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基本信息
- 項目名稱：
- 長壽花高繁殖組培體系及瓶外生根技術(shù)
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 本作品采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)對長壽花進行高繁殖組培體系的建立和創(chuàng)新地利用海綿作為載體進行試管苗的瓶外生根技術(shù)的研究。利用莖尖或帶腋芽莖段、葉片等為外植體進行長壽花組織培養(yǎng)與快速繁殖已有不少報道，其基本流程是進行愈傷組織的誘導(dǎo)、分化和芽的增殖，而后進行根的誘導(dǎo)或者通過體胚發(fā)生方式再生植株。通過愈傷組織途徑再生植株，變異頻率比較高，不利于品種特性的保持。因此，研究不經(jīng)過愈傷組織途徑的再生方式，即直接誘導(dǎo)芽的再生途徑，對于長壽花的快速繁殖有重要生產(chǎn)價值。 試管苗瓶外生根技術(shù)把生根與馴化有機地結(jié)合起來，有效縮短育苗周期，節(jié)約生產(chǎn)成本,提高了移栽成活率，是一項值得應(yīng)用與推廣的技術(shù)。目前，長壽花組培體系中生根常在試管內(nèi)進行(即瓶內(nèi)生根)，還未見長壽花試管苗瓶外生根的相關(guān)報道。本研究建立了長壽花直接誘導(dǎo)芽的高繁殖組培體系，并基于濾紙橋瓶外生根技術(shù)易受雜菌污染和濾紙一次性使用等缺點，進行長壽花組培苗瓶外生根技術(shù)的研究，以促進長壽花的工廠化生產(chǎn)，滿足市場需求。
- 詳細介紹：
- 本作品選用花卉市場所購買的無病蟲害優(yōu)質(zhì)長壽花長壽花的葉片和莖段作為外植體，在加有6-BA1.0mg/L和NAA 0.2mg/L培養(yǎng)基上培養(yǎng)誘導(dǎo)出芽叢，再將芽叢轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)不同外源激素配比獲得長壽花高繁殖組培體系的最佳培養(yǎng)基組合，將健壯的單株分開，并進行生根和移栽。其過程為： 1 材料 實驗材料為花卉市場所購買的無病蟲害優(yōu)質(zhì)長壽花 2 方法 2.1 培養(yǎng)基 芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基、繼代增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。以上培養(yǎng)基均附加蔗糖3％，瓊脂0.45 ％，pH值5.8-5.95，并在121 ℃下滅菌20 min。 2.2 外植體消毒與接種 選擇健康無病的幼嫩葉片和幼嫩莖段剪下，放入大燒杯中加少量洗滌劑，然后在流水下沖洗，再置于超凈工作臺上進行常規(guī)消毒。先用75 %的乙醇浸泡0.5 min，用滅菌水沖洗2次；取出放入無菌三角瓶，用2 %的次氯酸鈉消毒3 min，滅菌水洗2次，再用2 %的次氯酸鈉消毒3 min，用滅菌水沖洗5次，放在滅菌濾紙上吸去表面水分。把已滅菌的葉片剪成1.0 cm左右大小的小塊，莖段切成帶一葉一腋芽段，約1.0 cm左右長，接種到誘導(dǎo)芽的培養(yǎng)基上。放置于培養(yǎng)室溫度25±2 ℃，光照強度1800 Lx，光照時間12 h/d。每天統(tǒng)計污染數(shù)和誘導(dǎo)率，篩選出最佳芽叢誘導(dǎo)外植體。 2.3 繼代培養(yǎng) 將莖段上誘導(dǎo)出的芽叢切成大小相當(dāng)?shù)男K分別接種于含不同激素組合的繼代增殖培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；統(tǒng)計污染數(shù)，誘導(dǎo)叢芽增殖塊數(shù)和生長勢，篩選出最佳不同外源激素配比的高繁殖培養(yǎng)基。 