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基本信息
- 項目名稱：
- 干酪乳桿菌HW1菌種鑒定及其ACE抑制肽的研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 采用16S rDNA序列比對分析方法對分離獲得的乳酸菌進(jìn)行菌種鑒定，并利用所獲得的干酪乳桿菌對牛奶進(jìn)行發(fā)酵，進(jìn)一步通過FPLC等方法對酸奶上清中的ACE抑制肽進(jìn)行分離純化及活性分析。 本實驗將獲得高產(chǎn)ACE抑制肽的乳酸菌新菌株，篩選獲得新的ACE抑制肽，并初步建立ACE抑制肽的生產(chǎn)工藝，為相關(guān)功能食品及藥品的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
- 詳細(xì)介紹：
- 干酪乳桿菌牛奶發(fā)酵物具有良好的抑制血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(Angioensin-I Converting Enzyme，ACE)的活性，對高血壓有很好的治療作用。在“三高”現(xiàn)象越來越嚴(yán)重的今天，并且隨著人們健康意識的逐步提升，這種具有抗高血壓活性的酸乳必將具有廣闊的發(fā)展前景。 為了探明酸乳ACE抑制活性的本質(zhì)及其降血壓作用機制，本研究首先通過PCR技術(shù)對前期研究所篩選獲得的一株命名為HW1的乳桿菌16S rDNA序列進(jìn)行了擴(kuò)增，將所測得的序列在GenB-ank 中進(jìn)行BLAST比對分析( ，結(jié)果顯示：HW1乳桿菌株的16S rDNA序列與干酪乳桿菌同源性最高，達(dá)到98%，因此將HW1鑒定為一株新的干酪乳桿菌菌株。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)該菌株在發(fā)酵牛奶過程中能夠產(chǎn)生顯著抑制ACE活性的蛋白質(zhì)/多肽類物質(zhì)。應(yīng)用從大鼠肺中提取的ACE和ACE活性檢測試劑盒，來對其ACE抑制活性進(jìn)行了分析。利用膜過濾和離子交換層析方法對其進(jìn)行初步的分離純化，結(jié)果表明：干酪乳桿菌牛奶發(fā)酵產(chǎn)物中確實存在能夠顯著抑制ACE活性的組分。我們首先從干酪乳桿菌HW1牛奶發(fā)酵產(chǎn)物中得到了9種活性組分，其中有兩個組分ACE抑制活性最強，達(dá)60.55％和71.71％，分別將其命名為ACEI- 2和ACEI- 5。進(jìn)一步通過分離范圍<1.5kD的介質(zhì)葡聚糖Sephadex G-15和中高壓蛋白質(zhì)液相系統(tǒng)（FPLC）對ACEI- 2和ACEI- 5 進(jìn)行二次分離，獲得了ACE抑制率>50%的七個組分：ACEI-2-1，ACEI-2-2，ACEI-2-3，ACEI-5-1，ACEI-5-2，ACEI-5-3，ACEI-5-4，并且其ACE抑制率均高于50％。本研究為干酪乳桿菌HW1及其降血壓功能的研究奠定了一定的工作基礎(chǔ)，同時對相關(guān)工作的進(jìn)一步深入開展以及對于抗高血壓保健食品、藥品的研究開發(fā)也具有非常重要的意義。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本實驗將獲得高產(chǎn)ACE抑制肽的乳酸菌新菌株，篩選獲得新的ACE抑制肽，并初步建立ACE抑制肽的生產(chǎn)工藝。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨特之處
- 采用16S rDNA序列比對分析方法對分離獲得的乳酸菌進(jìn)行菌種鑒定，并利用所獲得的干酪乳桿菌對牛奶進(jìn)行發(fā)酵，進(jìn)一步通過FPLC等方法對酸奶上清中的ACE抑制肽進(jìn)行分離純化及活性分析。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 本實驗嘗試一種簡便、價廉的ACEI分離提取方法，為進(jìn)一步研究和開發(fā)降血壓的乳酸菌發(fā)酵制品以及為相關(guān)功能食品及藥品的開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 無
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
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同類課題研究水平概述
- 目前，我國國內(nèi)雖然對益生菌有了一定的運用，例如在畜牧飼養(yǎng)中的添加，目的是改善腸道微生物環(huán)境，抑制腐敗菌，提高動物的抗應(yīng)激能力等等。另外，在水產(chǎn)養(yǎng)殖中，以至在奶制品中也有添加。但是，實質(zhì)上運用益生菌降血壓在國內(nèi)還未見報道和相應(yīng)產(chǎn)品問世，尚屬空白。芬蘭的Valio有限公司和日本的卡爾皮斯株式會社分別推出了具有輔助抗高血壓作用的乳酸菌發(fā)酵乳制品，日本Calpis公司也成功上市降血壓酸奶飲料，而我國還沒有類似的產(chǎn)品。面對我國高血壓患者數(shù)字日益升高，在國內(nèi)研究開發(fā)一種具降壓肽活性酸奶的要求也日益迫切，以此使高血壓患者可以通過正常不經(jīng)意飲食間達(dá)到降血壓目的，并且減少對藥物的依賴性。伴隨著人們生活水平的不斷提高以及對健康問題的日益重視，相信利用益生菌制造出的具降壓肽活性酸奶以及相關(guān)產(chǎn)品，在國內(nèi)必然會有廣闊的前景。因此，開發(fā)擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的具有抗高血壓作用的乳酸菌及發(fā)酵乳制品將具有十分重要的研究意義和應(yīng)用價值。
