基本信息
- 項目名稱：
- 雷公藤內(nèi)生真菌的分離及抗腫瘤活性菌株篩選
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 該研究采用微生物分離純化技術(shù)從雷公藤嫩莖和葉中獲得75株不同性狀的菌株，并采用MTT法對發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗腫瘤活性篩選,發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)菌株萃取物對不同腫瘤細胞均具有不同程度的細胞毒活性，并對4株具有較強的選擇性細胞毒活性菌株進行了初步鑒定。
- 詳細介紹：
- 據(jù)WHO統(tǒng)計，過去幾年來全球每年死于惡性腫瘤的病人高達700萬人以上，惡性腫瘤正逐年成為世界死亡人數(shù)最多的疾病。因此全球?qū)x擇性高，副作用小的抗腫瘤藥物的需求也隨之急速增長?？鼓[瘤藥物以往主要來源于植物和海洋生物等途徑，從植物內(nèi)生真菌中獲取具有藥用價值的天然產(chǎn)物不僅可以突破植物資源缺乏，再生周期長等限制，而且利用工業(yè)化發(fā)酵還可以實現(xiàn)天然活性化合物大規(guī)模、低成本、無污染的生產(chǎn)。 近年來人們從藥用植物內(nèi)生真菌中分離得到許多具有抗腫瘤活性的物質(zhì)，例如，從短葉紅豆杉內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物中分離得到紫杉醇，從長春花的內(nèi)生真菌次生代謝產(chǎn)物中分離得到長春新堿類似物等。目前，從內(nèi)生真菌代謝產(chǎn)物中尋找具有抗腫瘤活性的結(jié)構(gòu)新穎的先導(dǎo)化合物正逐漸成為新的研究方向，該研究對開發(fā)新型抗腫瘤藥物具有重要意義。 植物內(nèi)生真菌是一個龐大的特殊的真菌類群，幾乎所有的植物組織中都發(fā)現(xiàn)有內(nèi)生真菌的存在。由于真菌與植物之間長期的相互作用和共同進化，其代謝產(chǎn)物十分豐富，包括殺蟲、抗菌和抗腫瘤等活性物質(zhì)。因此，植物內(nèi)生真菌現(xiàn)已成為尋找抗腫瘤藥物的重要來源。 我國藥用植物資源十分豐富，對其內(nèi)生真菌的研究將有利于我國微生物藥物的開發(fā)和珍稀植物資源的保護。本文采用微生物分離純化技術(shù)，從采自江蘇省雷公藤生產(chǎn)基地的雷公藤莖及葉中分離得到75株不同形態(tài)的內(nèi)生真菌；并選用BGC823（人胃癌細胞）、HCT-8（人結(jié)腸癌細胞）、Bel-7402（人肝癌細胞）、A549（人肺癌細胞）、A2780（人卵巢癌細胞）為指標，采用MTT法對其發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗腫瘤活性篩選，結(jié)果顯示大多數(shù)菌株均具有不同程度的細胞毒活性，部分菌株具有較強的選擇性細胞毒活性；根據(jù)內(nèi)生真菌的形態(tài)特征并參閱陸家云的《植物病原真菌學(xué)》、《中國的真菌》和H.L.巴尼特《半只菌屬圖解》等書籍對較強活性的菌株進行分類、鑒定確定分類地位。 本研究為企業(yè)及臨床解決了雷公藤植物資源缺乏問題，為進一步新藥研究奠定基礎(chǔ)，并且對發(fā)展植物內(nèi)生真菌理論也具有重要意義。
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 撰寫目的：從雷公藤中分離純化出內(nèi)生真菌，并對其發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗腫瘤活性篩選，為進一步尋找并發(fā)現(xiàn)新型先導(dǎo)化合物，進行新藥研究奠定基礎(chǔ)。 基本思路：采用微生物分離純化技術(shù)從雷公藤嫩莖和葉中分離純化內(nèi)生真菌，選用BGC823、HCT-8、Bel-7402、A549、A2780為指標，采用MTT法對發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗腫瘤活性篩選,并對細胞毒活性較強菌株進行初步鑒定。
科學(xué)性、先進性及獨特之處