2.4 生根培養(yǎng) 2.4.1 瓶內(nèi)生根法 將生長健壯的芽叢取出分離出單株，轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根；統(tǒng)計生根芽數(shù)、平均根數(shù)和生長勢。 2.4.2 瓶外生根法 將海綿切成11×6×4 cm大小，并在每塊海綿體上切出深2.5 cm小口，每條小口之間的間距為2 cm左右；并將其放置到營養(yǎng)液中浸泡2 d,即可將生長健壯的組培單株試管苗以一定的株距接種于海綿小口中，置于室溫下培養(yǎng)并注意保持海綿濕潤。 本研究得出的結(jié)論：在MS+6-BA 0.5mg/L +NAA 0.1mg/L+GA3 0.1mg/L的培養(yǎng)基組合中，誘導(dǎo)叢芽增殖率達到95.35 %，增殖倍數(shù)達到20倍以上，試管苗生長勢好，此培養(yǎng)基組合可作為長壽花高繁殖組培體系的最佳培養(yǎng)基。利用海綿作為載體進行瓶外生根，生根率達到95.00 %以上，移栽苗成活率達到100 %，說明利用海綿作為載體進行試管苗瓶外生根是完全可行的。整套體系大大縮短了出苗時間，降低了生產(chǎn)成本，為長壽花的規(guī)?；a(chǎn)提供了科學(xué)依據(jù)。
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)取代長壽花的傳統(tǒng)扦插繁殖技術(shù)，建立長壽花高繁殖的組培體系和以海綿作為載體進行瓶外生根技術(shù)，促進長壽花工廠化生產(chǎn)。 基本思路是：選用長壽花葉片和莖段作為外植體，在加有6-BA1.0mg/L和NAA 0.2mg/L培養(yǎng)基上培養(yǎng)誘導(dǎo)出芽叢，再將芽叢轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)不同外源激素配比獲得長壽花高繁殖組培體系的最佳培養(yǎng)基組合。將健壯的單株分開，并利用海綿進行瓶外生根。
科學(xué)性、先進性及獨特之處
- 作品利用組織培養(yǎng)技術(shù)建立了高繁殖倍數(shù)的繁殖體系，并創(chuàng)新性地用海綿作載體進行了瓶外生根技術(shù)研究，是一種創(chuàng)新，也是一次大膽的嘗試。實驗數(shù)據(jù)真實可靠，實驗結(jié)果為長壽花的工廠化生產(chǎn)奠定了堅實基礎(chǔ)。作品具有先進性。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 長壽花是深受消費者喜愛的名貴花卉之一，由于扦插繁殖速度慢，不能滿足市場需要。作品建立的高繁殖倍數(shù)的繁殖體系，和用海綿作載體進行了瓶外生根技術(shù)為長壽花的工廠化生產(chǎn)奠定了堅實基礎(chǔ)，實驗室利用作品結(jié)果正在進行相關(guān)開發(fā)研究，以滿足市場的需求。
學(xué)術(shù)論文摘要
- [目的] 建立長壽花高繁殖的組培體系和瓶外生根技術(shù)，促進長壽花工廠化生產(chǎn)。[方法]選用長壽花葉片和莖段作為外植體，在加有6-BA 1.0mg/L和NAA 0.2mg/L培養(yǎng)基上培養(yǎng)誘導(dǎo)出芽叢，再將芽叢轉(zhuǎn)接到繼代增殖培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)不同外源激素配比獲得長壽花高繁殖組培體系的最佳培養(yǎng)基組合。將健壯的單株分開，并利用海綿進行瓶外生根。[結(jié)果] 在Ms+6-BA 0.5mg/L +NAA 0.1mg/L+GA3 0.1 mg/L的培養(yǎng)基組合中，誘導(dǎo)叢芽增殖率達到95.35 %，增殖倍數(shù)達到20倍以上，試管苗生長勢最佳。利用海綿作為載體進行瓶外生根，生根率達到95.00 %，移栽苗成活率達到100%。[結(jié)論] 長壽花高繁殖的組培體系增殖培養(yǎng)基為Ms+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.1mg/L+GA3 0.1mg/L，利用海綿作為載體進行瓶外生根是完全可行的。
