基本信息
- 項目名稱：
- 三葉因子家族在大鼠頜下腺和舌下腺的定位
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 采用免疫組化、原位雜交和RT-PCR檢測TFFs基因和多肽在大鼠頜下腺和舌下腺的表達。RT-PCR顯示大鼠頜下腺有TFF1,2,3 mRNA轉錄。頜下腺TFF1只表達于顆粒曲管上皮細胞胞質；TFF2 和 TFF3分布在閏管、紋狀管和小葉間導管上皮細胞胞質，導管管腔，上皮游離面更明顯。原位雜交證實TFFsmRNA位于頜下腺導管上皮細胞的胞漿和胞核。舌下腺導管上皮細胞胞質呈TFF1,2,3多肽陽性。
- 詳細介紹：
- 1. 本作品屬于自然科學領域。 2. 主要技術內容：在充分調研文獻的基礎上，選擇了三葉因子家族在大鼠唾液腺的定位作為研究的突破點，以便能增加頜下腺和舌下腺生物活性多肽的技術指標。此實驗為開放性研究，其結果填補了國內外三葉因子家族在大鼠頜下腺和舌下腺研究方面的空白，為大鼠下頜下腺和舌下腺分泌多種生物活性物質提供了更為廣泛的理論依據(jù)。頜下腺和舌下腺TFF家族的定位部分由科研興趣小組的同學共同完成，我們能夠獨立并熟練完成從實驗準備、取材、包埋、切片、PAS染色、免疫組化和原位雜交染色，到RT－PCR等一系列實驗操作，后期圖像分析在科研興趣小組指導老師的幫助下完成。實驗鍛煉了我們的實踐能力并豐富了我們的科研思維。為以后的學習和工作打下了堅實的基礎。此外，同學們還參與了課題組老師的“三葉因子家族在大鼠實驗胃潰瘍愈合中的作用”研究。從而為TFFs的臨床研究和治療提供依據(jù)及幫助。 3、技術經濟指標：本實驗以免疫組化、原位雜交和RT-PCR技術揭示了TFF家族在唾液腺的表達情況。 4、推廣應用情況：本結果豐富了大鼠頜下腺和舌下腺生物活性物質的類型，并為深入研究頜下腺和舌下腺TFF家族的作用奠定了基礎。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：探討三葉因子家族在大鼠頜下腺和舌下腺的定位 基本思路：三葉因子與消化性潰瘍和炎癥性腸道疾病的關系密切,TFFs 能促進胃腸道上皮細胞移行和修復。我們已經初步證實頜下腺和舌下腺分泌的TFF2及TFF3參與大鼠實驗性胃潰瘍的愈合過程。本實驗旨在應用免疫組織化學，原位雜交和RT-PCR法探討TFF1.2.3多肽和基因在大鼠頜下腺和舌下腺的定位，期待更近一步了解大鼠頜下腺和舌下腺。
科學性、先進性及獨特之處
- 從蛋白及基因水平檢測了大鼠頜下腺和舌下腺TFF家族的定位，揭示了頜下腺和舌下腺腺泡分泌物的性質，闡述了TFFs分泌形式即發(fā)揮作用方式，填補了大鼠頜下腺和舌下腺關于TFFs的空白。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 為TFFs在大鼠頜下腺和舌下腺的表達提供形態(tài)學證據(jù)，首次證實大鼠頜下腺和舌下腺表達TFF1，填補了頜下腺和舌下腺分泌的生物活性多肽中三葉因子1的資料，為進一步研究下頜下腺內三葉因子的表達與潰瘍的愈合提供了依據(jù)資料。
學術論文摘要
- 目的 研究三葉因子家族成員基因和多肽，在大鼠頜下腺和舌下腺的表達，探討其在頜下腺和舌下腺的定位。 方法：采用免疫組織化學、原位雜交和RT-PCR檢測TFF1,TFF2和TFF3 mRNA和多肽在大鼠頜下腺和舌下腺的定位。結果：頜下腺TFF1只表達于顆粒曲管的上皮細胞胞質中；TFF2 和 TFF3分布在閏管上皮細胞、紋狀管和小葉間導管的胞質中。分泌管管腔也可見陽性物，分泌管和小葉間導管游離面陽性信號更為強烈。RT-PCR顯示：大鼠頜下腺也有TFF1,2,3 mRNA表達，且雄性大鼠的表達強于雌性大鼠。原位雜交顯示陽性信號位于頜下腺導管上皮細胞的胞漿和胞核。舌下腺的導管胞質和胞核呈TFF1,2,3 mRNA陽性，胞質呈TFF1,2,3多肽陽性。結論：在大鼠頜下腺和舌下腺的管腔上皮細胞中均廣泛表達TFF1,2,3，雄性大鼠中表達更為顯著，并可能通過腔分泌發(fā)揮生理作用。
獲獎情況
- 未發(fā)表，投稿中
鑒定結果
- 由于時間及物力原因，未及鑒定。
參考文獻
