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基本信息
- 項目名稱：
- The Clinical Significances of α-Adducin Gene G614T
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 檢測浙江地區(qū)原發(fā)性高血壓病人α-內(nèi)收蛋白（ADD1基因）G460T單核苷酸多態(tài)性（SNP）。以健康人外周血樣本為對照，收集浙江地區(qū)原發(fā)性高血壓病人外周血血樣，提取基因組DNA。以酶切法檢測α-內(nèi)收蛋白G460T的點突變頻率，結(jié)合臨床資料探討α-內(nèi)收蛋白的點突變在原發(fā)性高血壓發(fā)病過程中的意義。
- 詳細(xì)介紹：
- 目的：探討浙江地區(qū)原發(fā)性高血壓患者α-內(nèi)收蛋白G460T突變與原發(fā)性高血壓發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸之間的相關(guān)性。基本思路：檢測浙江地區(qū)原發(fā)性高血壓病人α-內(nèi)收蛋白（ADD1基因）G460T單核苷酸多態(tài)性（SNP）。以健康人外周血樣本為對照，收集浙江地區(qū)原發(fā)性高血壓病人外周血血樣，提取基因組DNA。以酶切法檢測α-內(nèi)收蛋白G460T的點突變頻率，結(jié)合臨床資料探討α-內(nèi)收蛋白的點突變在原發(fā)性高血壓發(fā)病過程中的意義。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 檢測浙江地區(qū)原發(fā)性高血壓病人α-內(nèi)收蛋白（ADD1基因）G460T單核苷酸多態(tài)性（SNP）。以健康人外周血樣本為對照，收集浙江地區(qū)原發(fā)性高血壓病人外周血血樣，提取基因組DNA。以酶切法檢測α-內(nèi)收蛋白G460T的點突變頻率，結(jié)合臨床資料探討α-內(nèi)收蛋白的點突變在原發(fā)性高血壓發(fā)病過程中的意義。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨特之處
- 科學(xué)性：依托本校成熟的分子生物學(xué)平臺，杭州市第一人民醫(yī)院大量的臨床樣本與完善的臨床資料，采用PCR-RFLP檢測方法完成原發(fā)性高血壓（EH）患者ADD1 基因G614TSNP的檢測。先進(jìn)性：發(fā)現(xiàn)α-內(nèi)收蛋白T等位基因攜帶者伴隨有高水平的血漿LDL。對患者按性別分組后發(fā)現(xiàn)女性EH組LDL水平無差異，而男性組有顯著性差異。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 本研究結(jié)果顯示在浙江地區(qū)人群中α-內(nèi)收蛋白基因G614T多態(tài)性與原發(fā)性高血壓（EH）有關(guān)。這一突變可為評估男性EH病人罹患其他心血管系統(tǒng)疾病，如動脈粥樣硬化等，進(jìn)行一定的預(yù)測。
學(xué)術(shù)論文摘要
- ABSTRACT BACKGROUND To examine the association between α-adducin gene G614T mutation and risk of essential hypertension. METHODS
獲獎情況
- 2010年3月 浙江醫(yī)學(xué)高等專科學(xué)校學(xué)報 中文論文發(fā)表 2010年6月 浙江醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校 學(xué)生處（學(xué)工部） 2009年度學(xué)生科技教學(xué)文化成果獎勵二等獎 2010年11月 浙江醫(yī)學(xué)高等?？茖W(xué)校首屆“求真杯”大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽三等獎 2010年12月 Clinia Chimica Acta 修回
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- 現(xiàn)有技術(shù)： 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是模擬體內(nèi)DNA復(fù)制條件在體外酶促合成特異DNA片段的循環(huán)反應(yīng)，可使目的DNA片段得以迅速擴增。其主要步驟是：將待擴增的模板DNA置于高溫(約93℃-95℃)下使之變性解鏈；人工合成的兩個寡核苷酸引物在低溫(約50℃-70℃)下分別與目的DNA片段兩側(cè)的互補序列復(fù)性結(jié)合；引物在DNA聚合酶作用（約70℃-75℃）下沿模板按5’→3’方向延伸，合成目的DNA片段的新互補鏈。如此經(jīng)過n個周期，理論上擴增2n倍,一般PCR經(jīng)30-40周期后可獲得百萬倍以上的目的DNA。 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)—限制性片段長度多態(tài)（PCR— RFLP）分析技術(shù)是在PCR技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。DNA堿基置換正好發(fā)生在某種限制性內(nèi)切酶識別位點上，使酶切位點增加或者消失，利用這一酶切性質(zhì)的改變，PCR特異擴增包含堿基置換的這段DNA，經(jīng)某一限制酶切割，再利用瓊脂糖凝膠電泳分離酶切產(chǎn)物，與正常比較來確定是否變異。應(yīng)用PCR— RFLP，可檢測某一致病基因已知的點突變，進(jìn)行直接基因診斷，也可以此為遺傳標(biāo)記進(jìn)行連鎖分析進(jìn)行間接基因診斷。
同類課題研究水平概述
- 內(nèi)收蛋白是由α、β、γ三種亞單位構(gòu)成的異源二聚體或異源四聚體，以二聚體為主要存在形式。內(nèi)收蛋白是蛋白激酶C和蛋白激酶A的底物。受Ca/鈣調(diào)蛋白、蛋白激酶C和蛋白激酶A的調(diào)節(jié)，參與細(xì)胞信號傳導(dǎo)。同時，內(nèi)收蛋白還與膜骨架的其他成分（如血影蛋白和肌動蛋白等）及多種膜蛋白（如離子通道、交換體和離子泵等）相互作用參與細(xì)胞膜離子轉(zhuǎn)運，尤其與多種細(xì)胞膜Na+轉(zhuǎn)運、Na+-H+交換、Na+-K+-Cl-協(xié)同轉(zhuǎn)運系統(tǒng)、Na+-Li+反轉(zhuǎn)運密切相關(guān)，內(nèi)收蛋白還能刺激Na+-K+-ATP酶的活性，增加腎小管鈉的重吸收。此外，內(nèi)收蛋白還能與肌動蛋白絲的鉤端（或快速牛長端）結(jié)合，從而阻止肌動蛋白絲的延長和解聚。在近曲小管中，與膜收縮蛋白和肌動蛋白結(jié)合的內(nèi)收蛋白還與Na+-K+-ATP酶在細(xì)胞表面的定位有關(guān)，而且肌動蛋白的多聚化可引起Na+-K+-ATP酶與Na+的親和力增加，酶活性升高。內(nèi)收蛋白在不同的物種間是高度保守的。
