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基本信息
- 項目名稱：
- 黃芪注射液對大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)的影響研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 目前有關(guān)大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)的研究國內(nèi)外較少。本文在指導(dǎo)教師課題組的前期研究工作基礎(chǔ)上，應(yīng)用免疫組化和RT-PCR方法檢測了HIF-1α基因在脊髓損傷后不同時間點的表達(dá)情況，得出了HIF-1α基因在損傷脊髓組織中有明顯表達(dá)，而且在第三天時表達(dá)水平達(dá)到高峰，得出黃芪注射液通過促進(jìn)HIF-1α基因的表達(dá)，對損傷的脊髓組織起到保護(hù)作用。
- 詳細(xì)介紹：
- 關(guān)于大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)的研究，國內(nèi)外較少；對“黃芪注射液對大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)的影響”的研究，國內(nèi)外目前未見相關(guān)報道。 脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）臨床多見且致癱率高,本作品旨在探討大鼠脊髓損傷后不同時相低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）的表達(dá)規(guī)律、黃芪對HIF-1α表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步研究黃芪注射液對大鼠脊髓損傷后的作用及機(jī)制，以為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 選取成年雄性Wistar大鼠108只，隨機(jī)分成假手術(shù)組、模型組和黃芪注射液干預(yù)組，并分為術(shù)后1ｄ、3ｄ、5ｄ、7ｄ、14d、21ｄ六個時相點。大鼠脊髓損傷模型制備應(yīng)用自制改良Allen`s造模設(shè)備。各組分別進(jìn)行BBB功能評分，采用免疫組化和反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測HIF-1α基因的表達(dá)變化。BBB功能評分結(jié)果：假手術(shù)組運(yùn)動功能良好，模型組與黃芪注射液干預(yù)組造模后運(yùn)動功能基本喪失，隨著時間推移開始恢復(fù)，黃芪注射液干預(yù)組恢復(fù)速度大于模型組。免疫組化結(jié)果顯示：假手術(shù)組脊髓組織中極少能檢測到HIF-1α免疫陽性細(xì)胞，模型組稍有增多，黃芪注射液干預(yù)組明顯增多，各實驗組結(jié)果之間均有統(tǒng)計學(xué)意義( P＜0. 05)。傷后1d, HIF-1α陽性產(chǎn)物開始增多,傷后3d達(dá)峰值，細(xì)胞定位于胞漿和/或胞核。HIF-1α免疫陽性細(xì)胞數(shù)在傷后3～7d期間一直維持在一個較高水平。RT-PCR結(jié)果顯示：模型組脊髓損傷后各個時間點HIF-1α mRNA平均光密度值均較假手術(shù)組明顯增加（P<0.05），且在3d出現(xiàn)高峰，之后逐漸下降；與模型組相比，黃芪注射液組各個時間點脊髓HIF-1α mRNA條帶光密度值均明顯增加（P<0.05）。 結(jié)果提示, 脊髓損傷后，黃芪注射液通過促進(jìn)HIF-1α基因的表達(dá)，可提高組織和細(xì)胞對缺血缺氧環(huán)境的適應(yīng)，進(jìn)而發(fā)揮對神經(jīng)系統(tǒng)的保護(hù)與修復(fù)作用。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 脊髓損傷（spinal cord injury,SCI）臨床多見且致癱率高,其有兩種創(chuàng)傷機(jī)制作用于脊髓：原發(fā)性損傷及在其基礎(chǔ)上發(fā)展起來的繼發(fā)性損傷，如何防止繼發(fā)性損傷的發(fā)生、發(fā)展是目前研究的熱點。本課題旨在討論大鼠脊髓損傷后不同時相低氧誘導(dǎo)因子-1α（HIF-1α）的表達(dá)規(guī)律、黃芪對HIF-1α表達(dá)的影響，從而進(jìn)一步研究黃芪注射液對大鼠脊髓損傷后的作用及機(jī)制，以為其臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 脊髓損傷早期，有效控制缺血、缺氧誘導(dǎo)的繼發(fā)性病理損傷是減輕脊髓損傷的關(guān)鍵。HIF-1α 可提高組織和細(xì)胞對缺血缺氧環(huán)境的適應(yīng)。