- 該研究采用微生物分離純化技術(shù)從雷公藤嫩莖和葉中獲得75株不同性狀的菌株，并采用MTT法對發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗腫瘤活性篩選,發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)菌株萃取物對不同腫瘤細胞均具有不同程度的細胞毒活性，并對4株具有較強的選擇性細胞毒活性菌株進行了初步鑒定，研究思路清晰，研究方法科學(xué)，研究結(jié)果明確，與人們生活緊密結(jié)合，在臨床醫(yī)學(xué)上具有很強的實用性。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 該研究發(fā)現(xiàn)了雷公藤中具有抗腫瘤作用的內(nèi)生真菌，為進一步新藥研究奠定了基礎(chǔ)；利用工業(yè)化發(fā)酵實現(xiàn)天然活性化合物大規(guī)模、低成本、無污染的生產(chǎn)，不僅可以滿足企業(yè)和臨床的需求，而且還可以保護珍稀、瀕危藥用植物資源，有較好的應(yīng)用前景。該研究對發(fā)展植物內(nèi)生真菌理論也具有重要意義。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的：從雷公藤莖及葉中分離內(nèi)生真菌，并對其發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗腫瘤活性篩選。方法：采用微生物分離純化技術(shù)從雷公藤嫩莖中分離純化內(nèi)生真菌，選用BGC823（人胃癌細胞）、HCT-8（人結(jié)腸癌細胞）、Bel-7402（人肝癌細胞）、A549（人肺癌細胞）、A2780（人卵巢癌細胞）為指標，采用MTT法對發(fā)酵產(chǎn)物進行體外抗腫瘤活性篩選。結(jié)果：從雷公藤根、莖及葉中分擇性抑制作用。結(jié)論：雷公藤內(nèi)生真菌種類多樣，具有很好的研究和應(yīng)用價值離純化得到75株內(nèi)生真菌，其中4株內(nèi)生真菌發(fā)酵產(chǎn)物對不同腫瘤細胞具有顯著選。
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻
- [1] 鄒文欣. 譚仁詳. 植物內(nèi)生菌的研究進展[J]. 植物學(xué)報,2001,4 3(9): 881一892 [2] 曹理想，周世寧.植物內(nèi)生放線菌研究[J].微生物學(xué)通報,2004,31(4),93- 96 [3] 劉蘊哲,何勁,張杰,等.植物內(nèi)生真菌及其活性代謝產(chǎn)物研究進展[J].菌物研究，2005,3(4):30-36 [4] Carroll G, Fungal endophtes in stems and leaves: from latent pathogen mutulistic symbiont[J]. Ecology, 1988,69:2-9 [5] Petrini O, Sieber TN, TotiL, Viret O. Ecology metabolite production and substrate utilization in endophyttic fungi[J]. Nat Toxins,1992，1（3）：85-96 [6] 黎萬奎，胡之壁.內(nèi)生菌與天然藥物[J].中國天然藥物，2005，3 (4)193-199 [7] 林永成，周世寧.海洋微生物及其代謝產(chǎn)物[M]，北京: 化學(xué)工業(yè)出版社，2003 [8] 郭良棟. 內(nèi)生真菌研究進展[J] 菌物系統(tǒng),2001,20(1) :148-152
同類課題研究水平概述
- 植物內(nèi)生真菌是指生活在植物體內(nèi)或生活史的一定階段處于植物體內(nèi)的真菌，它的涵蓋面相當廣，包括菌根真菌和植物病原菌(梁宇和高玉葆 2000；Lu et al, 2000；Service, 2000)。也有人認為內(nèi)生真菌是指存在于健康植物的莖葉中，不形成明顯病癥的真菌(Lu et al, 2000；Service, 2000)； 植物內(nèi)生真菌在植物微生態(tài)系統(tǒng)中長期與宿主建立了和諧的聯(lián)合關(guān)系,其次生代謝產(chǎn)物十分豐富(梁宗琦 1999)。 1991年,美國蒙大拿州立大學(xué)植物病理系有機化學(xué)家 A. Stierle 從短葉紅豆杉的韌皮部分離到一株產(chǎn)新型抗癌物質(zhì)紫杉醇的內(nèi)生真菌 Taxomyces andreanae（Stierle et al，1993），引起人們對植物內(nèi)生真菌抗腫瘤活性的極大注意，以后從多種植物內(nèi)生真菌中陸續(xù)分離到紫杉醇等抗腫瘤活性物質(zhì)(Noh et al., 1999；Strobel et al., 1996；Li et al., 1998)。表明了植物內(nèi)生真菌是人們尋找新型抗腫瘤藥物的重要來源。 近年來從多種藥用植物內(nèi)生真菌中篩選獲得的各種生理活性物質(zhì)產(chǎn)生菌陸續(xù)見有報道（馬天有和董兆麟，1999；李海燕等，1999 王偉等， 1999；邱德有等，1994；王建鋒等，1999； Zhang et al，1998）。但從雷公藤中純化分離篩選獲得具有抗腫瘤活性的菌株尚未見報道。
