基本信息
- 項目名稱：
- 川芎嗪對人肝癌耐藥細胞BEL-7402/ADM中P-gp表達的影響
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 腫瘤多藥耐藥（MDR）成為腫瘤臨床治療的一大障礙。MDR的機制復雜，目前研究的熱點是P-gp介導的MDR。P-gp是一種分子量為170KD的跨膜糖蛋白，它作為藥泵在ATP供能的條件下將化療藥物快速蹦出細胞外而產生耐藥。川芎嗪（TMP）具有高效低毒的特性，且為鈣通道阻滯劑。課題采用TMP作為逆轉劑，采用流式細胞術和免疫組化檢測TMP對人肝癌耐藥細胞BEL-7402/ADM中P-gp表達的影響。
- 詳細介紹：
- 目的：觀察川芎嗪（TMP）對人肝癌耐藥細胞BEL-7402/ADM中P—糖蛋白 ( P-glycoprotein，P-gp)表達的影響，研究TMP對人肝癌多藥耐藥細胞BEL-7402/ADM的逆轉機制。方法：將人肝癌細胞耐藥株BEL-7402/ADM及其親本細胞BEL-7402分為：親本組、耐藥組、逆轉組（耐藥+TMP）、陽性對照組（耐藥+維拉帕米）、二抗陰性對照組，用免疫組化SABC法和流式細胞術對照觀察TMP對BEL-7402/ADM中P-gp表達的影響。結果：流式細胞術結果顯示耐藥組顯著高于親本組（P<0.01)；耐藥+TMP和耐藥+維拉帕米（VP）組均顯著低于耐藥組和親本組（P<0.01)。免疫組化SABC法顯示耐藥組P-gp陽性表達率顯著高于親本組（P<0.01)；TMP組，VP組的P-gp陽性表達率顯著低于耐藥組（P<0.01)。TMP組與VP組比較無顯著性差異(P>0.05)。結論：TMP能顯著降低人肝癌多藥耐藥細胞BEL-7402/ADM細胞表面P-gp的表達，增加了阿霉素等化療藥物對BEL-7402/ADM的細胞毒性作用，從而增加對腫瘤細胞的抑制率，提高化療療效。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：觀察川芎嗪對人肝癌耐藥細胞BEL-7402/ADM中P-gp表達的影響 思路：將人肝癌細胞耐藥株BEL-7402/ADM及其親本細胞BEL-7402分為：親本組、耐藥組、逆轉組（耐藥+TMP）、陽性對照組（耐藥+維拉帕米）、二抗陰性對照組，用免疫組化SABC法和流式細胞術對照觀察TMP對BEL-7402/ADM中P-gp表達的影響。
科學性、先進性及獨特之處
- 本課題采用流式細胞術、免疫組化法檢測TMP對人肝癌耐藥細胞BEL-7402/ ADM中P-gp表達的影響尚未檢索到相同報道。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 對中藥有效成分逆轉腫瘤細胞MDR（ Multidrug resistance，MDR）提供了實驗模型；為腫瘤的臨床治療提供了實驗依據(jù)。
學術論文摘要
- 目的：觀察川芎嗪（TMP）對人肝癌耐藥細胞BEL-7402/ADM中P—糖蛋白 ( P-glycoprotein，P-gp)表達的影響，研究TMP對人肝癌多藥耐藥細胞BEL-7402/ADM的逆轉機制。方法：將人肝癌細胞耐藥株BEL-7402/ADM及其親本細胞BEL-7402分為：親本組、耐藥組、逆轉組（耐藥+TMP）、陽性對照組（耐藥+維拉帕米）、二抗陰性對照組，用免疫組化SABC法和流式細胞術對照觀察TMP對BEL-7402/ADM中P-gp表達的影響。結果：流式細胞術結果顯示耐藥組顯著高于親本組（P<0.01)；耐藥+TMP和耐藥+維拉帕米（VP）組均顯著低于耐藥組和親本組（P<0.01)。免疫組化SABC法顯示耐藥組P-gp陽性表達率顯著高于親本組（P<0.01)；TMP組，VP組的P-gp陽性表達率顯著低于耐藥組（P<0.01)。TMP組與VP組比較無顯著性差異(P>0.05)。結論：TMP能顯著降低人肝癌多藥耐藥細胞BEL-7402/ADM細胞表面P-gp的表達，增加了阿霉素等化療藥物對BEL-7402/ADM的細胞毒性作用，從而增加對腫瘤細胞的抑制率，提高化療療效。