黃芪在缺血、低氧時, 有清除氧自由基和改善微循環(huán)障礙等功效。 故選題科學(xué)、先進(jìn)。用免疫組化和RT-PCR反應(yīng)分別在蛋白和mRNA水平上研究不同時間點HIF-1α表達(dá)，相關(guān)文獻(xiàn)較少。黃芪注射液對大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)的影響研究, 當(dāng)前國內(nèi)外未見文獻(xiàn)報道。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 脊髓損傷是臨床上常見的致癱率較高的疾病，常導(dǎo)致?lián)p傷平面以下運(yùn)動及感覺功能不完全或完全喪失。當(dāng)前國際，脊髓損傷人數(shù)不斷增多。多年來，人們對脊髓損傷修復(fù)一直持悲觀態(tài)度。因此，研究脊髓損傷機(jī)制、防治繼發(fā)性損傷, 促進(jìn)神經(jīng)損傷修復(fù)和神經(jīng)再生，具有重要意義，已成為當(dāng)前國內(nèi)外研究熱點之一。另外, 通過本研究, 可能對脊髓損傷后的治療提供新靶點, 并為黃芪在臨床脊髓損傷患者中的應(yīng)用, 提供重要理論依據(jù)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的 觀察黃芪注射液對大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)影響。 方法 選取雄性Wistar大鼠（260-280g）108只，隨機(jī)分成假手術(shù)組（A組，n=36）、模型組（B組，n=36），黃芪注射液干預(yù)組（C組，n=36），A組大鼠只開椎板，B、C組大鼠采用改良Allen`s造模法制備大鼠脊髓損傷模型，并分為術(shù)后1ｄ、3ｄ、5ｄ、7ｄ、14d、21ｄ亞組。各組分別進(jìn)行BBB功能評分，采用免疫組化和RT-PCR檢測HIF-1α基因的表達(dá)。 結(jié)果 免疫組化結(jié)果：假手術(shù)組脊髓組織中極少能檢測到HIF-1α免疫陽性細(xì)胞，模型組稍有增多，黃芪注射液干預(yù)組明顯增多。傷后1d, HIF-1α陽性產(chǎn)物增多,傷后3d達(dá)峰值，細(xì)胞定位于胞漿和/或胞核。RT-PCR結(jié)果：模型組脊髓損傷后各個時間點HIF-1α mRNA平均光密度值均較假手術(shù)組明顯增加（P<0.05），且在3d出現(xiàn)高峰，之后逐漸下降；與模型組相比，黃芪注射液組各個時間點脊髓HIF-1α mRNA平均光密度值均明顯增加（P<0.05）。 結(jié)論 黃芪注射液通過促進(jìn)HIF-1α基因的表達(dá)，對損傷的脊髓組織起到保護(hù)作用。
獲獎情況
- 承德醫(yī)學(xué)院大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽一等獎
鑒定結(jié)果
- （無）
參考文獻(xiàn)
- 技術(shù)： 1、Allen's造模方法 2、BBB功能評分方法 3、免疫組化技術(shù) 4、反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR技術(shù)）
同類課題研究水平概述
- 目前，脊髓損傷的治療方法趨于多樣化，但效果平平，都無法到達(dá)預(yù)期的治療效果。目前國內(nèi)外研究脊髓損傷的主要方向：⑴減少脊髓損傷后早期創(chuàng)傷、炎癥等有害作用。⑵對脊髓再生給予營養(yǎng)支持，阻止抑制因子的影響。⑶支持軸突再生，促進(jìn)損傷軸突和靶器官的聯(lián)系。⑷開發(fā)利用不完全脊髓損傷的殘存功能和仍完整的神經(jīng)纖維。治療最重要的原則仍是血壓支持，外科治療的效果仍不明確，早期手術(shù)的指征和時機(jī)需進(jìn)一步研究，大劑量類固醇的應(yīng)用已成為標(biāo)準(zhǔn)治療的方法之一，功能性電刺激的研究正在積極進(jìn)行，近期專家研究發(fā)現(xiàn)HIF-1α基因修飾神經(jīng)干細(xì)胞移植可促進(jìn)脊髓損傷軸突再生，減少膠質(zhì)細(xì)胞增生和膠質(zhì)疤痕形成，為神經(jīng)再生提供有利的微環(huán)境。西醫(yī)藥物治療脊髓損傷包括激素、維生素等。中藥治療脊髓損傷的實驗研究已經(jīng)越來越廣泛，而且成果較令人滿意，其中包括黃芪、丹參、補(bǔ)陽還五湯等，也為臨床治療脊髓損傷提供了理論依據(jù)。當(dāng)前治療趨于聯(lián)合應(yīng)用，損傷機(jī)制尚待進(jìn)一步研究。關(guān)于大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)的研究，國內(nèi)外較少；對“黃芪注射液對大鼠脊髓損傷后HIF-1α基因表達(dá)的影響”的研究，國內(nèi)外目前未見相關(guān)報道。
