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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 承德漢族人群大腸癌組織中亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T多態(tài)性與P170糖蛋白表達(dá)的相關(guān)性研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 本研究探討MTHFR基因多態(tài)性與P170糖蛋白在大腸癌中表達(dá)的相關(guān)性。采集承德漢族55例大腸癌患者標(biāo)本，采用PCR-RFLP技術(shù)檢測大腸癌組織中MTHFR基因C677T的基因型、同時(shí)用免疫組化方法檢測P170糖蛋白在大腸癌中的表達(dá)情況，最后 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，得出結(jié)論：大腸癌組織中P170糖蛋白的表達(dá)與MTHFR基因677T/T基因型負(fù)相關(guān)，可能成為大腸癌化療敏感性的有效指標(biāo)。
- 詳細(xì)介紹：
- 目的：研究亞甲基四氫葉酸還原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因多態(tài)性與多藥耐藥基因蛋白（P170糖蛋白）在大腸癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。 背景： 大腸癌為結(jié)腸癌和直腸癌的總稱，是我國常見的消化道惡性腫瘤之一，死亡率較高且呈逐年上升趨勢。研究證實(shí)，P170糖蛋白是造成大腸癌化療失敗的主要原因之一。目前已證明，MDR1基因及其表達(dá)產(chǎn)物P170糖蛋白過度表達(dá)所介導(dǎo)的對抗癌藥物的多藥耐藥性是影響化療敏感性的重要因素。流行病學(xué)和試驗(yàn)研究提示葉酸缺乏及葉酸代謝異常和結(jié)直腸腫瘤發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)升高有關(guān)，亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)是調(diào)節(jié)葉酸代謝的關(guān)鍵酶,MTHFR C677T基因多態(tài)及飲酒影響葉酸代謝,從而影響結(jié)直腸腫瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，與大腸癌的關(guān)系密切。 方法：收集2009.06--2009.12在承德某醫(yī)院住院并行手術(shù)的55例漢族患者的大腸癌組織標(biāo)本, 用聚合酶鏈反應(yīng)-限制性片段長度多態(tài)性技術(shù)(PCR-RFLP)檢測大腸癌組織中MTHFR基因C677T的基因型；同時(shí)用免疫組化方法檢測P170糖蛋白在不同分化程度大腸癌組織中的表達(dá)情況。 結(jié)果： 55例大腸癌組織中，高分化、中分化、低分化中P170糖蛋白的陽性表達(dá)率分別為44.4%(5/9)、52.2%(19/40)、33.3%(4/6)。P170在大腸癌組織中的表達(dá)與大腸癌的分化程度無相關(guān)性(X2=0.86,P>0.05),其中MTHFR C677T T/T基因型的大腸癌組織中P170糖蛋白陽性表達(dá)率顯著低于C/T基因型（X2=7.464，P<0.05）；又顯著低于C/C基因型（X2=6.875，P<0.05）；C/T基因型和C/C基因型之間大腸癌組織中P170糖蛋白陽性表達(dá)率沒有顯著性差異（X2=0.016，P>0.05）。 結(jié)論：MTHFR基因C677T T/T基因型的大腸癌組織中P170糖蛋白的表達(dá)明顯低于C/T型和C/C型， MTHFR基因C677T T/T基因型可能成為大腸癌化療敏感性的有效指標(biāo)，為指導(dǎo)臨床醫(yī)生進(jìn)行個(gè)體化化療提供理論依據(jù)。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：研究MTHFR基因多態(tài)性與P170糖蛋白在大腸癌中表達(dá)的相關(guān)性。 思路：P170糖蛋白為多藥耐藥基因的產(chǎn)物，其表達(dá)與大腸癌細(xì)胞對化療藥的耐藥性呈正相關(guān)。P-gp170表達(dá)陰性則患者對化療藥物敏感，可進(jìn)一步預(yù)測大腸癌的化療療效。P-gp170表達(dá)程度的不同可能與MTHFR基因多態(tài)性有關(guān)。探討MTHFR三種基因型中哪一種大腸癌細(xì)胞P-gp170表達(dá)明顯降低是本研究要解決的關(guān)鍵問題。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 科學(xué)性：標(biāo)本來自承德某醫(yī)院，均經(jīng)病理科鑒定。所有實(shí)驗(yàn)均在我院基礎(chǔ)所組化室和分子生物學(xué)室完成。 