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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 五種苜蓿細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中超氧化物歧化酶活性的變化研究
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 文章主要介紹了不同苜蓿種類（五種）中懸浮細(xì)胞中超氧化物歧化酶活性的變化研究
- 詳細(xì)介紹：
- 文章主要通過(guò)培養(yǎng)苜蓿愈傷組織，再將其培養(yǎng)成懸浮細(xì)胞，再獲得各種類苜蓿的懸浮細(xì)胞后，研究在其生長(zhǎng)過(guò)程中超氧化物岐化酶活性的變化狀態(tài)，為今后超氧化物歧化酶的規(guī)模化培養(yǎng)奠定基礎(chǔ)。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：本實(shí)驗(yàn)選擇從苜蓿細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中監(jiān)測(cè)SOD活性，以期獲得SOD活性的生長(zhǎng)變化曲線，得出最佳活性的細(xì)胞生長(zhǎng)階段。總結(jié)該實(shí)驗(yàn)的成功經(jīng)驗(yàn)和失敗教訓(xùn)，為下一步條件的優(yōu)化提供一定的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和理論基礎(chǔ)。 基本思路：苜蓿愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)——>苜蓿細(xì)胞中SOD的粗提——>SOD的純化——>細(xì)胞干重、SOD活性及蛋白含量的測(cè)定——>繪制苜蓿細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中SOD活性及活力的生長(zhǎng)變化曲線——>分析討論
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 科學(xué)性：本實(shí)驗(yàn)采用SOD活性測(cè)量的經(jīng)典方法，準(zhǔn)確、可靠。 先進(jìn)性：本實(shí)驗(yàn)從苜蓿細(xì)胞的整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程中測(cè)其SOD活性以比較不同生長(zhǎng)階段下SOD活性的強(qiáng)弱，有利于掌握苜蓿細(xì)胞SOD活性最佳的細(xì)胞生長(zhǎng)階段。 獨(dú)特性：本實(shí)驗(yàn)采用從培養(yǎng)工程中的苜蓿細(xì)胞中提取SOD,并測(cè)量其活性，在國(guó)內(nèi)及國(guó)外的同類研究中少見。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 由于SOD是一種自由基清除劑,可清除機(jī)體內(nèi)的活性氧，具有抗寒、抗旱、抗鹽、抗污染、防輻射、抗炎、抗衰老、預(yù)防腫瘤和癌癥以及自身免疫治療等作用，受到國(guó)內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。 苜蓿細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中SOD的酶活性和比活力變化以確定SOD活性和比活力的變化曲線，得出其SOD活性最高的生長(zhǎng)階段，可進(jìn)一步為快速、準(zhǔn)確的細(xì)胞工程化培養(yǎng)獲得最佳SOD酶活性奠定基礎(chǔ)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)五種苜蓿（阿爾岡金、安格、三德利、德寶和苜蓿王）進(jìn)行愈傷組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)，確定五種苜蓿的最優(yōu)激素水平配比，并在各自最優(yōu)激素水平配比的基礎(chǔ)上，經(jīng)懸浮培養(yǎng)得到各種苜蓿的細(xì)胞懸液。利用90%飽和度的硫酸銨鹽析法提純SOD，再經(jīng)pH7.8,0.05 mol/L的磷酸緩沖液使沉淀重懸后，通過(guò)NBT-光還原法測(cè)定不同時(shí)期細(xì)胞內(nèi)SOD的酶活性。結(jié)果表明：不同品種苜蓿的最優(yōu)激素水平配比不同，最大酶活性和最大比活力都出現(xiàn)在第6天，但彼此有差異。不同品種苜蓿的最優(yōu)激素水平配比(2,4-Dmg?L-１/6-BAmg?L-１)、最大酶活性（U/g）和最大比活力（U/mg）結(jié)果分別對(duì)應(yīng)為：阿爾岡金(1.5/0.2)、165.44和226.32，安格(1.5/0.5)、194.74和225.13，三德利(2.0/0.1)、206.18和234.30，德寶(2.0/0.2)、233.27和189.65，苜蓿王(1.5/0.1)、213.12和213.33，并進(jìn)一步獲得了五種苜蓿SOD酶活性和比活力的生長(zhǎng)曲線。
