基本信息
- 項目名稱：
- 葉酸對大鼠胎盤發(fā)育中Bcl-2表達的影響
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 葉酸預防出生缺陷的機制及安全性研究成為熱點。胎盤發(fā)育狀態(tài)直接維系著胎兒的正常發(fā)育，Bcl-2是細胞凋亡的重要調節(jié)因子。本研究觀察葉酸對胎盤發(fā)育的影響及Bcl-2在胎盤組織中的表達情況，從細胞水平探討葉酸對發(fā)育中胎盤細胞的作用及機制，為葉酸預防出生缺陷的科學性及安全性提供依據(jù)。本實驗將SD受孕大鼠灌服葉酸和生理鹽水，取胎盤制備組織切片、染色，觀察胎盤形態(tài)結構及Bcl-2的表達情況。
- 詳細介紹：
- 葉酸作為參與細胞核酸合成的維生素，臨床以往主要用于治療貧血。自上世紀90年代始，葉酸用于預防胎兒出生缺陷，目前國內孕婦圍孕期葉酸補充已基本普及。葉酸預防出生缺陷的機制及安全性研究成為熱點。胎盤是為胎兒提供營養(yǎng)的特有器官，其發(fā)育狀態(tài)直接維系著胎兒的正常發(fā)育。已知Bcl-2是細胞凋亡的重要調節(jié)因子，它通過抑制凋亡而達到增殖與凋亡的平衡，進而維持組織的完整性。關于葉酸與發(fā)育中胎盤Bcl-2表達關系的研究尚未見報道。本研究觀察葉酸對胎盤發(fā)育的影響及Bcl-2在胎盤組織中的表達情況，從細胞水平探討葉酸對發(fā)育中胎盤細胞的作用及機制，為葉酸預防出生缺陷的科學性及安全性提供依據(jù)。SD受孕大鼠隨機分為四組:大、中、小劑量葉酸組，對照組，分別給予葉酸（2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d）或等容生理鹽水灌胃。孕13.5天各組大鼠處死，取胎盤制備組織切片，行HE和SP免疫細胞化學染色，觀察胎盤形態(tài)結構及Bcl-2的表達情況。結果，各葉酸組大鼠胎盤組織結構與對照組比較無明顯改變；大、中、小劑量葉酸組Bcl-2的陽性表達較對照組均顯著增高（P<0.01）。上述結果提示，給予受孕大鼠灌服2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d劑量葉酸，可增強胎盤組織中凋亡抑制基因Bcl-2的表達，進而可能抑制細胞凋亡，維持胎盤正常發(fā)育。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 觀察葉酸對SD大鼠胎盤中凋亡因子Bcl-2表達的影響，探討葉酸對胎盤發(fā)育的作用及其可能機制，為臨床孕婦科學、合理的補充葉酸提供理論依據(jù)和實驗資料。本研究給予受孕大鼠葉酸，以受孕13.5d胎盤中Bcl-2的陽性細胞數(shù)為觀察指標，從細胞水平探討葉酸對發(fā)生過程中胎盤細胞凋亡的作用及機制。
科學性、先進性及獨特之處
- 臨床應用葉酸以預防神經(jīng)管畸形等出生缺陷，但其作用機制不明。Bcl-2是細胞凋亡過程中的關鍵性調節(jié)因子，可通過抑制凋亡而維持胎盤組織的完整性，胎盤細胞Bcl-2的表達與胎盤生長發(fā)育密切相關。關于葉酸影響B(tài)cl-2的表達與胎盤細胞發(fā)生關系的研究尚屬首次。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 本研究選擇妊娠期特有的器官胎盤作為研究對象，因為胎兒的生長發(fā)育離不開胎盤的營養(yǎng)。凋亡調節(jié)因子Bcl-2可通過抑制凋亡而維持組織的完整性。本研究通過觀察葉酸對胎盤發(fā)育及Bcl-2在胎盤組織中表達的影響，探討葉酸對胎盤組織細胞增殖的影響，為臨床服用葉酸的時間，劑量及安全性提供參考，為優(yōu)生優(yōu)育、提高出生人口素質提供科學理論依據(jù)。
學術論文摘要
