題-1_100_100.jpg)
基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 葉酸對(duì)大鼠胎盤發(fā)育中Bcl-2表達(dá)的影響
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 葉酸預(yù)防出生缺陷的機(jī)制及安全性研究成為熱點(diǎn)。胎盤發(fā)育狀態(tài)直接維系著胎兒的正常發(fā)育，Bcl-2是細(xì)胞凋亡的重要調(diào)節(jié)因子。本研究觀察葉酸對(duì)胎盤發(fā)育的影響及Bcl-2在胎盤組織中的表達(dá)情況，從細(xì)胞水平探討葉酸對(duì)發(fā)育中胎盤細(xì)胞的作用及機(jī)制，為葉酸預(yù)防出生缺陷的科學(xué)性及安全性提供依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)將SD受孕大鼠灌服葉酸和生理鹽水，取胎盤制備組織切片、染色，觀察胎盤形態(tài)結(jié)構(gòu)及Bcl-2的表達(dá)情況。
- 詳細(xì)介紹：
- 葉酸作為參與細(xì)胞核酸合成的維生素，臨床以往主要用于治療貧血。自上世紀(jì)90年代始，葉酸用于預(yù)防胎兒出生缺陷，目前國(guó)內(nèi)孕婦圍孕期葉酸補(bǔ)充已基本普及。葉酸預(yù)防出生缺陷的機(jī)制及安全性研究成為熱點(diǎn)。胎盤是為胎兒提供營(yíng)養(yǎng)的特有器官，其發(fā)育狀態(tài)直接維系著胎兒的正常發(fā)育。已知Bcl-2是細(xì)胞凋亡的重要調(diào)節(jié)因子，它通過抑制凋亡而達(dá)到增殖與凋亡的平衡，進(jìn)而維持組織的完整性。關(guān)于葉酸與發(fā)育中胎盤Bcl-2表達(dá)關(guān)系的研究尚未見報(bào)道。本研究觀察葉酸對(duì)胎盤發(fā)育的影響及Bcl-2在胎盤組織中的表達(dá)情況，從細(xì)胞水平探討葉酸對(duì)發(fā)育中胎盤細(xì)胞的作用及機(jī)制，為葉酸預(yù)防出生缺陷的科學(xué)性及安全性提供依據(jù)。SD受孕大鼠隨機(jī)分為四組:大、中、小劑量葉酸組，對(duì)照組，分別給予葉酸（2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d）或等容生理鹽水灌胃。孕13.5天各組大鼠處死，取胎盤制備組織切片，行HE和SP免疫細(xì)胞化學(xué)染色，觀察胎盤形態(tài)結(jié)構(gòu)及Bcl-2的表達(dá)情況。結(jié)果，各葉酸組大鼠胎盤組織結(jié)構(gòu)與對(duì)照組比較無明顯改變；大、中、小劑量葉酸組Bcl-2的陽(yáng)性表達(dá)較對(duì)照組均顯著增高（P<0.01）。上述結(jié)果提示，給予受孕大鼠灌服2mg/kg/d、1mg/kg/d、0.5mg/kg/d劑量葉酸，可增強(qiáng)胎盤組織中凋亡抑制基因Bcl-2的表達(dá)，進(jìn)而可能抑制細(xì)胞凋亡，維持胎盤正常發(fā)育。
作品圖片
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 觀察葉酸對(duì)SD大鼠胎盤中凋亡因子Bcl-2表達(dá)的影響，探討葉酸對(duì)胎盤發(fā)育的作用及其可能機(jī)制，為臨床孕婦科學(xué)、合理的補(bǔ)充葉酸提供理論依據(jù)和實(shí)驗(yàn)資料。本研究給予受孕大鼠葉酸，以受孕13.5d胎盤中Bcl-2的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為觀察指標(biāo)，從細(xì)胞水平探討葉酸對(duì)發(fā)生過程中胎盤細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 臨床應(yīng)用葉酸以預(yù)防神經(jīng)管畸形等出生缺陷，但其作用機(jī)制不明。Bcl-2是細(xì)胞凋亡過程中的關(guān)鍵性調(diào)節(jié)因子，可通過抑制凋亡而維持胎盤組織的完整性，胎盤細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)與胎盤生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)。關(guān)于葉酸影響B(tài)cl-2的表達(dá)與胎盤細(xì)胞發(fā)生關(guān)系的研究尚屬首次。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 本研究選擇妊娠期特有的器官胎盤作為研究對(duì)象，因?yàn)樘旱纳L(zhǎng)發(fā)育離不開胎盤的營(yíng)養(yǎng)。凋亡調(diào)節(jié)因子Bcl-2可通過抑制凋亡而維持組織的完整性。本研究通過觀察葉酸對(duì)胎盤發(fā)育及Bcl-2在胎盤組織中表達(dá)的影響，探討葉酸對(duì)胎盤組織細(xì)胞增殖的影響，為臨床服用葉酸的時(shí)間，劑量及安全性提供參考，為優(yōu)生優(yōu)育、提高出生人口素質(zhì)提供科學(xué)理論依據(jù)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的 通過給予受孕大鼠灌服不同劑量葉酸，觀察凋亡抑制基因Bcl-2在胎鼠胎盤組織中的表達(dá)情況，探討葉酸對(duì)處于胚胎發(fā)育時(shí)期胎盤的影響，為臨床服用葉酸預(yù)防出生缺陷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 雌性成年SD大鼠隨機(jī)分為四組：對(duì)照組、大、中、小劑量葉酸組。