先進(jìn)性：MTHFR是影響大腸癌化療預(yù)后的關(guān)鍵酶，近年來相關(guān)研究越來越多，但關(guān)于MTHFR基因多態(tài)性與大腸癌化療敏感性的研究國內(nèi)尚未見報(bào)道。 獨(dú)特性：國外相關(guān)研究所用材料多為外周血白細(xì)胞中提取的DNA，而本實(shí)驗(yàn)為癌細(xì)胞中提取的DNA，并且本實(shí)驗(yàn)把MTHFR基因多態(tài)性與P糖蛋白的表達(dá)結(jié)合起來。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 本研究結(jié)果顯示P170糖蛋白的表達(dá)與MTHFR基因多態(tài)性有關(guān)，MTHFR C677T T/T型患者大腸癌組織P170糖蛋白表達(dá)明顯低于C/C、C/T型，檢測MTHFR C677T基因型可能成為預(yù)測化療效果的重要參考指標(biāo)，為臨床醫(yī)生進(jìn)行個(gè)體化化療提供理論依據(jù)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的：研究亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)基因多態(tài)性與P170糖蛋白在大腸癌組織中表達(dá)的相關(guān)性。 方法：收集2009.06--2009.12在承德某醫(yī)院住院并行手術(shù)的55例漢族患者的大腸癌組織標(biāo)本, 用PCR-RFLP檢測大腸癌組織中MTHFR基因C677T的基因型；同時(shí)用免疫組化方法檢測P170糖蛋白在不同分化程度大腸癌組織中的表達(dá)情況。 結(jié)果： 55例大腸癌組織中，高分化、中分化、低分化中P170糖蛋白的陽性表達(dá)率分別為44.4%(5/9)、52.2%(19/40)、33.3%(4/6)。P170糖蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)與大腸癌的分化程度無相關(guān)性(X2=0.86,P>0.05),其中MTHFR C677T T/T基因型P170糖蛋白陽性表達(dá)率顯著低于C/T基因型（X2=7.464，P<0.05）；又顯著低于C/C基因型（X2=6.875，P<0.05）；C/T基因型和C/C基因型之間無顯著性差異（X2=0.016，P>0.05）。 結(jié)論：大腸癌組織中P170糖蛋白的表達(dá)與MTHFR基因677T/T基因型負(fù)相關(guān)，可為指導(dǎo)臨床醫(yī)生進(jìn)行個(gè)體化化療提供理論依據(jù)。
獲獎情況
- 2011年4月獲我院大學(xué)生課外學(xué)術(shù)作品競賽一等獎
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- 本研究主要技術(shù)： 1、用免疫組化方法檢測了大腸癌組織的多藥耐藥基因的表達(dá)； 2、用PCR-RFLP檢測大腸癌組織亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性； 3、用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法檢測多藥耐藥基因的表達(dá)與亞甲基四氫葉酸還原酶基因多態(tài)性之間的相關(guān)性。 參考文獻(xiàn)： 1 Ferrero JM,Etienne MC, Formento JL,et al.Application of anoriginal RT-PCR-ELISA multiplex assay for MDRI and MRP,a long with p53 determination in node-positive breast cancer panems.Br ［J］Cancer,2000,82:171-177 2 徐美東，姚禮慶，顧大鏞，等.DCC基因在大腸癌中的表達(dá)及其臨床意義［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志.2001，11（9）:23-25. 3 高長明，吳建中，丁建華等 亞甲基四氫葉酸還原酶基因C677T多態(tài)性與胃癌易感性的關(guān)系［J］.中華流行病學(xué)雜志,2002;23:289-292. 4 Yuan SQ, Zhou ZW, Liang YZ, et al. Correlation of chemosensitivity tested using histoculture drug response as say to expression of multidrug resestence genes and proteins in colorectal cancer tissues [J]. Chin J Cancer, 2009,28(9):932-938 5 陳麗、李靜等.大腸癌基因多態(tài)性的研究進(jìn)展［J］.遼寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)2007 10.28(5).