獲獎情況
- 本作品獲第十一屆“挑戰(zhàn)杯”全國大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽貴州省終審決賽:自然科學(xué)類一等獎
鑒定結(jié)果
參考文獻
- [1]陳玉梁，支曉剛，張艷萍等．長壽花葉盤離體培養(yǎng)及植株高效再生研究[J]．中國農(nóng)學(xué)通報，2004，20(5)：33-34 [2]黃雙龍，賴鐘雄，林秀蓮等．紅花長壽花愈傷組織的誘導(dǎo)和植株再生研究[J]．農(nóng)業(yè)生物技術(shù)科學(xué)，2006，22(2)：48-52； [3]孫仲序，劉靜，王玉軍等．果樹組培苗瓶外濾紙橋生根技術(shù)研究[J]．園藝學(xué)報，2001，28(4)：345-347 [4]徐振華，王學(xué)勇，李敬川等．試管苗瓶外生根的研究進展[J]．中國農(nóng)學(xué)通報，2002，18(4)：85-88 [6]黃卓忠，嚴華兵．試管苗瓶外生根技術(shù)[J]．廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，38(2)：124-126
同類課題研究水平概述
- 植物組織培養(yǎng)技術(shù)應(yīng)用于花卉的快速繁殖已經(jīng)創(chuàng)造了巨大的經(jīng)濟價值和社會價值。 長壽花(Kalanchoe blossfeldiana)是景天科伽藍菜屬的觀葉和觀花植物，又名矮生伽藍菜、壽星花、假川蓮。長壽花長勢強健，耐干旱，是優(yōu)良的冬春季室內(nèi)觀賞盆花，深受人們的喜愛，市場需求量大。 利用莖尖或帶腋芽莖段、葉片等為外植體進行長壽花組織培養(yǎng)與快速繁殖已有不少報道，其基本流程是進行愈傷組織的誘導(dǎo)、分化和芽的增殖，而后進行根的誘導(dǎo)或者通過體胚發(fā)生方式再生植株。通過愈傷組織途徑再生植株，變異頻率比較高，不利于品種特性的保持。因此，研究不經(jīng)過愈傷組織途徑的再生方式，即直接誘導(dǎo)芽的再生途徑，對于長壽花的快速繁殖有重要生產(chǎn)價值。 試管苗瓶外生根技術(shù)把生根與馴化有機地結(jié)合起來，有效縮短育苗周期，節(jié)約生產(chǎn)成本，提高了移栽成活率，是一項值得應(yīng)用與推廣的技術(shù)。當(dāng)前，按照使用基質(zhì)的不同,試管苗瓶外生根可分為基質(zhì)培、水培、氣霧培等幾種。基質(zhì)培是目前最理想的培育方式—通過提供過渡煉苗，生長素處理，適宜的介質(zhì)與環(huán)境條件以及防止雜菌滋生等措施，可顯著提高試管苗瓶外生根效率。瓶外生根技術(shù)已在果樹、林木、魔芋、花卉等的快繁體系中得到應(yīng)用。 目前，長壽花組培體系中生根常在試管內(nèi)進行(即瓶內(nèi)生根)，還未見長壽花試管苗瓶外生根的相關(guān)報道。創(chuàng)新性地用海綿作載體進行了瓶外生根技術(shù)研究，是一種創(chuàng)新，也是一次大膽的嘗試，用海綿作載體進行試管苗瓶外生根研究還未見報道。本研究擬建立長壽花直接誘導(dǎo)芽的高繁殖組培體系，并進行長壽花組培苗瓶外生根技術(shù)的研究，以促進長壽花的工廠化生產(chǎn)，滿足市場需求。
