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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 破血逐瘀中藥對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞增殖及生長(zhǎng)影響研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 本文選取水蛭和土鱉蟲為研究對(duì)象，體外干預(yù)HepG2細(xì)胞，MTT比色法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖，Tunel法及Caspase 3蛋白活性檢測(cè)細(xì)胞凋亡。發(fā)現(xiàn)水蛭、土鱉蟲提取物高濃度時(shí)有抗腫瘤作用，低濃度時(shí)反而能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖。提示水蛭和土鱉蟲體外抗腫瘤效應(yīng)無量效關(guān)系，在臨床中需慎用。
- 詳細(xì)介紹：
- 觀察破血逐瘀中藥對(duì)體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞增殖及生長(zhǎng)的影響。本文選取破血逐瘀中藥中的水蛭和土鱉蟲為研究對(duì)象，體外干預(yù)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞，采用MTT比色法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞活性及生長(zhǎng)增殖情況，Tunel法及Caspase 3蛋白活性檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，水蛭、土鱉蟲蛋白提取物在高濃度時(shí)（水蛭＞200μg/ml、土鱉蟲﹥1000μg/ml）對(duì)體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞增殖與生長(zhǎng)有抑制作用，能使Caspase 3蛋白活性增高；低濃度時(shí)反而能促進(jìn)體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞增殖與生長(zhǎng)，且Caspase 3蛋白活性降低。結(jié)果提示，破血逐瘀中藥水蛭和土鱉蟲在體外的抗腫瘤效應(yīng)無量效關(guān)系，低濃度時(shí)甚至能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)，提示在臨床中需慎用。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 1.目的：觀察破血逐瘀中藥對(duì)體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞增殖及生長(zhǎng)的影響。 2.基本思路：活血化瘀類藥物在中醫(yī)藥抗腫瘤中廣泛應(yīng)用，但也應(yīng)注意部分藥物也可能導(dǎo)致病情惡化或轉(zhuǎn)移的副作用。本文以破血逐瘀中藥水蛭、土鱉蟲體外干預(yù)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞，并采用MTT法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法等方法觀察這兩種藥物對(duì)細(xì)胞增殖抑制及生長(zhǎng)的影響，旨在更好的指導(dǎo)臨床用藥。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 1.既往的研究報(bào)道對(duì)這兩種藥物均稱具有抗腫瘤作用，根據(jù)我們的實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，在體外大劑量運(yùn)用時(shí)的確具有抑制作用，但隨著干預(yù)劑量的減少，該抑制作用不但沒有消失，反而具有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的作用，該發(fā)現(xiàn)對(duì)目前此類藥物在臨床抗腫瘤中的應(yīng)用提出了挑戰(zhàn)。 2.本文采用的體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞技術(shù)，所采用檢測(cè)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)增殖及凋亡的方法均為標(biāo)準(zhǔn)、公認(rèn)和先進(jìn)的方法，保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的科學(xué)性和先進(jìn)性。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 我們從增殖生長(zhǎng)以及凋亡兩方面四個(gè)觀察指標(biāo)觀察兩種破血逐瘀藥物水蛭、土鱉蟲對(duì)體外培養(yǎng)肝癌HepG2細(xì)胞的影響，結(jié)果表明：其蛋白水提物在高濃度時(shí)能抑制腫瘤細(xì)胞增殖與生長(zhǎng)，但在低濃度時(shí)反而能促進(jìn)其增殖與生長(zhǎng)，且劑量無明顯直線關(guān)系，提示在臨床應(yīng)用該兩種破血逐瘀藥用于抗腫瘤時(shí)要謹(jǐn)慎。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 摘要：觀察破血逐瘀中藥對(duì)體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞增殖及生長(zhǎng)的影響。本文選取破血逐瘀中藥中的水蛭和土鱉蟲為研究對(duì)象，體外干預(yù)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞，采用MTT比色法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞活性及生長(zhǎng)增殖情況，Tunel法及Caspase 3蛋白活性檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，水蛭、土鱉蟲蛋白提取物在高濃度時(shí)（水蛭＞200μg/ml、土鱉蟲﹥1000μg/ml）對(duì)體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞增殖與生長(zhǎng)有抑制作用，能使Caspase 3蛋白活性增高；低濃度時(shí)反而能促進(jìn)體外培養(yǎng)HepG2細(xì)胞增殖與生長(zhǎng)，且Caspase 3蛋白活性降低。結(jié)果提示，破血逐瘀中藥水蛭和土鱉蟲在體外的抗腫瘤效應(yīng)無量效關(guān)系，低濃度時(shí)甚至能促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖與生長(zhǎng)，提示在臨床中需慎用。
獲獎(jiǎng)情況
- 1） 譚茜,徐愛良,彭延古,等.全蝎純化液抗實(shí)驗(yàn)性血栓的研究[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2010,9（30）:54-55.獲“湖南中醫(yī)藥大學(xué)優(yōu)秀論文3等獎(jiǎng)” 2） 易小民,譚茜,彭延古,等.全蝎純化液對(duì)凝血酶誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞釋放血管性血友病因子和6-酮-前列腺素F1α的影響[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合急救雜志,2010,17（6）:334-336. 3）該作品已被《湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)》錄用。
鑒定結(jié)果
- 該項(xiàng)目選題新穎，具有創(chuàng)新性；實(shí)驗(yàn)方法科學(xué)，路線設(shè)計(jì)合理；實(shí)驗(yàn)結(jié)果為進(jìn)一步研究奠定了良好的基礎(chǔ)，對(duì)臨床合理用藥具有一定的指導(dǎo)意義。
參考文獻(xiàn)
- [1] Lin J，Yan XJ，Chen HM．Fascaplysin，a selective CDK4 inhibtor，exhibit antiangiogenic activity in vitro and in vivo.Cancer Chemother Pharmacol，2007，59：439-445． [2]韓雅莉,謝昆.土鱉蟲糖蛋白的提取及抗腫瘤活性初步研究[J]. 汕頭大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版),2006,21(4):46-50. [3] Ahmedin J，Taylor，Elizabeth W，et a1．Cancer statistics， CA Cancer J Clin，2005，55：10-30. [4] 林吉品．中醫(yī)藥在惡性腫瘤治療中的作用機(jī)理探析。光明中醫(yī)，2009，24(2)：207-208． [5] 于瑞發(fā)，王杰，張博，等.復(fù)方水蛭素提取物抗移植性腫瘤的實(shí)驗(yàn)研究[J],實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2007,24(5):599-601. [6] 王麗,劉曉燕,段承剛,等.TSA對(duì)人肝癌HepG2細(xì)胞增殖、凋亡及FHIT表達(dá)的影響[J].山東醫(yī)藥,2010,50(35):6-8.