- 目的 通過給予受孕大鼠灌服不同劑量葉酸，觀察凋亡抑制基因Bcl-2在胎鼠胎盤組織中的表達情況，探討葉酸對處于胚胎發(fā)育時期胎盤的影響，為臨床服用葉酸預防出生缺陷提供實驗依據(jù)。 方法 雌性成年SD大鼠隨機分為四組：對照組、大、中、小劑量葉酸組。各組動物受孕后，實驗組分別灌胃給予大、中、小劑量葉酸，對照組灌服等量生理鹽水。ED13.5天各組大鼠斷椎處死，取胎盤組織，常規(guī)制備組織切片，進行HE染色和SP免疫細胞化學染色，觀察胎盤一般形態(tài)結構及Bcl-2的表達情況。 結果 大、中、小葉酸組大鼠胎盤組織結構與對照組比較無明顯變化。大、中、小劑量葉酸組大鼠胎盤組織中Bcl-2的陽性表達較對照組均有增高，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.01）。 結論 給予受孕大鼠灌服不同劑量葉酸，可增強胎鼠胎盤組織中凋亡抑制基因Bcl-2的表達，進而可能抑制細胞凋亡，維持胎盤正常發(fā)育。
獲獎情況
- 2011年獲得承德醫(yī)學院大學生課外學術競賽一等獎
鑒定結果
- 情況屬實,學生獨立完成
參考文獻
- 葉酸對神經(jīng)系統(tǒng)畸形的預防作用及機制研究廣泛開展，但關于胎盤細胞中Bcl-2表達作用的研究未見報道。該實驗應用免疫組化技術顯示Bcl-2陽性細胞，具有特異性強、敏感度高的特點。 [1]農(nóng)正祥，陳真燕 2種葉酸檢測與妊中期孕婦中關系的分析[J]中外醫(yī)療 2010.No.4 58-60 [2]張淑敏 葉酸與妊娠 [J]繼續(xù)醫(yī)學教育2006，Vol.20.No.34:62 [3].李東志 林其德 細胞凋亡與胎盤 [J]免疫學雜志 1999年2期15卷 [4]Stephen C , Smit h P , Baker N. Placental apoptosis is increased in post - term pregnancies. British [J] Obstet rics Gynecology , 1999 , 106(8) :861 – 862.
同類課題研究水平概述
- 葉酸作為預防出生缺陷的藥物逐漸成為研究熱點。以往臨床主要使用葉酸治療貧血，自20世紀90年代以來，國內外主要將葉酸作為預防神經(jīng)管畸形、先天性心臟病等出生缺陷的首選藥物。文獻報道，孕早期補充葉酸可使神經(jīng)管畸形的發(fā)病率降低50%～70%，先天性心臟病發(fā)病率降低35.5%。關于葉酸對胎盤細胞發(fā)生影響的研究發(fā)現(xiàn)，葉酸的體內活性形式四氫葉酸是一碳單位轉移酶的輔酶，主要參與胎盤細胞DNA和RNA的合成，與其生長、分化、增殖等生物活動密切相關。B cl-2 是1984 年由Tsujimoto等從14 號與18 號染色體易位的濾泡性淋巴瘤中分離出的一種原癌基因。已知B cl-2 可控制核內外物質的運輸、抑制Ca2+ 的釋放或阻斷細胞內過氧化物的堆積而抑制細胞的凋亡。因此近年來Bcl-2作為一項評估細胞凋亡的指標廣泛用于組織細胞凋亡的觀察。胚胎細胞Bcl-2的表達對細胞增殖與器官發(fā)生、器官功能的建立以及干細胞的分化發(fā)育密切相關。 Kim YI等研究發(fā)現(xiàn)葉酸預防消化道腫瘤發(fā)生的機制為維持正常的DNA甲基化狀態(tài)以及DNA前體的穩(wěn)定，葉酸水平降低可致DNA不穩(wěn)定和鏈斷裂，但其是否在胎盤等增殖快的細胞有類似作用尚無明確報道。2008年有文獻報道，孕晚期孕婦血液葉酸清除率較正常人高100% 。由于孕婦對葉酸的攝入、排泄、利用增加,極易出現(xiàn)葉酸缺乏, 葉酸的代謝異?？芍苯訉е绿ケP的發(fā)育障礙，從而影響胎兒組織分化、生長發(fā)育。有人提出葉酸缺乏可通過降低DNA甲基化水平來干擾胚胎代謝和發(fā)育的假設。已有實驗證明葉酸缺乏孕鼠子代腦組織DNA甲基化水平降低。而有關葉酸與Bcl-2表達的關系目前國內外尚無報道。 本實驗首次探討了葉酸對SD大鼠胎盤Bcl-2表達的影響，為臨床服用葉酸的時間及安全性提供參考，也為預防流產(chǎn)、早產(chǎn)等妊娠相關疾病提供新思路。
