基本信息
- 項目名稱：
- 長爪沙鼠Willis環(huán)變異篩選的實驗研究
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術(shù)論文
- 簡介：
- 近40年來，國內(nèi)外均有論著報道長爪沙鼠無后交通動脈，雙側(cè)頸總動脈阻斷肯定造成大腦完全性缺血。為了觀察長爪沙鼠腦底動脈Willis環(huán)的缺失程度，我們用橡膠血管鑄型劑對80只長爪沙鼠進行了血管鑄型，發(fā)現(xiàn)18.75％的長爪沙鼠的Willis環(huán)發(fā)生變異，不同程度的具有后交通動脈，結(jié)果有異于以上肯定?！? 為了對長爪沙鼠腦底動脈Willis環(huán)變異進行篩選，以保證用沙鼠作為大腦缺血模型是實驗結(jié)果的準確性。選用長爪沙鼠８０只，采用Kirino法建立腦缺血模型，激光多普勒監(jiān)測腦血流，找出缺血時血流量異常的，應用單寧酸-氯化鐵媒染法構(gòu)筑其椎基底動脈供血區(qū)的微血管。結(jié)果顯示，雙側(cè)頸總動脈被夾閉后，多數(shù)長爪沙鼠腦組織血流量迅速下降，大腦完全缺血；單寧酸-氯化鐵媒染法構(gòu)筑時，僅小腦血管顯色。13只沙鼠腦缺血30min時，腦血流量仍達基礎(chǔ)血流值的1－10％；小腦全部和大腦的部分區(qū)域的血管顯色，腦皮質(zhì)和海馬均由微血管顯色，證實存在后交通動脈。激光多普勒證實單寧酸-氯化鐵媒染法能夠篩選出Willis環(huán)變異的沙鼠。因此，在整體動物實驗結(jié)束后，通過單寧酸-氯化鐵媒染法對所有沙鼠進行篩選，剔除Willis環(huán)變異的沙鼠，不足的部分進行補遺，再進行后續(xù)試驗，這樣可以保證研究結(jié)果更科學、真實、可靠
- 詳細介紹：
- 自1966年Levine發(fā)現(xiàn)長爪沙鼠缺乏完整的Willis環(huán)以來，國內(nèi)外均有報道長爪沙土鼠獨特的解剖學特征：頸內(nèi)動脈系統(tǒng)和椎基底動脈系統(tǒng)之間無后交通動脈，不構(gòu)成完整的Willis環(huán)，雙側(cè)頸總動脈阻斷后，肯定造成大腦完全性缺血，國內(nèi)外廣泛應用此模型研究腦缺血損傷機制或藥物評價。但近年來有實驗結(jié)果不甚理想，推測部分沙鼠Willis環(huán)有變異的可能。為了解長爪沙鼠后交通動脈缺失情況，我們用橡膠血管鑄型劑觀察了其大腦血管構(gòu)筑，發(fā)現(xiàn)18.75%存在后交通動脈。因此，為保證用沙鼠作為大腦完全性缺血模型時實驗結(jié)果的的準確性和可靠性，必須重視沙鼠Willis環(huán)解剖結(jié)構(gòu)上的變異。 為進一步驗證Willis環(huán)的變異，我們還應用單寧酸-氯化鐵媒染法對Willis環(huán)結(jié)構(gòu)變異進行了篩選。結(jié)果發(fā)現(xiàn)80只沙鼠雙側(cè)頸總動脈被夾閉后，有67只腦組織血流量迅速下降，血量接近于0，提示大腦缺血造模成功。有13只沙鼠夾閉頸總動脈30min時，大腦組織血流量仍然大于基礎(chǔ)血流值的1％。對椎基底動脈供血區(qū)進行血管構(gòu)筑后，造模成功的僅有小腦的血管顯色，失敗者小腦全部、大腦部分區(qū)域的血管顯色。振蕩切片后，大腦皮質(zhì)和海馬均有微血管顯示，證實有后交通動脈存在。本研究提示，應用沙鼠做大腦完全性缺血模型時，應用單寧酸-氯化鐵法觀察大腦微血管構(gòu)筑，以剔除Willis環(huán)存在變異的沙鼠，可使研究結(jié)果更科學、可靠。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：通過觀察長爪沙鼠腦底動脈Willis環(huán)解剖結(jié)構(gòu)，對其變異進行篩選，以保證其作為大腦缺血模型時實驗結(jié)果的準確性。 基本思路：建立長爪沙鼠大腦缺血模型，應用激光多普勒技術(shù)觀察夾閉雙側(cè)頸總動脈后，腦組織是否存在血流，再用單寧酸-氯化鐵媒染血管法對比。將Willis環(huán)變異的沙鼠篩選出來，以保證應用其作為大腦缺血模型時實驗的可靠性。
科學性、先進性及獨特之處
- 科學性：為長爪沙鼠大腦缺血模型可靠性提供依據(jù)。 先進性：通過微血管構(gòu)筑從解剖學上分析長爪沙鼠的Willis環(huán)類型、變異方式；以激光多普勒與單寧酸-氯化鐵媒染法對比，指出有后交通動脈的沙鼠夾閉雙側(cè)頸總動脈后腦組織仍有血流，僅無后交通動脈的沙鼠才能成功建立大腦缺血模型。 效益性：為篩選出腦底動脈Willis環(huán)變異的沙鼠提供方法，為育出適于建立大腦缺血模型的沙鼠提供科學依據(jù)。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 1．Willis環(huán)變異會導致大腦缺血模型不全缺血，造成實驗結(jié)果誤差，得出錯誤結(jié)論。篩除Willis環(huán)變異的長爪沙鼠，可保證其作為腦缺血模型時實驗結(jié)果的可靠性。 2．用單寧酸-氯化鐵媒染法既能顯示W(wǎng)illis環(huán)變異，又不影響后續(xù)各種實驗（如免疫組織化學、細胞生物學等）檢測。 3. 可節(jié)省人力、物力。
學術(shù)論文摘要
