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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 青天葵對(duì)內(nèi)毒素致急性肺損傷大鼠肺水通道蛋白1和5表達(dá)影響
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 急性肺損傷的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，但目前尚未完全闡明。內(nèi)毒素性急性肺損傷的病理特征為通透性肺水腫，此前較多認(rèn)為急性肺損傷所致的肺水腫是肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞屏障的通透性增高所致，而對(duì)肺水通道蛋白（AQPs）的作用認(rèn)識(shí)不足，AQPs對(duì)肺水腫的形成和消除具有重要意義。 青天葵清熱解毒，散淤消腫，對(duì)ALI具有保護(hù)作用，在此基礎(chǔ)上，我們首次探討單味中藥青天葵對(duì)急性肺損傷AQPs-1和5表達(dá)的影響并闡述其作用機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，青天葵預(yù)先給藥能減輕內(nèi)毒素致大鼠急性肺損傷，其保護(hù)機(jī)理與青天葵通過促進(jìn)肺AQP-1和AQP-5的蛋白表達(dá)水平上調(diào)，增加肺泡水清除率和轉(zhuǎn)運(yùn)肺內(nèi)液體，調(diào)節(jié)水平衡有關(guān)。
- 詳細(xì)介紹：
- ALI的發(fā)病機(jī)制與炎癥介質(zhì)、蛋白表達(dá)和酶的活性有關(guān)，但目前尚未完全闡明。通透性肺水腫是內(nèi)毒素性ALI的主要病理特征，此前較多認(rèn)為發(fā)生通透性肺水腫主要是肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和肺泡上皮細(xì)胞屏障的通透性增高所致，定位于對(duì)炎癥介質(zhì)及細(xì)胞因子的研究，而對(duì)肺水通道蛋白的作用認(rèn)識(shí)不足。AQPs具有增加細(xì)胞膜水通透力，快速轉(zhuǎn)運(yùn)液體的功能，AQP1主要參與肺間質(zhì)內(nèi)液體的轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)揮作用，AQP-5作用主要是清除肺泡腔內(nèi)水份。在AQPs清除和轉(zhuǎn)運(yùn)肺水的過程中，AQP-1和AQP-5起主要作用，對(duì)肺水腫的形成和消除具有重要意義。 ALI是臨床較常見的危重病，西醫(yī)主要依賴于支持性治療，缺乏常規(guī)、療效明確藥物治療，中醫(yī)藥治療ALI有一定優(yōu)勢(shì)。青天葵清熱解毒，散淤消腫，藥用價(jià)值高，在研究發(fā)現(xiàn)青天葵對(duì)ALI具有保護(hù)作用，可阻抑炎癥反應(yīng)，減少肺水含量的基礎(chǔ)上，本研究擬通過觀察肺組織病理及肺濕/干重比值綜合評(píng)價(jià)ALI模型，在保證成功造模的前提下，采用免疫組化及PCR的方法首次探討單味中藥青天葵預(yù)先給藥對(duì)急性肺損傷肺水通道蛋白1和5表達(dá)的影響，以明確青天葵對(duì)ALI的治療作用及闡述其作用機(jī)理。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，青天葵預(yù)先給藥能有效改善肺水腫狀態(tài)，減輕內(nèi)毒素致急性肺損傷，其保護(hù)機(jī)理與青天葵通過促進(jìn)肺AQP-1和AQP-5的蛋白表達(dá)水平上調(diào)，增加肺泡水清除率和轉(zhuǎn)運(yùn)肺內(nèi)液體，調(diào)節(jié)水平衡有關(guān)。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：通過內(nèi)毒素誘導(dǎo)的ALI模型，觀察青天葵預(yù)先給藥對(duì)AQPs-1和5表達(dá)的影響，從調(diào)節(jié)水蛋白通道方面闡明其作用機(jī)制。 基本思路：通透性肺水腫作為ALI的病理特征，其肺水腫的程度與ALI的預(yù)后呈正相關(guān)，AQPs對(duì)肺水腫的形成和消除意義重大。青天葵對(duì)ALI有保護(hù)作用，本研究擬通過建立穩(wěn)定的ALI模型，采用免疫組化及PCR的方法探討青天葵對(duì)ALI肺水通道蛋白1和5的調(diào)節(jié)效應(yīng)及其作用機(jī)制。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 1.內(nèi)毒素致ALI的模型穩(wěn)定，綜合評(píng)價(jià)肺病理及肺水含量能保證造模成功。 2.ALI病理機(jī)制復(fù)雜，此前研究對(duì)AQPs的作用認(rèn)識(shí)不足。本課題打破常規(guī)，從調(diào)節(jié)AQPs的角度進(jìn)行研究。 3.西醫(yī)缺乏治療ALI的有效藥物，中醫(yī)藥治療有優(yōu)勢(shì)。 4.單味青天葵研究ALI，可避免中藥復(fù)方制劑作用靶點(diǎn)分散，機(jī)制不透徹等問題。 5．青天葵的藥用價(jià)值高，文獻(xiàn)報(bào)道少。本研究首次探討青天葵對(duì)AQPs的調(diào)節(jié)效應(yīng)。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 中醫(yī)藥治療ALI療效明確，對(duì)其機(jī)制的研究，可為治療ALI的臨床應(yīng)用提供更全面的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)；其次，篩選療效較明確的單藥，是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)，尋找新的、安全有效的治療ALI的藥物具有重要的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)意義。 