替代鯊魚軟骨進(jìn)行藥物開發(fā)提供了數(shù)據(jù)支持； （2）本論文為孔鰩軟骨多糖的制備提供了一種行之有效的方法； （3）本論文為開發(fā)高效的海洋抗腫瘤新藥提供候選成分； （4）本論文為魟魚軟骨的高值化利用提供一條新的途徑。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的：對微波輔助堿液提孔鰩軟骨多糖的方法及其抗氧化和血管生成抑制活性進(jìn)行研究。方法：實(shí)驗(yàn)采用微波輔助堿液提取與木瓜蛋白酶水解相結(jié)合的加工工藝，運(yùn)用正交試驗(yàn)法對提取工藝參數(shù)進(jìn)行優(yōu)化，采用還原力、DPPH?和?OH 清除實(shí)驗(yàn)對多糖抗氧化能力進(jìn)行測定，采用雞胚絨毛尿囊膜（CAM）模型對其血管生成抑制活性進(jìn)行評價。結(jié)果：微波輔助堿液提取最佳工藝參數(shù)為：微波功率650 W、提取溫度60℃、堿濃度15%、液料比35:1，提取時間7 min；木瓜蛋白酶脫蛋白精制孔鰩軟骨多糖的最佳條件為：酶解溫度50℃，pH 7.0，酶解時間2 h，酶量1.0%；最佳條件下精制的多糖為白色粉末，得率為13.77%，純度為88.75%。相同濃度下精制孔鰩軟骨多糖抗氧化能力均大于粗提多糖，精制多糖的血管生成抑制活性與硫酸軟骨素（CS）相當(dāng)，并且呈劑量依賴關(guān)系。結(jié)論：微波輔助堿液提取和木瓜蛋白酶脫蛋白所得的精制多糖具有很好的抗氧化和血管生成抑制活性。
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 從美國哈佛醫(yī)學(xué)院教授Folkman首次提出的“腫瘤生長依賴于血管形成”的觀點(diǎn)以后，腫瘤新生血管的形成與腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移關(guān)系受到普遍關(guān)注。目前，人們已針對血管生成不同環(huán)節(jié)開發(fā)破壞或抑制血管生成有效地阻止腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的藥物----腫瘤血管生成抑制劑（TAI），如針對血管內(nèi)皮細(xì)胞抑制其增殖、誘導(dǎo)其凋亡而達(dá)到抗腫瘤目的等；針對血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）或其受體（VEGFR）的藥物avastin和anti-huMAB-VEGFR1等，而且TAI的研究已取得較大進(jìn)展，處于研究和開發(fā)中的TA I候選物近500種，數(shù)十種已經(jīng)進(jìn)入臨床研究，另有如貝伐單抗等已成功進(jìn)入市場。目前，藥物學(xué)家已從陸源生物中研發(fā)了幾十種有效的抗腫瘤藥物，如紫杉醇類、喜樹堿類、鬼臼毒素類和長春堿類等。然而，隨著可研究陸地生物資源的逐漸減少，發(fā)現(xiàn)高效低毒的抗腫瘤藥物的幾率也大大降低，從而人們將目光轉(zhuǎn)向了生境獨(dú)特，占地球生物總量80%以上的海洋生物。目前，已有部分源自海洋生物的抗腫瘤候選藥物如Haliclondrin B、Spongistatins、Bryostatin 1、Dolastatin 10、Lamellarin N、ET743、KRN700、Sarcodictycins、Haliclondrin B和Didemnins等進(jìn)入臨床或臨床前研究階段。目前，已從海洋生物中獲得20多種具有獨(dú)特作用機(jī)制的血管生成抑制劑，如來源于海藻激活MMP-2 /9、VEGF和FGF-2的fucoidan、來源于海洋細(xì)菌的抑制VEGF生成的salinosporamide A (NP I20052)、以及來源于海綿抑制bFGF和VEGF生成的bastadin 6等。特別是來源于軟骨魚類降低VEGF和HIF-2a的表達(dá)和抑制MMPS和VEGFR信號通路的neovastat倍受關(guān)注。而我校羅紅宇教授對赤魟的軟骨研究發(fā)現(xiàn)，其亦含有活性顯著的血管生成抑制物質(zhì)，并從中制備了血管生成抑制因子DCAIF-I。鯊魚和赤魟均屬軟骨魚類，我國約有217種，主要分為鯊、鰩、魟、鲼、電鰩和銀鮫類，均為主要藥用魚類，并未得到充分研究，已有的研究也主要集中在鯊魚和赤魟上。另外，魟魚下腳料軟骨也未受到足夠重視，常作為廢棄物丟棄，既污染環(huán)境，又浪費(fèi)了寶貴的資源。
