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基本信息
- 項目名稱：
- 楊梅Cu/Zn超氧化物歧化酶基因（MrSOD1）cDNA的克隆及表達分析
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 本研究以楊梅葉為材料，提取總RNA，根據(jù)植物Cu/Zn超氧化物歧化酶的5′和3′末端設(shè)計簡并引物，利用RT-PCR技術(shù)，從楊梅葉中克隆到一個Cu/Zn超氧化物歧化酶基因MrSOD1(Genbank accession No. GQ404510)編碼區(qū)全長cDNA序列。
- 詳細(xì)介紹：
- 本研究以楊梅葉為材料，提取總RNA，根據(jù)植物Cu/Zn超氧化物歧化酶的5′和3′末端設(shè)計簡并引物，利用RT-PCR技術(shù)，從楊梅葉中克隆到一個Cu/Zn超氧化物歧化酶基因MrSOD1(Genbank accession No. GQ404510)編碼區(qū)全長cDNA序列，長度為461 bp。該基因編碼一個由152 個氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)。楊梅MrSOD1具有Cu/Zn超氧化物歧化酶的特征信號序列GFHVHAlGDtT和GNAGgRvACgiI。序列同源性分析表明，楊梅MrSOD1與GenBank中注冊的SOD序列的同源性均在77%以上。蛋白疏水性分析顯示，楊梅MrSOD1具2 個明顯的跨膜區(qū)。半定量RT-PCR分析顯示，MrSOD1在楊梅葉、枝條、果和花4 種組織中均有表達，其表達量為果>葉>花>枝條，相對表達量分別為1.1489、0.2376、2.8714和1.0321。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 超氧化物歧化酶是植物體內(nèi)活性氧清除系統(tǒng)中的抗氧化酶，該酶在逆境脅迫下增強表達能夠提高植物清除活性氧的能力，增加植物的抗逆性。本項目旨在克隆楊梅超氧化物歧化酶基因，并分析該基因表達模式，為探索其調(diào)控途徑及楊梅抗氧化傷害的分子機理奠定基礎(chǔ)。
科學(xué)性、先進性及獨特之處
- 以楊梅為研究對象進行SOD基因與植物抗逆性關(guān)系的研究迄今尚未見報道。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 本研究旨在克隆楊梅超氧化物歧化酶基因（該基因命名為MrSOD1）的cDNA序列，為研究該基因時空表達特性，探索其調(diào)控途徑及楊梅抗氧化傷害的分子機理奠定基礎(chǔ)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 本研究以楊梅葉為材料，提取總RNA，根據(jù)植物Cu/Zn超氧化物歧化酶的5′和3′末端設(shè)計簡并引物，利用RT-PCR技術(shù)，從楊梅葉中克隆到一個Cu/Zn超氧化物歧化酶基因MrSOD1(Genbank accession No. GQ404510)編碼區(qū)全長cDNA序列，長度為461 bp。該基因編碼一個由152 個氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)。楊梅MrSOD1具有Cu/Zn超氧化物歧化酶的特征信號序列GFHVHAlGDtT和GNAGgRvACgiI。序列同源性分析表明，楊梅MrSOD1與GenBank中注冊的SOD序列的同源性均在77%以上。蛋白疏水性分析顯示，楊梅MrSOD1具2 個明顯的跨膜區(qū)。半定量RT-PCR分析顯示，MrSOD1在楊梅葉、枝條、果和花4 種組織中均有表達，其表達量為果>葉>花>枝條，相對表達量分別為1.1489、0.2376、2.8714和1.0321。
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻
- [1] McCord J M, Fridovich I. Superoxide dismutase. an enzymic function for erythrocuprein (hemocuprein)[J]. J. Biol. Chem., 1969,244(22):6049–6055. [2] Ma X J, Zhu D H. Functional roles of the plant superoxide dismutase[J]. Hereditas, 2003,25(2):225-231. [3] Kim E J, Kim H P, Hah Y C, et al. Differential expression of superoxide dismutases containing Ni and Fe/Zn in Streptomyces coelicotor[J]. Eur. J. Biochem., 1996,(241):178-185. [4] Tsang E W, Bowler C, Herouart D, et al. Differential regulation of superoxide dismutases in plants exposed to environmental stress[J]. Plant Cell, 1991,3(8):783-792. [5] Perl T R, Galun E. The tomato Cu, Zn superoxide dismutase genes are developmentally regulated and respond to light and stress[J]. Plant Mol. Biol., 1991,(17):745-760.
同類課題研究水平概述
- 自從第一個植物SOD基因從玉米中克隆以后，植物SOD基因的克隆在國外進展迅速。科研工作者主要從一些經(jīng)濟作物中得到SOD基因的cDNA序列或表達序列標(biāo)簽（expressed sequence tags，EST）。Fe-SOD基因也從水稻（Oryza sativa L.）、擬南芥（Arabidopsis thaliana）、大豆（Glycine max）、白花丹葉煙草（Nicoliana plumbaginifolia）和樟樹（Cinnamomum camphora）等高等植物中得到克隆。Cu/Zn-SOD有較多的保守位點。這為同源PCR克隆策略提供了依據(jù)。 楊梅（Myrica rubra (Lour) Sieb. and Zucc.）是雙子葉綱楊梅科（Mycicaceae）楊梅屬（Myrica L.）常綠灌木或小喬木，是原產(chǎn)于中國的亞熱帶果樹之一。楊梅喜溫暖濕潤氣候，耐陰，喜排水良好的酸性土，微堿性土壤也能適應(yīng)，深根性，萌芽力強。以楊梅為研究對象進行SOD基因與植物抗逆性關(guān)系的研究迄今尚未見報道。本研究旨在克隆楊梅超氧化物歧化酶基因（該基因命名為MrSOD1）的cDNA序列，為研究該基因時空表達特性，探索其調(diào)控途徑及楊梅抗氧化傷害的分子機理奠定基礎(chǔ)。