同類課題研究水平概述
- 惡性腫瘤，中醫(yī)認(rèn)為屬于“瘕瘕”、“積聚”的范疇，與血脈瘀滯、 瘀血內(nèi)結(jié)有密切關(guān)系。瘀血滯絡(luò)，引起不同程度的氣滯、血瘀或津凝等病理變化，日久則氣血痰互結(jié)，積久蘊(yùn)毒，毒損脈絡(luò)，瘀毒橫逆旁竄，五臟損傷?，F(xiàn)代研究也發(fā)現(xiàn)：當(dāng)腫瘤患者微循環(huán)障礙時(shí)， 有利于促進(jìn)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移， 而腫瘤細(xì)胞毒性物質(zhì)的刺激等又可加重微循環(huán)障礙。癌癥患者的血液中往往存在著癌細(xì)胞或微小癌栓，造成血液黏稠度增加、微循環(huán)功能障礙，促進(jìn)癌細(xì)胞的增殖，腫瘤增大或轉(zhuǎn)移?？梢娧鍪前┌Y發(fā)生的主要病理改變。 因此，中醫(yī)活血化瘀法則在臨床惡性腫瘤的臨床治療中得到廣泛應(yīng)用。具有代表性的中藥有效成分藥物包括川芎嗪、 水蛭素、 丹參酮、莪術(shù)油等，其他還有三七醇提液、丹參注射液等。但對(duì)于活血化瘀藥物的運(yùn)用還是存有爭(zhēng)議，雖然活血化瘀藥物在臨床腫瘤的治療中存在積極作用，但中藥有效成分復(fù)雜，即使提取物中某種有效成分具有抗腫瘤作用，但其他成分在臨床治療中會(huì)發(fā)揮何種作用？目前仍然不得而知。 已有部分報(bào)道顯示，活血化瘀藥物在惡性腫瘤的治療中，尤其在腫瘤轉(zhuǎn)移的問題上有爭(zhēng)議。如韓俊慶等用活血化瘀中藥合并放療治療鼻咽癌，發(fā)現(xiàn)活血化瘀中藥組患者血行轉(zhuǎn)移率是對(duì)照組的2.67倍；此外有報(bào)道丹參對(duì)大鼠 W256癌細(xì)胞的血行擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移有明顯促進(jìn)作用。 由此帶給我們思考，活血化瘀藥物在臨床該如何運(yùn)用？活血化瘀藥物在抗癌和促癌兩者之間，到底哪些成分是抗癌作用，哪些成分是促癌作用？這些問題將是我們今后需深入探討的問題。 對(duì)于惡性腫瘤的治療，古人也對(duì)“血瘀”病理有深入的認(rèn)識(shí)，雖然未能如西醫(yī)闡明發(fā)病機(jī)制，但通過天人相應(yīng)的中醫(yī)整體觀念對(duì)中醫(yī)治療腫瘤的各種治療方法做出更為全面和深刻的闡釋。倡導(dǎo)活血化瘀藥物應(yīng)重視臨床配伍，除了根據(jù)“痰”、“熱毒”等標(biāo)實(shí)配合理氣化痰法、清熱解毒法治療以外，尤其重視人體的正氣，正所謂“正氣存內(nèi)，邪不可干?！睆?qiáng)調(diào)“扶正”的重要性，補(bǔ)養(yǎng)氣血，調(diào)理脾胃后天之本，護(hù)津滋陰。因此，辨證的擬方用藥在很大程度上可以消除活血化瘀藥物的可能潛在副作用。 因此，基于活血化瘀藥物潛在的促癌作用，我們以破血逐瘀中藥水蛭、土鱉蟲體外干預(yù)人肝癌細(xì)胞株HepG2細(xì)胞，并采用MTT法、細(xì)胞計(jì)數(shù)法等方法觀察這兩種藥物對(duì)細(xì)胞增殖抑制及生長(zhǎng)的影響，旨在為中醫(yī)抗腫瘤臨床用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，更好的指導(dǎo)臨床用藥，并提醒臨床抗腫瘤的運(yùn)用中對(duì)破血逐瘀中藥須慎用。
