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基本信息
- 項(xiàng)目名稱(chēng)：
- 對(duì)位紅抗原的合成與多克隆抗體的制備及其在食品殘留中的檢測(cè)
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類(lèi)：
- 生命科學(xué)
- 大類(lèi)：
- 自然科學(xué)類(lèi)學(xué)術(shù)論文
- 簡(jiǎn)介：
- 現(xiàn)今社會(huì)食品安全是大家十分關(guān)注的，一些不法商販為了獲得利益濫用對(duì)位紅染色劑非法添加到食物之中。而這些對(duì)位紅物質(zhì)對(duì)人身體又十分巨大的危害，并且具有致癌作用。所以食品中對(duì)位紅的檢測(cè)是十分必要和緊迫的。
- 詳細(xì)介紹：
- 通過(guò)抗原合成、動(dòng)物免疫、獲得具有高特異性的多克隆抗體，通過(guò)對(duì)抗體的特異性分析，為研制出對(duì)位紅試劑盒打好基礎(chǔ)。對(duì)于食品中對(duì)位紅的有效檢測(cè)和監(jiān)督管理，提升食品質(zhì)量安全，保障國(guó)民身體健康，維護(hù)社會(huì)穩(wěn)定。為我國(guó)食品安全，提供簡(jiǎn)易，有效，低耗，低成本的檢測(cè)方法。
作品專(zhuān)業(yè)信息
撰寫(xiě)目的和基本思路
- 對(duì)位紅屬于人工合成的偶氮類(lèi)染料，其具有較強(qiáng)毒性的致癌物，因此應(yīng)盡可能避免攝入這種物質(zhì)。雖然國(guó)家已明令禁止在食品中添加對(duì)位紅。但某些不法分子仍然使用這種致癌染色物添加到食品中謀取利益。因此，為了保證食品安全，建立快速方便的檢測(cè)對(duì)位紅免疫方法極為重要。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 本研究采用混合酸酐法將對(duì)位紅與牛血清白蛋白偶聯(lián)制備免疫原，用合成的免疫原免疫新西蘭大白兔，制備出針對(duì)對(duì)位紅的多克隆抗體，并對(duì)其特性進(jìn)行分析，進(jìn)一步建立免疫分析法檢測(cè)食品中對(duì)位紅殘留。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 由于對(duì)位紅具有致癌性，我國(guó)禁止將對(duì)位紅作為食品添加劑用于食品生產(chǎn)。但某些不法分子將其添加到食品中，提高食品感官度。因此，建立快速方便的檢測(cè)對(duì)位紅免疫方法極為重要。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 對(duì)位紅屬于人工合成的偶氮類(lèi)染料，結(jié)構(gòu)與蘇丹類(lèi)色素類(lèi)似，具有致癌致突變等作用，但因其具有顏色鮮亮，不易褪色等特點(diǎn)，不法分子將其添加到食品中，提高食品感官度，危害消費(fèi)者健康。因此，建立快速的檢測(cè)對(duì)位紅免疫方法極為重要。本研究采用混合酸酐法將對(duì)位紅半抗原與陽(yáng)離子化牛血清蛋白(cBSA)偶聯(lián)合成完全抗原，通過(guò)紫外分析偶聯(lián)物，完全抗原免疫動(dòng)物，制備出抗對(duì)位紅多克隆抗體，通過(guò)間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法對(duì)抗體特性分析，并建立對(duì)位紅酶聯(lián)免疫分析條件。結(jié)果完全抗原對(duì)位紅與蛋白偶聯(lián)比分別為14:1，對(duì)位紅多克隆抗體效價(jià)達(dá)到1×106，對(duì)位紅抗體與蘇丹紅I 的交叉反應(yīng)率為97.8%，與其它蘇丹紅類(lèi)染料的交叉反應(yīng)率都低，應(yīng)用抗體檢測(cè)對(duì)位紅在0.1ng/mL~1000ng/mL線(xiàn)性范圍最低檢測(cè)限為7.43 ng/mL。建立的間接競(jìng)爭(zhēng)ELISA法檢測(cè)對(duì)位紅條件包被時(shí)間為2h，封閉時(shí)間1h，一抗競(jìng)爭(zhēng)時(shí)間是45min，二抗反應(yīng)時(shí)間為45min，底物作用時(shí)間為15min；四種樣品中對(duì)位紅平均回收率為102.65%。結(jié)果表明制備的抗對(duì)位紅多抗特異性強(qiáng)，免疫分析準(zhǔn)確度和精密度均比較高，可用于檢測(cè)食品中的對(duì)位紅殘留。
獲獎(jiǎng)情況
- 論文《對(duì)位紅抗原合成和多克隆抗體制備》已經(jīng)投在《中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)》
鑒定結(jié)果
- 無(wú)
參考文獻(xiàn)
- 葛寶坤,陳其勇,趙孔祥,高健會(huì),王云鳳,劉旸,高效液相色譜法測(cè)定蛋黃中蘇丹I～I(xiàn)V及對(duì)位紅,中國(guó)國(guó)境衛(wèi)生檢疫雜志,2007,30(3) 劉國(guó)艷，柴春彥，葛宇，孫耀輝,食品中對(duì)位紅等禁用偶氮染料檢測(cè)方法研究進(jìn)展,食品科學(xué),2007,28(11)
同類(lèi)課題研究水平概述
- 國(guó)外實(shí)驗(yàn)室偶氮染料的檢測(cè)，則常采用液相、氣相色譜法或與質(zhì)譜聯(lián)用進(jìn)行定性、定量；這些方法具有檢測(cè)精度高、靈敏、準(zhǔn)確、穩(wěn)定等一系列優(yōu)點(diǎn)，但設(shè)備及檢測(cè)費(fèi)用昂貴、操作復(fù)雜、分析時(shí)間長(zhǎng)，不能實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，限制了其推廣和應(yīng)用，也給對(duì)位紅和甲苯胺紅的快速檢測(cè)和監(jiān)管帶來(lái)困難。國(guó)內(nèi)仍未有針對(duì)對(duì)位紅的檢測(cè)方法標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)偶氮染料日常檢測(cè)主要參考蘇丹紅的方法標(biāo)準(zhǔn)（GB/T19681—2005），采用溶劑萃取，液相色譜測(cè)定。目前國(guó)內(nèi)檢測(cè)機(jī)構(gòu)用來(lái)檢測(cè)對(duì)位紅的方法主要是儀器法，如高效液相色譜法（HPLC），液相色譜法（LC），液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS/MS），氣相色譜法等儀器方法，另外免疫測(cè)定法，電化學(xué)法，毛細(xì)管電泳法，層析技術(shù)等方法也逐漸應(yīng)用于對(duì)位紅和蘇丹紅類(lèi)色素的檢測(cè)中。
