基本信息
- 項目名稱：
- 電針對不同血壓水平大鼠的鎮(zhèn)痛效應觀察
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 臨床發(fā)現(xiàn)，疼痛與血壓異常在同一個體可同時/相繼發(fā)生，血壓影響疼痛性疾病的防治，因此有必要針對血壓異常個體的疼痛防治開展研究工作，以推進疼痛治療的臨床療效。本課題主要以不同血壓水平福氏佐劑致大鼠慢性疼痛模型為研究對象，在檢測正常血壓、高血壓、低血壓疼痛模型大鼠痛閾的基礎上進行電針干預，觀察電針治療不同血壓水平疼痛的療效，從而探討機體不同血壓水平對針刺鎮(zhèn)痛療效的影響。
- 詳細介紹：
- 據(jù)不完全統(tǒng)計，浙江省疼痛的發(fā)病率大約為３５％-４５％，老年人的發(fā)病率較高，約為７５％-９０％；血壓異常發(fā)病率高達40%，嚴重影響了人們的生活質(zhì)量和經(jīng)濟建設。臨床發(fā)現(xiàn)，疼痛與血壓異常在同一個體可同時/相繼發(fā)生，血壓影響疼痛性疾病的防治，因此有必要針對血壓異常個體的疼痛防治開展研究工作，以推進疼痛治療的臨床療效。國內(nèi)外的針灸療法對疼痛和血壓異常個體均有明確的良性調(diào)整作用，但是針灸治療血壓異常性疼痛的療效缺乏證據(jù)。本課題主要以不同血壓水平福氏佐劑致大鼠慢性疼痛模型為研究對象，在檢測正常血壓、高血壓、低血壓疼痛模型大鼠痛閾的基礎上進行電針干預，觀察電針治療不同血壓水平疼痛的療效，從而探討機體不同血壓水平對針刺鎮(zhèn)痛療效的影響。研究成果將對針灸臨床有理論指導價值，將促進浙江省血壓異常性疼痛治療水平的提高，補充和完善針灸治療疾病的種類，有助于推廣中醫(yī)針灸治療。 (一)實驗材料 1．實驗動物 健康wistar大鼠40只，體重180-200g，SPF級，購自上海市西普爾—必凱實驗動物有限公司，由浙江中醫(yī)藥大學動物實驗中心飼養(yǎng)； 健康SHR大鼠 16只，體重180-200g，SPF級，購自上海斯萊克實驗動物有限責任公司，由浙江中醫(yī)藥大學動物實驗中心飼養(yǎng)。 2．主要實驗試劑 復方降壓片、生理鹽水、福氏完全佐劑、75％醫(yī)用酒精。 3．主要儀器設備 電子稱重儀、不銹鋼大鼠籠、FA-2004型電子分析天平、電熱恒溫鼓風干燥箱、純水機、無創(chuàng)血壓測量儀、機械刺激縮足痛閾測量儀、電針治療儀、針灸針、手套、注射器、16號灌胃針 。 （二）實驗方法與步驟 1．實驗動物及分組 成年雄性Wistar大鼠30只和成年雄性自發(fā)性高血壓大鼠（SHR大鼠）12只，體重160~180 g,由浙江中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供。飼養(yǎng)環(huán)境為12 h晝夜節(jié)律變換,室溫控制在18~24℃,濕度控制在50%~70%,大鼠自由飲食,待適應環(huán)境5 d后用于實驗。所有實驗動物的處理符合國際疼痛研究會制定的準則。 將30只成年雄性Wistar大鼠隨機分為空白對照組、正常血壓A組（正常血壓AA模型+EA組）、正常血壓B組（正常血壓AA模型組）、低血壓A組（低血壓AA模型+EA組）和低血壓B組（低血壓AA模型組）；將12只SHR大鼠隨機分為高血壓A組（高血壓AA模型+EA組）、高血壓B組（高血壓AA模型組）。每組6只； 2．制作低血壓大鼠模型 對低血壓A組和低血壓B組采用復方降壓片灌胃造模。將復方降壓片與生理鹽水按20ml/片混合，配成懸濁液，以16ml/kg標準對大鼠進行灌胃，早晚各一次，連續(xù)灌胃兩周后測量體重、血壓，血壓≦90mmHg的大鼠進入實驗。治療期間也持續(xù)灌胃，早晚各一次； 3．外周佐劑性慢性炎癥痛模型制作 建立低血壓模型后，將福氏完全佐劑（sigma）乳劑0.1ml（0.5mg/ml）注入6組大鼠左側足跖皮下，使其局部產(chǎn)生紅、腫、痛等炎性反應，注射建立慢性炎癥痛模型（AA模型）。從而建立了正常血壓復合AA模型（正常血壓AA模型）、低血壓復合AA模型（低血壓AA模型）和高血壓復合AA模型（高血壓AA模型）； 4．取穴 取穴參照《中國獸醫(yī)針灸學》[9]的方法取穴,并參照人體有關穴位,以動物比較學方法定位,用0?25 mm×13 mm的毫針針刺(正常血壓A組、低血壓A組和高血壓A組均使用此規(guī)格針具)。