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基本信息

項目名稱:
生物多糖的硫酸酯化及與DNA的作用研究
小類:
能源化工
簡介:
本論文通過微波提取法提取沙棘多糖,并用硫酸酯化合成低取代和高取代沙棘多糖和殼聚糖,隨后采用熒光探針法檢測多糖及其硫酸酯化多糖對DNA的生物活性。
詳細介紹:
本論文主要介紹微波提取法提取沙棘多糖,并對產(chǎn)物溶液進行過濾、透析、濃縮,乙醇沉淀,丙酮洗滌,真空干燥;其次是對沙棘多糖和殼聚糖進行硫酸酯化,合成低取代和高取代硫酸酯化多糖;最后采用熒光探針法對所合成的取代多糖與DNA的作用進行研究,測得取代多糖及其多糖與DNA的作用常數(shù),以探究其生理活性。

作品專業(yè)信息

撰寫目的和基本思路

探究低取代和高取代硫酸酯化沙棘葉多糖(SJ)和殼聚糖(CT)對DNA的保護作用,進而為多糖類靶向分子的篩選提供了一種新物質(zhì)。利用溴化乙錠(EB)作為熒光探針,測定這六種物質(zhì)存在下DNA與EB混合液的熒光強度,根據(jù)不同物質(zhì)與DNA相互作用的作用常數(shù)D值的大小,借助熒光探針法初步研究了這六種物質(zhì)對DNA的保護作用

科學性、先進性及獨特之處

生物多糖的化學修飾已成為多糖構(gòu)效關系研究的重要手段,也是發(fā)現(xiàn)和研制多糖類藥物的重要途徑。特別是硫酸酯化多糖,除已證明具有抗凝血作用外,近年來不斷發(fā)現(xiàn)它有多種生物活性,如增強免疫功能、抗腫瘤、抗病毒等,特別是抗艾滋病病毒活性引起許多研究者極大興趣,使硫酸酯化多糖的研究成為多糖研究領域內(nèi)的一個新熱點。

應用價值和現(xiàn)實意義

通過實驗,合成的低取代和高取代硫酸酯化殼聚糖和沙棘多糖對DNA具有生物活性,因而為研究多糖類靶向分子的篩選和抗艾滋病毒活性藥物的工作者提供了方向性的指導,具有重要的科學價值和現(xiàn)實意義。

學術(shù)論文摘要

應用微波輔助法在沙棘葉中提取沙棘葉多糖,并采用兩種不同的方法對沙棘葉多糖(SJ)和殼聚糖(CT)進行硫酸酯化合成低取代和高取代多糖,并借助紅外光譜儀進行鑒定。另外還應用熒光探針法初步研究了這六種物質(zhì)對DNA的保護作用。利用溴化乙錠(EB)作為熒光探針,測定這六種物質(zhì)存在下DNA與EB混合液的熒光強度,并把不同物質(zhì)與DNA相互作用定義為作用常數(shù)D,D值越大,藥物與DNA作用越強,反之越差。根據(jù)D值的大小討論了各物質(zhì)存在下與DNA的作用強度,從而為多糖類靶向分子的篩選提供了一項新的物質(zhì)。

獲獎情況

鑒定結(jié)果

未鑒定

參考文獻

[1] 張海容,修飾多糖的抗氧自由基活性及其與DNA結(jié)合機理的熒光研究 [2] 張海容,武曉燕 . 熒光探針法研究10種中藥多糖及黃酮對DNA的保護,光譜學與光譜分析,2007,27(2) [3]王斌. 磺化殼聚糖的研制,西華師范大學學報(自然科學版),2006,27(1):95-98 [4]劉春蘭,劉海青,鄧義紅,劉明亮. 沙棘葉水溶性多糖SJ_(21)的分離純化及組成分析,中央民族大學學報(自然科學版),2006,15(1):22-25 [5] 張麗萍,陳玉香,劉立東,陳少剛. 沙棘果硫酸化酯多糖HR SL的制備與分析,東北師大學報自然科學版,1999,3:70-72

同類課題研究水平概述

殼聚糖和沙棘多糖是自然界大量存在的天然生物多糖,因其分子結(jié)構(gòu)中含有活潑的羥基和氨基,通過各種化學修改和修飾可以形成具有不同結(jié)構(gòu)和功能的衍生物。殼聚糖和沙棘多糖硫酸酯衍生物由于具有與肝素類似的結(jié)構(gòu)和強聚陰離子性質(zhì)而引起了廣大學者的關注,除已證明具有抗凝血作用外,近年來不斷發(fā)現(xiàn)它有多種生物活性,如增強免疫功能、抗腫瘤、抗病毒等,特別是抗艾滋病毒活性引起許多研究者極大興趣,使硫酸酯化得研究成為多糖研究領域內(nèi)的一個新熱點,具有重要的科學價值和現(xiàn)實意義。 張海容等(熒光探針法研究10種中藥多糖及黃銅對DNA的保護,光譜學與光譜分析2007,27(2))利用超聲波來萃取多糖,并通過熒光探針法研究中藥多糖對DNA的保護作用。利用了超聲提取過程產(chǎn)生強烈的振動、空化、攪拌,與傳統(tǒng)提取方式比較具有收率高生產(chǎn)周期短無需加熱 ,有效成分不被破壞等優(yōu)點來提取多糖。但是超聲條件的選擇直接影響了超聲提取的效果。 熒光探針法已經(jīng)很廣泛的應用于實驗研究中,利用熒光探針法可以研究藥物與DNA的相互作用,從而探究藥物的生物活性。應用熒光法來研究痕量的生物大分子與各種小分子、離子的相互作用具有顯著的優(yōu)點。DNA可溶解在水中,水相中DNA與抗癌物質(zhì)的相互作用研究已有相當數(shù)量的報道。溴化乙錠,簡稱EB,它本身的熒光很弱,但能專一平行地嵌入到雙螺旋DNA的堿基對之間,與DNA形成DNA-EB復合物,熒光強度顯著增強;當EB從DNA雙螺旋解離或復合物濃度減少時,熒光強度顯著降低。因而EB被用于藥物分子與DNA作用方式研究的靈敏探針。在實驗中,測得了多糖以及硫酸酯化多糖與DNA的作用常數(shù)D,從而比較了不同種類的生物多糖的生物活性,以及同種多糖酯化前后的生物活性,從而為藥物研究者在研究生物多糖的生理活性方面(如抗癌活性藥物的研究)以及多糖類靶向分子的篩選提供了指導方向。
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