同類課題研究水平概述
- 大腸癌是我國常見的消化道惡性腫瘤，且發(fā)病率呈逐年增高趨勢。目前大腸癌治療多采用手術(shù)與化療相結(jié)合的綜合治療方法，但化療效果不盡相同。 近年來多數(shù)研究證實(shí)，多藥耐藥現(xiàn)象（MDR）是造成化療失敗和復(fù)發(fā)的主要原因，多藥耐藥蛋白（P－gp）成為臨床常用的檢測惡性腫瘤的指標(biāo)。P－gp是最早發(fā)現(xiàn)的經(jīng)典的MDR跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，是MDR的基因表達(dá)產(chǎn)物，因其分子量為170KD，故又稱P170，完整的P170糖蛋白既可與抗癌藥結(jié)合，又可與ATP結(jié)合，通過ATP提供能量發(fā)生能量依賴變構(gòu)，通過疏水區(qū)形成的通道，主動將抗腫瘤藥物泵出細(xì)胞外從而降低細(xì)胞毒性，并使細(xì)胞內(nèi)化療藥物蓄積下降，導(dǎo)致MDR效應(yīng)。Yuan[1]等應(yīng)用組織培養(yǎng)藥敏法（HDRA）在一項(xiàng)針對MDR基因及蛋白表達(dá)與大腸癌化療敏感性關(guān)系的研究中證明，MDR蛋白的表達(dá)在一定程度上和化療敏感性密切相關(guān)，可以作為選擇有效個(gè)體化化療方案的因素。因此可以看出，P170糖蛋白的表達(dá)程度和大腸癌細(xì)胞對化療藥物的耐藥性呈正相關(guān)；因此P170糖蛋白可以預(yù)測大腸癌的化療療效。 另外也有研究證實(shí)，亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）是影響大腸癌以5－Fu為基礎(chǔ)的化療方案的關(guān)鍵酶，近年來關(guān)于基因多態(tài)性與大腸癌化療敏感性的研究越來越多，然而關(guān)于MTHFR基因的多態(tài)性與大腸癌化療敏感性的研究國內(nèi)尚未見報(bào)道。Etienne[2]等對98例大腸癌組織中的MTHFR基因型進(jìn)行分析，MTHFR C677T T/T基因型患者對5－Fu為基礎(chǔ)化療方案的敏感性顯著高于C/C、C/T基因型患者；而Afzal S等研究表明，MTHFR C677T多態(tài)性很可能不能用于預(yù)測手術(shù)后大腸癌患者以5－Fu為基礎(chǔ)化療方案的化療敏感性，但MTHFR C677T C/T基因型表現(xiàn)出的化療毒副作用低；國內(nèi)的高長明等的研究表明，MTHFR C677T基因型多態(tài)性對于預(yù)測以5－Fu為基礎(chǔ)化療方案治療晚期消化道癌的療效和毒性具有較好的臨床意義；Cohen 等分析了43例晚期大腸癌患者M(jìn)THFR基因型多態(tài)性與5－Fu為基礎(chǔ)化療方案療效的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)T/T基因型獲得的有效率達(dá)100％，而C/C和C/T基因型患者的有效率分別為47％和67％，可能是因?yàn)槔龜?shù)較少的緣故，這種差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