取左側“足三里”穴和任意臨近部位； 5．電針治療參數(shù) 給正常血壓A組、低血壓A組和高血壓A組進行電針治療,刺激參數(shù)如下：電針刺激左側“足三里”穴和一臨近部位，疏密波(2/100 Hz)，強度依次為1-2-3 mA,每10 min遞增1次,持續(xù)30 min。每天一次，共十天； 6．血壓檢測 于造血壓模型前后及治療后24h采用無創(chuàng)血壓測量儀檢測各組大鼠的血壓變化，以確保實驗期間血壓維持在一定水平； 7．電針鎮(zhèn)痛效應檢測 于造AA模型前后、治療前以及治療后24h采用機械刺激縮足閾(paw withdrawal me-chanical threshold, PWMT)檢測各組大鼠的痛閾變化，以觀察電針治療血壓復合慢性炎癥痛大鼠的鎮(zhèn)痛效應； （三） 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件處理。統(tǒng)計數(shù)據(jù)描述用均數(shù)±標準差（ ±S）表示；進行單因素方差分析（One-Way A NOVA），組間兩兩比較， P<0?05作為差異顯著性標準，表達差異有統(tǒng)計學意義。方差齊性時用LSD檢驗，方差不齊時用Dunnett –t檢驗。 （四）項目實施基礎 本校有設施完備的動物實驗中心，提供清潔級實驗大鼠和全封閉清潔級實驗環(huán)境。而第三臨床醫(yī)學院擁有針灸神經(jīng)生物學重點實驗室，擁有分子生物實驗區(qū)、免疫生化實驗區(qū)、病理形態(tài)實驗區(qū)、神經(jīng)行為功能檢測區(qū)及相關儀器設備，并已具備以下實驗設備：大鼠測痛儀、酶標儀、切片機、包埋機、顯微鏡、圖像分析系統(tǒng)、高速/低速冷凍離心機、電泳系統(tǒng)、半干轉印槽、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外交聯(lián)儀、暗箱系統(tǒng)、低溫冰箱等。兩方面都能夠提供本項目開展所需的儀器設備和場地需要，保證項目順利完成。 動物實驗中心工作人員以及實驗室人員擁有熟練的操作技術，可從理論與技術上給予該項目有力的支持，從而確保實驗的完成。 指導老師自參加工作以來，一直從事針刺鎮(zhèn)痛效應基礎研究，研究方向為針刺鎮(zhèn)痛與免疫調(diào)節(jié)的相關性研究。該基金項目“電針對不同血壓水平大鼠的鎮(zhèn)痛效應觀察”擬說明機體不同血壓水平影響針刺鎮(zhèn)痛療效，與指導老師的研究方向相同。而且指導老師工作認真負責，進一步保證了該項目的順利完成。 本課題組成員具有強烈的求知欲、刻苦的鉆研精神，嚴謹?shù)墓ぷ髯黠L以及良好的團隊協(xié)作精神。在實驗室人員以及導師的指導下，能夠熟練掌握實驗技術，合作完成該項目。 良好的工作條件、優(yōu)秀的指導老師和一支團結進取的團隊是保證本項目順利完成的最大優(yōu)勢。同時該項目本身又具備了獨有的特色與創(chuàng)新之處。 （五）結論 該項目研究結果表明持續(xù)電針左側“足三里”穴10天，對于正常血壓水平下、低血壓水平下和高血壓水平下的疼痛均具有明顯的鎮(zhèn)痛效應。本研究還發(fā)現(xiàn)不同血壓水平下電針鎮(zhèn)痛效應具有差異性。在低血壓水平下，電針的鎮(zhèn)痛效應最強；其次是高血壓水平下；而正常血壓水平下電針的鎮(zhèn)痛效應相對一般。這也提示了機體不同血壓水平影響電針鎮(zhèn)痛效應，低血壓水平可能更有助于電針鎮(zhèn)痛效應的發(fā)揮?？梢?電針鎮(zhèn)痛療法在臨床上可以根據(jù)病人的血壓水平再進行進一步的優(yōu)化改進。而血壓水平差異影響電針鎮(zhèn)痛效應的機制也有待于進一步的研究。 此外，本研究還得出高血壓水平下機體自身對疼痛的緩解能力較正常血壓水平和低血壓水平強，這也提示了高血壓水平可能更有助于機體自身對疼痛的緩解。這也為疼痛臨床分析提供了一個很好的理論參考依據(jù)。而此方面的機制則有待于進一步的研究。 綜上所述，血壓異常性疼痛的針灸治療研究有利于針灸臨床療效的提高，也將促進針刺鎮(zhèn)痛基礎理論研究的深入開展和針灸療法的推廣應用。而隨著針灸療法的日益普及，這方面的研究也將越來越受到人們的重視。