青天葵臨床應(yīng)用廣泛，目前相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道少，尤其是青天葵對(duì)ALI的治療作用及機(jī)制方面。本研究在早期發(fā)現(xiàn)其治療ALI療效確切的基礎(chǔ)上，探討其作用機(jī)制，有助于指導(dǎo)臨床用藥，充分發(fā)揮青天葵藥用價(jià)值。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的:通過觀察青天葵預(yù)先給藥對(duì)內(nèi)毒素致急性肺損傷(ALI)大鼠肺水通道蛋白-1和5(AQP-1、AQP-5)表達(dá)的影響，探討其保護(hù)作用機(jī)制。方法：SD大鼠24只隨機(jī)分為正常組（A組）、青天葵預(yù)保護(hù)組（B組）、內(nèi)毒素模型組（C組），每組各8只。采用舌底靜脈注射內(nèi)毒素（5mg/kg），復(fù)制急性肺損傷模型，青天葵組預(yù)先給藥處理，造模8h后HE染色觀察肺組織病理學(xué)的改變，檢測(cè)肺濕／干重比(W／D)觀察肺臟水通透性的變化，免疫組化法及RT-PCR法分析肺組織AQP-1、AQP-5表達(dá)的變化。結(jié)果：與內(nèi)毒素模型組相比，青天葵預(yù)保護(hù)組及正常組肺濕／干重比值明顯降低(P<0.05)，青天葵預(yù)保護(hù)組的肺水腫病理改變明顯減輕，青天葵預(yù)保護(hù)組AQP-1、AQP-5的蛋白表達(dá)水平升高(P<0.05)。結(jié)論：青天葵預(yù)先給藥可能通過促進(jìn)ALI大鼠肺AQP-1和AQP-5的表達(dá)上調(diào)，增加清除和轉(zhuǎn)運(yùn)肺水，改善水液代謝，減輕肺水腫狀態(tài)，從而有效保護(hù)急性肺損傷。
獲獎(jiǎng)情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- ALI是臨床危重病癥，內(nèi)毒素是常見致病因素，肺毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和細(xì)胞屏障破壞導(dǎo)致通透性肺水腫是其主要的病理特征。 水通道蛋白是與水通透性有關(guān)的細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，它的發(fā)現(xiàn)揭示了水跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)的機(jī)制，擴(kuò)展了人們對(duì)水平衡調(diào)節(jié)的認(rèn)識(shí)。 目前在肺臟表達(dá)定位比較明確的是AQP-1、3、4、5。肺水轉(zhuǎn)運(yùn)，AQP-1和5起主要作用。例如李波等利用內(nèi)毒素誘導(dǎo)小鼠ALI，采用PCR、免疫組化和Western印跡法觀察，認(rèn)為AQP-1和5在調(diào)節(jié)肺內(nèi)液體平衡中起到明顯作用，而AQP-3和4不參與肺水腫的形成。AQPs在ALI中作用的研究目前主要集中在AQP-1和5。 肺水腫以肺泡和肺間質(zhì)內(nèi)液體積聚為特點(diǎn)，發(fā)生時(shí)必然伴有水液的清除跟轉(zhuǎn)運(yùn)紊亂，水通道蛋白調(diào)節(jié)功能的改變。例如Towne J E發(fā)現(xiàn)ALI時(shí)，AQP-1和5的表達(dá)下降減少了肺水腫時(shí)機(jī)體清除過多水腫液的能力，從而加重肺泡和間質(zhì)水腫。 AQPs可選擇性地通透水分子，介導(dǎo)水分子跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)，調(diào)節(jié)肺水平衡。發(fā)生ALI時(shí)，AQPs表達(dá)或功能的下降，導(dǎo)致水液代謝平衡失調(diào)，產(chǎn)生肺水腫。 ALI的病死率高。目前，西醫(yī)主要是依賴于支持性治療；由于ALI急性起病，病情進(jìn)展迅速的特點(diǎn)，藥物研究集中于對(duì)ALI的預(yù)防及早期治療，糖皮質(zhì)激素、白三烯制劑等也有一定的治療作用，但均存在局限性，療效不滿意的現(xiàn)象。目前西醫(yī)尚缺乏治療ALI常規(guī)的、療效明確藥物。 中醫(yī)認(rèn)為ALI的病機(jī)關(guān)鍵在于邪毒內(nèi)侵，傷及內(nèi)臟，氣血運(yùn)行受阻，氣機(jī)逆亂，脈絡(luò)瘀滯，治宜清熱解毒、活血化瘀、通里攻下為主。研究表明，大黃通過抑制細(xì)胞因子的產(chǎn)生和釋放，減輕ALI的炎癥反應(yīng)；大承氣湯、血必凈等中藥復(fù)方在ALI的防治研究中也取得了一定的成果。 但由于ALI病理機(jī)制的復(fù)雜性，此前多認(rèn)為ALI發(fā)生通透性肺水腫主要是由于血管內(nèi)皮細(xì)胞受損所致，上述的西藥及中醫(yī)藥研究集中在觀察藥物對(duì)炎癥反應(yīng)的阻抑效應(yīng)，而對(duì)肺水通道蛋白在ALI過程中所發(fā)揮的調(diào)節(jié)水平衡的作用不夠重視，從肺水通道蛋白的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行相關(guān)藥理實(shí)驗(yàn)的研究報(bào)道較少。 青天葵清熱解毒，散淤消腫，在立足于早期發(fā)現(xiàn)青天葵對(duì)ALI有保護(hù)作用的前提下，采用免疫組化及PCR的方法觀察單藥青天葵對(duì)ALI肺水通道蛋白1和5表達(dá)的調(diào)節(jié)效應(yīng)，闡述其治療作用及其機(jī)理，有助于為臨床治療ALI提供新途徑，充分發(fā)揮青天葵的藥用價(jià)值。