- 目的：通過觀察長爪沙鼠腦底動脈Willis環(huán)解剖結(jié)構(gòu)，篩選并剔除Willis環(huán)變異的沙鼠，以保證其作為大腦缺血模型時實驗結(jié)果的可靠性。 方法：夾閉長爪沙鼠雙側(cè)頸總動脈，建立大腦缺血模型，用激光多普勒監(jiān)測大腦組織血流，找出仍有血流量存在的沙鼠，應用單寧酸-氯化鐵媒染法觀察大腦Willis環(huán)是否有變異，經(jīng)切片證實存在交通支及其分支的供血區(qū)仍有血流通暢的微血管。 結(jié)果：夾閉雙側(cè)頸總動脈后，多數(shù)長爪沙鼠腦組織血流量迅速下降，大腦完全性缺血。單寧酸-氯化鐵媒染時， Willis環(huán)未見后交通支或其它分支，大腦血管幾乎不顯色；有13只沙鼠在缺血30min時，缺血區(qū)血流量仍達1-10％，Willis環(huán)可見不同類型的變異，部分區(qū)域大腦皮質(zhì)血管顯色，有的海馬區(qū)血管也有顯色。證實存在后交通動脈或其它分支。 結(jié)論：單寧酸-氯化鐵媒染顯示大腦微血管構(gòu)筑，能夠有效篩選出存在Willis環(huán)變異的長爪沙鼠。從而保證其作為大腦缺血模型時實驗結(jié)果的準確性。
獲獎情況
- 1.挑戰(zhàn)杯2009xx省大學生課外學術(shù)科技作品競賽 特等獎（證書未發(fā)）。 2.xxx，xxx，xxx長爪沙鼠Willis環(huán)解剖學觀察.承德醫(yī)學院學報,2008, 25(4):445-446. 3.xxx,xxx,xxx,xxx,xx,xxx.長爪沙鼠Willis環(huán)變異篩選及應用. 投往2009年8月在山東煙臺召開的中國解剖學會學術(shù)會；解剖科學進展,已錄用,待發(fā)表。
鑒定結(jié)果
- 本作品應用激光多普勒技術(shù)和單寧酸-氯化鐵媒染法，篩選出Willis環(huán)變異的長爪沙鼠。為其作為大腦缺血模型時實驗結(jié)果的準確性提供科學依據(jù)，節(jié)省人力、物力資源。
參考文獻
- 1. Levine S, Payan H. Effeets of isehemia and other Proeedures on the brain and retina of the gerbil[J]. Exp Neurol,1996,16(3):255-262. 2. 徐超,柴松海,劉淑英,等.蒙古沙土鼠腦缺血模型.中華神經(jīng)外科雜志,1985,2(1):69~70. 3. Castro PA, Foyo-Niembro E.Carotid-basilor Artery Communication in gerbils(Meriones unguiculatus)[J]. Rev Neurol,2001,32(3):225-228. 4. HimedaT.Alterations of interneurons of the gerbil hippocampus after transient cerebral isehemia:effect of pitavastatin[J].Neuro Psyeho Pharmaeology,2005,30(11):2014-2025. 5. 杜小燕，楊 慧，孟 霞，等. 長爪沙鼠腦底前后交通動脈變異類型分析[J]. 中國實驗動物學報，2006,14(2):263-266. 6. Seal JB. New variability in cerebrovascular anatomy determines severity of hippocampal injury following forebrain isehemia in the Mongolian gerbil[J].Brain Res,2006,16(1073): 451-459. 7. xxx,xxx,xxx.長爪沙鼠WIllis環(huán)解剖學觀察[J].承德醫(yī)學院學報,2008,4(1):45- 46. 8. 趙淑敏,孔祥玉.一種媒染血管的新方法——單寧酸-氯化鐵法.解剖學雜志，2001，23（1）:91-92 9. 俞國平,方敏,陳惠珍,等.關(guān)于蒙古沙鼠完全性腦缺血模型的實驗研究[J].中國血液流變學雜志,1998,8(2):20-21.
同類課題研究水平概述
- 近40年來，國內(nèi)外均有論著報道長爪沙鼠具有獨特的解剖學特征，沒有聯(lián)系頸內(nèi)動脈系統(tǒng)和椎基底動脈系統(tǒng)的后交通動脈，不能構(gòu)成完整的腦底動脈Willis環(huán)。故雙側(cè)頸總動脈阻斷肯定造成大腦完全性缺血。 腦缺血動物模型是研究腦血管病損傷機理和防治不可缺少的工具，制作接近人類缺血性腦卒中的理想動物模型一直是人們普遍關(guān)注的問題。由于長爪沙鼠具有獨特的腦血管遺傳特征，沒有后交通動脈，前交通支約有1/3缺乏或纖細，不易把血液從基底動脈運送到大腦，當阻斷雙側(cè)頸總動脈時，可造成雙側(cè)大腦半球的完全性缺血。因此，用簡單的結(jié)扎雙側(cè)頸總動脈即可獲得比大鼠、小鼠更加典型的接近人類急性腦缺血動物模型，被國內(nèi)外廣泛應用。但近年來發(fā)現(xiàn)部分沙鼠存在后交通支完整和部分完整型的變異現(xiàn)象。為了保證研究的科學性、可靠性，國內(nèi)、外有的學者對此進行了研究，試圖找出前后交通支缺失和腦缺血之間的關(guān)聯(lián)，但至今尚無有效的方法剔除存在變異的長爪沙鼠。