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本作品主要以不同血壓水平福氏完全佐劑致大鼠慢性疼痛模型為研究對象，在檢測正常血壓、高血壓、低血壓疼痛模型大鼠痛閾的基礎上進行電針干預，觀察電針治療不同血壓水平疼痛的療效，探討機體不同血壓水平對針刺鎮(zhèn)痛療效的影響。從而對針灸臨床進行理論指導，促進浙江省血壓異常性疼痛治療水平的提高，促進針刺鎮(zhèn)痛基礎理論研究的深入開展和針灸療法的推廣應用。
科學性、先進性及獨特之處
- 該作品通過觀察電針療法對正常血壓水平、高血壓水平和低血壓水平慢性疼痛大鼠痛閾的干預，說明不同血壓水平電針鎮(zhèn)痛效應的差別，推動針灸療法對不同血壓水平慢性疼痛的治療，并提高其臨床療效。 該作品的特色之處在于：首次采用福氏佐劑致慢性疼痛-血壓復合模型對照研究針刺鎮(zhèn)痛問題。該作品的創(chuàng)新之處在于：本作品結合國內(nèi)外研究現(xiàn)狀，針對血壓-疼痛相關的研究，首次進行異常血壓水平針刺鎮(zhèn)痛效應探討。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 該作品能通過說明機體不同血壓水平對針刺鎮(zhèn)痛療效的影響，推動針灸療法對不同血壓水平疼痛性疾病的治療，并提高其臨床療效，促進針刺鎮(zhèn)痛基礎理論研究的深入開展和針灸療法的推廣應用，從而開拓針灸治療疾病的市場，間接推動針灸行業(yè)的盈利。
學術論文摘要
- [摘要] 目的：觀察不同血壓水平下電針鎮(zhèn)痛的效應差異。方法：將成年雄性Wistar大鼠隨機分為空白對照組、正常血壓A組、正常血壓B組、低血壓A組和低血壓B組；成年雄性SHR大鼠分為高血壓A組、高血壓B組。以腹腔注射復方降壓片復合足跖部注射福氏完全佐劑（sigma）建立低血壓復合慢性炎癥痛模型（以下簡稱血壓AA模型），同時建立正常血壓復合慢性炎癥痛模型和高血壓復合慢性炎癥痛模型。采用機械刺激縮足閾(PWMT)作為痛閾指標。觀察電針治療前后各組大鼠的痛閾變化。結果：造疼痛模型后,炎側痛閾值明顯減小(P<0?05)；對正常血壓A組、低血壓A組和高血壓A組大鼠進行電針治療后，痛閾值明顯翻轉 (P<0?05),且該效應在低血壓A組和高血壓A組都強于正常血壓A組；而不做電針治療的正常血壓B組、低血壓B組和高血壓B組痛閾無明顯變化 (P>0?05)。結論：不同血壓水平下電針鎮(zhèn)痛效應具有差異性。在低血壓和高血壓水平下，電針的鎮(zhèn)痛效應更強。
獲獎情況
- 該項目為浙江中醫(yī)藥大學科研基金項目以及浙江省大學生科技創(chuàng)新項目，榮獲省立項資助經(jīng)費5000元，校配套5000元；同時也榮獲浙江中醫(yī)藥大學校級科研基金項目立項資助800元，學院配套400元。而本作品即為該項目的成果。目前正待發(fā)表。
鑒定結果
- 通過鑒定
參考文獻
- 一、現(xiàn)有技術： 1.低血壓大鼠模型制作技術[1] 2.外周佐劑性慢性炎癥痛模型制作技術[2] 3.取穴技術[3] 4.電針治療技術[4] 5.血壓檢測技術[5] 6.電針鎮(zhèn)痛效應檢測技術[6] 7.數(shù)據(jù)分析技術[7] 二、相關技術文獻的檢索目錄： [1] 楊路. 針刺十二原穴對高、低血壓大鼠模型血壓影響的經(jīng)穴效應規(guī)律研究. 國家重點基礎研究發(fā)展計劃(973計劃):87. [2] 張非煜,萬有,張震康,傅開元。福爾馬林與完全福氏佐劑疼痛模型大鼠脊髓環(huán)氧合酶兩種亞型表達比較.中國疼痛醫(yī)學雜志.2008；14(4)：226-229. [3] 于船等.中國獸醫(yī)針灸學會.中國獸醫(yī)針灸學:北京農(nóng)業(yè)大學出版社,1984:212. [4] 林文注，王佩等.實驗針灸學.上海科學技術出版社，1999:215-217. [5] 鄧江,吳芹,黃燮南等. 經(jīng)大鼠尾動脈無創(chuàng)性血壓測量的方法. 遵義醫(yī)學院學報.2008;31(2):184-186. [6] 杜金,黃宇光,羅愛倫. 普瑞巴林對大鼠慢性炎性疼痛治療過程中嗎啡急性耐受的抑制作用. 中國臨床藥理學與治療學.2008; 13(11):1249-1253. [7] 陸守曾等.醫(yī)學統(tǒng)計學.北京:中國統(tǒng)計出版社,2002:4.