- Bossenmeyer-Pourié C, Kannan R, Ribieras S, Wendling C, Stoll I, Thim L, Tomasetto C, Rio MC(2002) The trefoil factor 1 participates in gastrointestinal cell differentiation by delaying G1-S phase transition and reducing apoptosis.J Cell Biol.157(5):761-70. Dalla Valle L, Toffolo V, Belvedere P, Alibardi L(2005).Isolation of a mRNA encoding a glycine-proline-rich beta-keratin expressed in the regenerating epidermis of lizard. Dev Dyn. 234(4):934-47. Devine DA, High AS, Owen PJ, Poulsom R, Bonass WA(2000) Trefoil factor expression in normal and diseased human salivary glands. Hum Pathol 31:509-515. Hoffmann W(2005). Trefoil factors TFF (trefoil factor family) peptide-triggered signals promoting mucosal restitution. Cell Mol Life Sci 62(24):2932-8. Jagla W, Wiede A, Hoffmann W (1999) Localization of TFF3 peptide to porcine conjunctival goblet cells. Cell Tissue Res 296:525–530
同類課題研究水平概述
- 頜下腺和舌下腺屬于消化腺。頜下腺所產生的生物活性物質可歸納為4大類:①生長分化因子，如NGF、EGF等；② 內環(huán)境穩(wěn)定因子，如激肽釋放酶等；③細胞內調節(jié)因子：如脂肽酶等；④消化酶，如酸性磷酸酶等。近年來研究證實,下頜下腺可以分泌近50種生物活性物質,如5-HT、神經肽Y、神經生長因子(NGF)等,頜下腺分泌的某些因子完全達到激素水平,因此它具有外分泌腺和內分泌腺的雙重功能,在機體中發(fā)揮著越來越重要的作用。隨著現(xiàn)代組織學研究方法、手段的不斷改進,學者們對下頜下腺形態(tài)結構和功能意義的研究又有了很大的進展,同時又檢測到了許多新的生物活性物質。國內關于下頜下腺的研究也已起步。大鼠下頜下腺呈P物質、血管活性腸肽、神經肽Y、β-內啡肽、胃泌素免疫反應陽性。這些神經肽免疫反應物主要分布于GCT細胞內,多呈強陽性反應,紋狀管、小葉間導管免疫反應物較少,而腺泡細胞為陰性，P物質、血管活性腸肽、降鈣素基因相關肽。黃威權等應用抗獨特型單克隆抗體的免疫組織化學方法，觀察到大鼠下頜下腺漿液性腺泡細胞及各級導管的上皮細胞呈運動神經細胞誘向因子陽性，這些活性因子對神經的生長與發(fā)育具有重要的營養(yǎng)作用。大鼠下頜下腺顆粒曲管(GCT)上皮細胞均呈LH和LHR免疫反應陽性,上述細胞同樣含有LH和LHR mRNA雜交信號,即大鼠下頜下腺這類上皮細胞既能產生LH,又能表達LHR；還有FSHR和FSH免疫反應陽性物質共存，自分泌運動因子及其受體、瘦素及其受體、GnRH及其受體,陽性物質共同分布在胞質內的報道，說明LH、FSH、瘦素和GnRH對下頜下腺功能作用可能是通過自分泌或旁分泌的作用來實現(xiàn)的。我們也發(fā)現(xiàn)三葉因子2定位于在大鼠下頜下腺各級導管，腺泡陰性，并存在性別差異。王煒等首次觀察到在大鼠下頜下腺各級導管上皮細胞內有5-羥色胺及其受體，因此提出下頜下腺不僅含有蛋白質類和肽類生物活性物質, 也含有單胺類生物活性物質。 經查閱國內外文獻未見關于大鼠頜下腺和舌下腺TFF家族成員（TFF1，TFF2，TFF3）的報道。本研究國際領先。