各組動(dòng)物受孕后，實(shí)驗(yàn)組分別灌胃給予大、中、小劑量葉酸，對(duì)照組灌服等量生理鹽水。ED13.5天各組大鼠斷椎處死，取胎盤組織，常規(guī)制備組織切片，進(jìn)行HE染色和SP免疫細(xì)胞化學(xué)染色，觀察胎盤一般形態(tài)結(jié)構(gòu)及Bcl-2的表達(dá)情況。 結(jié)果 大、中、小葉酸組大鼠胎盤組織結(jié)構(gòu)與對(duì)照組比較無明顯變化。大、中、小劑量葉酸組大鼠胎盤組織中Bcl-2的陽(yáng)性表達(dá)較對(duì)照組均有增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 結(jié)論 給予受孕大鼠灌服不同劑量葉酸，可增強(qiáng)胎鼠胎盤組織中凋亡抑制基因Bcl-2的表達(dá)，進(jìn)而可能抑制細(xì)胞凋亡，維持胎盤正常發(fā)育。
獲獎(jiǎng)情況
- 2011年獲得承德醫(yī)學(xué)院大學(xué)生課外學(xué)術(shù)競(jìng)賽一等獎(jiǎng)
鑒定結(jié)果
- 情況屬實(shí),學(xué)生獨(dú)立完成
參考文獻(xiàn)
- 葉酸對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)畸形的預(yù)防作用及機(jī)制研究廣泛開展，但關(guān)于胎盤細(xì)胞中Bcl-2表達(dá)作用的研究未見報(bào)道。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)用免疫組化技術(shù)顯示Bcl-2陽(yáng)性細(xì)胞，具有特異性強(qiáng)、敏感度高的特點(diǎn)。 [1]農(nóng)正祥，陳真燕 2種葉酸檢測(cè)與妊中期孕婦中關(guān)系的分析[J]中外醫(yī)療 2010.No.4 58-60 [2]張淑敏 葉酸與妊娠 [J]繼續(xù)醫(yī)學(xué)教育2006，Vol.20.No.34:62 [3].李東志 林其德 細(xì)胞凋亡與胎盤 [J]免疫學(xué)雜志 1999年2期15卷 [4]Stephen C , Smit h P , Baker N. Placental apoptosis is increased in post - term pregnancies. British [J] Obstet rics Gynecology , 1999 , 106(8) :861 – 862.
同類課題研究水平概述
- 葉酸作為預(yù)防出生缺陷的藥物逐漸成為研究熱點(diǎn)。以往臨床主要使用葉酸治療貧血，自20世紀(jì)90年代以來，國(guó)內(nèi)外主要將葉酸作為預(yù)防神經(jīng)管畸形、先天性心臟病等出生缺陷的首選藥物。文獻(xiàn)報(bào)道，孕早期補(bǔ)充葉酸可使神經(jīng)管畸形的發(fā)病率降低50%～70%，先天性心臟病發(fā)病率降低35.5%。關(guān)于葉酸對(duì)胎盤細(xì)胞發(fā)生影響的研究發(fā)現(xiàn)，葉酸的體內(nèi)活性形式四氫葉酸是一碳單位轉(zhuǎn)移酶的輔酶，主要參與胎盤細(xì)胞DNA和RNA的合成，與其生長(zhǎng)、分化、增殖等生物活動(dòng)密切相關(guān)。B cl-2 是1984 年由Tsujimoto等從14 號(hào)與18 號(hào)染色體易位的濾泡性淋巴瘤中分離出的一種原癌基因。已知B cl-2 可控制核內(nèi)外物質(zhì)的運(yùn)輸、抑制Ca2+ 的釋放或阻斷細(xì)胞內(nèi)過氧化物的堆積而抑制細(xì)胞的凋亡。因此近年來Bcl-2作為一項(xiàng)評(píng)估細(xì)胞凋亡的指標(biāo)廣泛用于組織細(xì)胞凋亡的觀察。胚胎細(xì)胞Bcl-2的表達(dá)對(duì)細(xì)胞增殖與器官發(fā)生、器官功能的建立以及干細(xì)胞的分化發(fā)育密切相關(guān)。 Kim YI等研究發(fā)現(xiàn)葉酸預(yù)防消化道腫瘤發(fā)生的機(jī)制為維持正常的DNA甲基化狀態(tài)以及DNA前體的穩(wěn)定，葉酸水平降低可致DNA不穩(wěn)定和鏈斷裂，但其是否在胎盤等增殖快的細(xì)胞有類似作用尚無明確報(bào)道。2008年有文獻(xiàn)報(bào)道，孕晚期孕婦血液葉酸清除率較正常人高100% 。由于孕婦對(duì)葉酸的攝入、排泄、利用增加,極易出現(xiàn)葉酸缺乏, 葉酸的代謝異?？芍苯訉?dǎo)致胎盤的發(fā)育障礙，從而影響胎兒組織分化、生長(zhǎng)發(fā)育。有人提出葉酸缺乏可通過降低DNA甲基化水平來干擾胚胎代謝和發(fā)育的假設(shè)。已有實(shí)驗(yàn)證明葉酸缺乏孕鼠子代腦組織DNA甲基化水平降低。而有關(guān)葉酸與Bcl-2表達(dá)的關(guān)系目前國(guó)內(nèi)外尚無報(bào)道。 本實(shí)驗(yàn)首次探討了葉酸對(duì)SD大鼠胎盤Bcl-2表達(dá)的影響，為臨床服用葉酸的時(shí)間及安全性提供參考，也為預(yù)防流產(chǎn)、早產(chǎn)等妊娠相關(guān)疾病提供新思路。