同類課題研究水平概述
- 已有研究發(fā)現(xiàn)：血壓與疼痛存在相關性。持續(xù)血壓水平變化與痛感覺相關。疼痛與血壓異常在同一個體可同時/相繼發(fā)生，血壓影響疼痛性疾病的防治。血壓-疼痛之間存在相互影響的復雜關系。 電針是針灸治療疼痛的主要方法，其鎮(zhèn)痛效應已經(jīng)得到大量臨床實踐的證明和廣大患者的廣泛認同。研究表明：電針可能通過抑制炎性痛病灶局部感覺神經(jīng)末梢合成、釋放SP、IL-1β，從而發(fā)揮消炎鎮(zhèn)痛作用。 電針對血壓也有一定的調(diào)節(jié)作用。國內(nèi)外發(fā)現(xiàn)：電針刺激神門穴能顯著得降低血壓；而電針針刺低血壓大鼠的人中穴以及刺激大鼠的足三里、曲池、豐隆、內(nèi)關四穴均可引起升壓作用等等。 電針鎮(zhèn)痛效應受很多因素的影響。大量研究表明，不同電針刺激參數(shù)影響電針鎮(zhèn)痛效應，其中包括電針頻率、電針強度、電針時間間隔、電針時程以及電針次數(shù)。也有學者從個體痛閾值的差異、實驗操作因素以及穴位與非穴位因素等方面出發(fā)，探究電針鎮(zhèn)痛療效的影響因素。 藥物是電針鎮(zhèn)痛效應的重要影響因素之一。研究發(fā)現(xiàn)某些藥物能夠加強電針的鎮(zhèn)痛療效，如i?p?褪黑素（MEL）、中縫大核(NRM)內(nèi)微量注入催產(chǎn)素以及曲馬多與電針合用等。還有些藥物能夠削弱電針的鎮(zhèn)痛效應，如：向小鼠腦室內(nèi)注射少量CaCl2、腹腔注射異博定(verapamil)、中縫大核(NRM)內(nèi)注入抗催產(chǎn)素血清、局部注射β-內(nèi)啡肽(β-EP) 抗血清和亮腦啡肽（LEK）抗血清、鞘內(nèi)注射生長抑素拮抗劑、側腦室內(nèi)微量注射L-Arg以及延髓中縫大核(NRM)微量注射L-精氨酸(L-Arg)等。還有一些藥物由于不同的定量與定位，能對電針鎮(zhèn)痛效應產(chǎn)生不同的影響，如孤啡肽(OFQ)和納洛酮(naloxone，NX)。 以上研究表明：血壓水平與疼痛程度有關，而電針可對血壓和疼痛進行調(diào)節(jié)。其中國內(nèi)外對于電針鎮(zhèn)痛療效的影響因素已經(jīng)做了廣泛的研究，但目前還沒有對血壓是否影響電針鎮(zhèn)痛療效進行研究。我們也無法確切的了解不同血壓水平對電針鎮(zhèn)痛的療效是否有影響。可見，國內(nèi)外的針灸療法對疼痛和血壓異常個體均有明確的良性調(diào)整作用，但是針灸治療血壓異常性疼痛的療效缺乏證據(jù)。因此有必要針對血壓異常個體的疼痛防治開展研究工作，以推進疼痛治療的臨床療效。