獲獎(jiǎng)情況
- 暫無(wú)
鑒定結(jié)果
- 暫無(wú)
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 到目前為止人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的三萬(wàn)多種天然物質(zhì)中有80%來(lái)自高等植物，尤其是各種維系人們健康的藥物。隨著運(yùn)用植物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物技術(shù)的發(fā)展。在世界范圍內(nèi)已有近1000種植物進(jìn)行過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)方面的研究[2]，有關(guān)的天然代謝產(chǎn)物包括藥物、香料、色素、食品添加劑等數(shù)百種，其中以活性藥物的研究發(fā)展最為迅速。目前，紫草、煙草和人參(根培養(yǎng))的培養(yǎng)研究已達(dá)到工業(yè)化規(guī)模，另有一批植物如紅豆杉、長(zhǎng)春花、薯蕷等也達(dá)到中試水平。并正向工業(yè)化規(guī)模過(guò)渡。這些研究事實(shí)使我們有理由相信植物細(xì)胞培養(yǎng)工程的巨大潛在生產(chǎn)力以及由此而帶來(lái)的可觀的社會(huì)、經(jīng)濟(jì)效益。 這些天然物質(zhì)由于結(jié)構(gòu)復(fù)雜，大部分無(wú)法用人工方法如有機(jī)合成來(lái)制備。近年來(lái)由于現(xiàn)代工業(yè)的發(fā)展，將自然環(huán)境逐漸破壞而縮小，使得高經(jīng)濟(jì)價(jià)值天然化合物的發(fā)現(xiàn)和利用更加困難。而植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)正是解決這些困難的一個(gè)強(qiáng)有力的武器，現(xiàn)在正是從天然資源中發(fā)展藥物的時(shí)代。對(duì)那些自然界不能大量提供，而且又不能用化學(xué)合成方法獲得的化學(xué)產(chǎn)品，生物技術(shù)將提供一條全新的生產(chǎn)途徑來(lái)解決這一矛盾。 苜蓿含有豐富的蛋白質(zhì)、礦物質(zhì)和維生素等重要的營(yíng)養(yǎng)成分，并含有動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育所必需的氨基酸、微量元素和未知生長(zhǎng)因子。近十幾年來(lái)，隨著植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的迅速發(fā)展，某些植物來(lái)源的蛋白質(zhì)和酶類己有可能通過(guò)組織培養(yǎng)的細(xì)胞獲得。苜蓿的組織培養(yǎng)最早見于Saunders 和Bingham等(1972) 的報(bào)道,通過(guò)器官形成和體胚愈傷組織發(fā)育兩條途徑, 最終分化成完整的植株。1981 年,楊燮榮在國(guó)內(nèi)首次利用紫花苜蓿葉片、葉柄、莖段為外植體,采用MS +2 ,4 - D 的配方誘導(dǎo)出愈傷組織,并成功分化出苗,經(jīng)過(guò)180d 的溫室培養(yǎng),獲得了苜蓿的再生植株。 國(guó)內(nèi)外對(duì)苜蓿愈傷組織誘導(dǎo)和體胚發(fā)生等方面進(jìn)行了一系列的基礎(chǔ)、應(yīng)用開發(fā)研究和試驗(yàn)。至于苜蓿細(xì)胞（原生質(zhì)體）培養(yǎng)中，就原生質(zhì)體獲得方面做了一定的探討。但對(duì)苜蓿細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)有用代謝產(chǎn)物如：SOD酶等的研究，目前，幾乎沒(méi)有見報(bào)道
