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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 干酪乳桿菌HW1菌種鑒定及其ACE抑制肽的研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 采用16S rDNA序列比對(duì)分析方法對(duì)分離獲得的乳酸菌進(jìn)行菌種鑒定，并利用所獲得的干酪乳桿菌對(duì)牛奶進(jìn)行發(fā)酵，進(jìn)一步通過FPLC等方法對(duì)酸奶上清中的ACE抑制肽進(jìn)行分離純化及活性分析。 本實(shí)驗(yàn)將獲得高產(chǎn)ACE抑制肽的乳酸菌新菌株，篩選獲得新的ACE抑制肽，并初步建立ACE抑制肽的生產(chǎn)工藝，為相關(guān)功能食品及藥品的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
- 詳細(xì)介紹：
- 干酪乳桿菌牛奶發(fā)酵物具有良好的抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angioensin-I Converting Enzyme，ACE)的活性，對(duì)高血壓有很好的治療作用。在“三高”現(xiàn)象越來越嚴(yán)重的今天，并且隨著人們健康意識(shí)的逐步提升，這種具有抗高血壓活性的酸乳必將具有廣闊的發(fā)展前景。 為了探明酸乳ACE抑制活性的本質(zhì)及其降血壓作用機(jī)制，本研究首先通過PCR技術(shù)對(duì)前期研究所篩選獲得的一株命名為HW1的乳桿菌16S rDNA序列進(jìn)行了擴(kuò)增，將所測(cè)得的序列在GenB-ank 中進(jìn)行BLAST比對(duì)分析( ，結(jié)果顯示：HW1乳桿菌株的16S rDNA序列與干酪乳桿菌同源性最高，達(dá)到98%，因此將HW1鑒定為一株新的干酪乳桿菌菌株。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)該菌株在發(fā)酵牛奶過程中能夠產(chǎn)生顯著抑制ACE活性的蛋白質(zhì)/多肽類物質(zhì)。應(yīng)用從大鼠肺中提取的ACE和ACE活性檢測(cè)試劑盒，來對(duì)其ACE抑制活性進(jìn)行了分析。利用膜過濾和離子交換層析方法對(duì)其進(jìn)行初步的分離純化，結(jié)果表明：干酪乳桿菌牛奶發(fā)酵產(chǎn)物中確實(shí)存在能夠顯著抑制ACE活性的組分。我們首先從干酪乳桿菌HW1牛奶發(fā)酵產(chǎn)物中得到了9種活性組分，其中有兩個(gè)組分ACE抑制活性最強(qiáng)，達(dá)60.55％和71.71％，分別將其命名為ACEI- 2和ACEI- 5。進(jìn)一步通過分離范圍<1.5kD的介質(zhì)葡聚糖Sephadex G-15和中高壓蛋白質(zhì)液相系統(tǒng)（FPLC）對(duì)ACEI- 2和ACEI- 5 進(jìn)行二次分離，獲得了ACE抑制率>50%的七個(gè)組分：ACEI-2-1，ACEI-2-2，ACEI-2-3，ACEI-5-1，ACEI-5-2，ACEI-5-3，ACEI-5-4，并且其ACE抑制率均高于50％。本研究為干酪乳桿菌HW1及其降血壓功能的研究奠定了一定的工作基礎(chǔ)，同時(shí)對(duì)相關(guān)工作的進(jìn)一步深入開展以及對(duì)于抗高血壓保健食品、藥品的研究開發(fā)也具有非常重要的意義。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本實(shí)驗(yàn)將獲得高產(chǎn)ACE抑制肽的乳酸菌新菌株，篩選獲得新的ACE抑制肽，并初步建立ACE抑制肽的生產(chǎn)工藝。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 采用16S rDNA序列比對(duì)分析方法對(duì)分離獲得的乳酸菌進(jìn)行菌種鑒定，并利用所獲得的干酪乳桿菌對(duì)牛奶進(jìn)行發(fā)酵，進(jìn)一步通過FPLC等方法對(duì)酸奶上清中的ACE抑制肽進(jìn)行分離純化及活性分析。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 本實(shí)驗(yàn)嘗試一種簡(jiǎn)便、價(jià)廉的ACEI分離提取方法，為進(jìn)一步研究和開發(fā)降血壓的乳酸菌發(fā)酵制品以及為相關(guān)功能食品及藥品的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 無
獲獎(jiǎng)情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 目前，我國(guó)國(guó)內(nèi)雖然對(duì)益生菌有了一定的運(yùn)用，例如在畜牧飼養(yǎng)中的添加，目的是改善腸道微生物環(huán)境，抑制腐敗菌，提高動(dòng)物的抗應(yīng)激能力等等。另外，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，以至在奶制品中也有添加。但是，實(shí)質(zhì)上運(yùn)用益生菌降血壓在國(guó)內(nèi)還未見報(bào)道和相應(yīng)產(chǎn)品問世，尚屬空白。芬蘭的Valio有限公司和日本的卡爾皮斯株式會(huì)社分別推出了具有輔助抗高血壓作用的乳酸菌發(fā)酵乳制品，日本Calpis公司也成功上市降血壓酸奶飲料，而我國(guó)還沒有類似的產(chǎn)品。面對(duì)我國(guó)高血壓患者數(shù)字日益升高，在國(guó)內(nèi)研究開發(fā)一種具降壓肽活性酸奶的要求也日益迫切，以此使高血壓患者可以通過正常不經(jīng)意飲食間達(dá)到降血壓目的，并且減少對(duì)藥物的依賴性。伴隨著人們生活水平的不斷提高以及對(duì)健康問題的日益重視，相信利用益生菌制造出的具降壓肽活性酸奶以及相關(guān)產(chǎn)品，在國(guó)內(nèi)必然會(huì)有廣闊的前景。因此，開發(fā)擁有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的具有抗高血壓作用的乳酸菌及發(fā)酵乳制品將具有十分重要的研究意義和應(yīng)用價(jià)值。
