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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 新型微生物溶栓酶的開發(fā)
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 為了獲得良好的第三代新型微生物溶栓藥物，本實(shí)驗(yàn)篩選得到一株高產(chǎn)溶栓酶菌株，獲得該酶的詳細(xì)生理生化性質(zhì)。擴(kuò)增出豆豉溶栓酶基因并進(jìn)行了原核表達(dá)，利用生物信息學(xué)分析該酶的詳細(xì)信息，并通過體外分子進(jìn)化技術(shù)對酶的編碼基因進(jìn)行進(jìn)化改造...(查看更多)
- 詳細(xì)介紹：
- 在收集的豆豉產(chǎn)品中分離到369株革蘭氏陽性芽孢桿菌，對其進(jìn)行產(chǎn)溶栓酶活性篩選，得到一株高產(chǎn)溶栓酶菌株，對該菌株進(jìn)行形態(tài)、生理、生化鑒定，初步鑒定為枯草芽孢桿菌。通過分離純化得到了純度較高的溶栓酶。 獲得該酶的一些生理生化信息，確定該酶作用的最適溫度、酶作用...(查看更多)
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：獲得好的第三代溶血栓酶制劑。 基本思路：篩選一株高產(chǎn)溶栓酶菌株，弄清該酶的理化性質(zhì)，克隆表達(dá)該酶，生物信息學(xué)分析該酶，體外分子進(jìn)化技術(shù)改造該酶，體外實(shí)驗(yàn)該酶的溶血栓效果和毒副作用。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 1)該菌株產(chǎn)酶量是目前同類報道中很高的。 2)獲得了高純度的溶栓酶。 3)實(shí)現(xiàn)了該酶的高效表達(dá)。 4)利用生物信息學(xué)全面分析了該酶的一些特征。 5)應(yīng)用體外分子進(jìn)化技術(shù)，定向選擇到的突變酶與底物的親和力得到提高，催化能力也明顯提高。 6)較詳細(xì)地實(shí)驗(y...(查看更多)
應(yīng)用價值和現(xiàn)實(shí)意義
- 目前，我國近2億人患有心血管疾病，現(xiàn)用的溶栓劑存在毒副作用大、在體內(nèi)半衰期較短、來源緊缺等缺點(diǎn)，而微生物溶栓酶安全無毒、制備原料豐富，價格低廉，直接高效地溶解纖維蛋白，還可通過消化道直接吸收。 該溶栓酶有明顯的抗栓、溶栓作用，且對人的紅細(xì)胞不產(chǎn)生副作用。因此，豆豉溶栓酶作為良好溶栓劑，具有廣闊的開發(fā)前景。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 分離到一株高產(chǎn)溶栓酶菌株。分離純化得到了純度較高的溶栓酶，并對該溶栓酶的性質(zhì)進(jìn)行研究。 利用PCR方法從該菌株的總DNA中擴(kuò)增出豆豉溶栓酶成熟肽編碼區(qū)片段。將DFE的編碼基因克隆到表達(dá)載體pET32a(+)中并轉(zhuǎn)化到E. coli BL21 (DE3)中，從而構(gòu)建了重組質(zhì...(查看更多)
獲獎情況
- 本作品2007年于本校獲得“校大學(xué)生課外學(xué)術(shù)作品一等獎”。
鑒定結(jié)果
- 情況屬實(shí)。
參考文獻(xiàn)
- 1）梅樂和，等．納豆枯草桿菌的篩選和納豆激酶發(fā)酵條件優(yōu)化．浙江大學(xué)學(xué)報（工學(xué)版），2004，38(10)：1355~1360。 2）Zhang RH, et al. Gene expression and characteristics of a novel fibrinolytic enzyme (subtilisin DFE...(查看更多)
同類課題研究水平概述
- 目前，從豆豉中篩選出的產(chǎn)豆豉溶栓酶的菌株分別有枯草芽孢桿菌和解淀粉芽孢桿菌。閻家麒等從自制豆豉中篩選出一株在發(fā)酵產(chǎn)物中產(chǎn)生高纖溶活性蛋白酶的枯草芽孢桿菌。董明盛等人從豆豉中分離到產(chǎn)溶栓酶高活力菌株，菌種鑒定為枯草芽孢桿菌，并對其產(chǎn)酶的特性進(jìn)行了較為詳細(xì)的研究。199...(查看更多)
