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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 一株虎杖糖苷水解酶產(chǎn)生菌的篩選、鑒定及其酶學(xué)特性的研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 采用濾紙熒光斑點(diǎn)-薄層層析法同步測定，從瀏陽河附近土壤中分離獲得一株虎杖糖苷水解酶活力高的棘孢曲霉Lysgpj-10。粗酶液經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳電洗脫二步循環(huán)法分離純化，該酶為β-葡萄糖苷酶，為單體蛋白，分子量為27.3kDa，等電點(diǎn)為4.65。該酶水解虎杖苷的最適pH為5.0，最適...(查看更多)
- 詳細(xì)介紹：
- 生物轉(zhuǎn)化與催化是生物技術(shù)革命的第三個(gè)浪潮，目前生物轉(zhuǎn)化法制備白藜蘆醇是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。本作品采用濾紙熒光斑點(diǎn)-薄層層析法同步測定，從瀏陽河附近土壤中分離獲得一株虎杖糖苷水解酶活力高的菌株Lysgpj-10。經(jīng)形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定...(查看更多)
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：提供一項(xiàng)虎杖糖苷水解酶產(chǎn)生菌的篩菌方案及該酶的分離純化方案。 基本思路： 1、采用濾紙熒光斑點(diǎn)-薄層層析法相組合的篩菌方案； 2、發(fā)酵產(chǎn)酶條件優(yōu)化和菌種鑒定，虎杖糖苷水解酶轉(zhuǎn)化PD生成產(chǎn)物的HPLC鑒定； 3、虎杖糖苷水解酶的分離純化及其酶學(x...(查看更多)
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 1、PD的糖苷鍵是β-構(gòu)型，β-葡萄糖苷酶能切斷其糖苷鍵生成Res，因此可通過產(chǎn)β-葡萄糖苷酶的微生物轉(zhuǎn)化PD生成Res。 2、采用應(yīng)用較為廣泛的虎杖微生物發(fā)酵法。 3、①采用濾紙熒光斑點(diǎn)-薄層層析同步測定的方法篩選高效菌株；②采用Amicon XM-50、聚丙烯酰胺凝膠電泳...(查看更多)
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 菌株Lysgpj-10發(fā)酵制備的復(fù)合酶能從虎杖材料中高效提取PD及其類似物，提取率為2.3%，未加所述復(fù)合酶（對照）同等條件下的提取率僅為1.2%，處理提高了91.7%。用所述復(fù)合酶將PD轉(zhuǎn)化為Res，轉(zhuǎn)化率達(dá)99.5%以上。用分離純化得到的虎杖糖苷水解酶將PD（濃度1.5%）轉(zhu...(查看更多)
學(xué)術(shù)論文摘要
- 采用濾紙熒光斑點(diǎn)-薄層層析法同步測定，從瀏陽河附近土壤中分離獲得一株虎杖糖苷水解酶活力高的菌株Lysgpj-10。經(jīng)分子生物學(xué)測定18s rDNA和5.8s rDNA之間ITS保守序列，構(gòu)建進(jìn)化樹以及形態(tài)學(xué)鑒定，確定該菌為棘孢曲霉（Aspergillus aculeatus Lysgpj-...(查看更多)
獲獎(jiǎng)情況
- 2011年5月榮獲我校大學(xué)生學(xué)術(shù)科技作品競賽二等獎(jiǎng)。 2011年5月榮獲我省大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽二等獎(jiǎng)。
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- 1、薄層層析-紫外分光光度法測定酶解液中Res和PD的含量 [1] 劉新榮, 高麗萍, 夏濤, 鄒偉偉, 陳恩昊. 薄層層析-紫外分光光度法測定葡萄果皮中白藜蘆醇及白藜蘆醇苷[J]. 生物學(xué)雜志, 2008, 25（5）. 2、薄層掃描儀測定薄板上熒光斑點(diǎn)的Res或PD的含量 [1] 舒友琴, 陳敏, 楊喜花, 王巍. 薄層熒光...(查看更多)
同類課題研究水平概述
- 1、袁潤蕾的論文（時(shí)珍國醫(yī)國藥，2008）利用一株根霉菌株T34對10%虎杖苷粗提物進(jìn)行液態(tài)發(fā)酵，使虎杖苷轉(zhuǎn)化成白藜蘆醇，采用薄層色譜法確定在優(yōu)化發(fā)酵條件下轉(zhuǎn)化時(shí)間為26. 8 h，通過高效液相色譜法證明虎杖苷轉(zhuǎn)化為白藜蘆醇，...(查看更多)