獲獎情況
- 2010年12月發(fā)表于《廣東藥學院學報》（2010,26（6）：635-638.）； 獲得湖北醫(yī)藥學院本科生科研設計大賽二等獎。
鑒定結果
- 暫未鑒定
參考文獻
- [1]. Xuan-bin WANG, Jing XU, Shan-shan WANG, Ying LIU, Ming LIU, Hong-liang LI.ABCB and ABCC superfamily members in resistant hepatocellular carcinoma[C].15th World Congress on Advances in Oncology and 13th International Symposium on Molecular Medicine 7-9 October 2010, Hotel Poseidon Resort, Loutraki, Greece. International Journal of Molecular Medicine.2010,26suppl:s12. [2].陳永剛，汪選斌.川芎嗪逆轉腫瘤多藥耐藥的研究進展[J].中國藥房，2009，20（21）：1675-1676. [3]. 汪選斌，王姍姍，劉明，桑明.P-糖蛋白介導的腫瘤多藥耐藥與逆轉[J].中國藥師，2010,13（12）：1733-1735. [4].劉英,李瑞生,王珊珊,等.川芎嗪對人肝癌耐藥細胞Bel-7402/DXR多柔比星蓄積的影響[J].醫(yī)藥導報.2009，28(5):565-567； [5].WANG Xuan-bin,WANG Shan-shan,ZHANG Qiu-fang, et al. Inhibition of Tetramethylpyrazine on P-gp，MRP2，MRP3 and MRP5 in Multidrug Resistant Human Hepatocellular Carcinoma Cells[J].Oncology Reports.2010，23（1）：211-215.
同類課題研究水平概述
- 腫瘤多藥耐藥(MDR) ，指癌細胞發(fā)生對許多結構不相關的化療藥交叉抵抗的現(xiàn)象，它是有效化療的主要障礙之一。腫瘤多藥耐藥的機制復雜，有P-糖蛋白( P-glycoprotein， P-gp)表達增高、多藥耐藥相關蛋白(multidrug resistance-associated protein， MRP) 表達增高、肺耐藥相關蛋白( lung resistance-associated protein， LRP) 表達增高、GSH，GST表達增多、TOPOⅠ、Ⅱ減少、腫瘤細胞凋亡抑制等原因[1] 。 P-糖蛋白( P-glycoprotein， P-gp)是一種分子量為170KD的跨膜糖蛋白，它在人體里主要由MDR1所編碼，在耐藥細胞中MDR1基因擴增導致P-gp過量表達，由ATP提供能量將多種化療藥物快速泵出細胞外而使抗腫瘤藥物的細胞毒作用降低出現(xiàn)耐藥[1] 。其表達水平和細胞膜的通透性、細胞內藥物濃度以及耐藥程度有關。 目前用于臨床的逆轉劑主要有環(huán)孢素A (CSA) 和異博定(VRP) 等，但其毒性相對較大，患者難以耐受。川芎嗪(Tetremethylpyrazine，TMP) 作為中藥川芎的有效成分之一，屬弱的鈣拮抗劑，具有鈣通道阻滯活性，毒副作用小，價格低廉的特點。在臨床上主要用于心血管方面的治療，魏志霞報道了川芎嗪對肝癌多藥耐藥株SMMC-27721/ ADM的逆轉作用，TMP對人肝癌耐藥細胞BEL-7402/ ADM尚無報道[3]。 國內外研究現(xiàn)狀分析 近年來，隨著抗腫瘤藥物作用機理的深入研究，新的抗腫瘤藥物不斷出現(xiàn)，治療方法的不斷改進，抗腫瘤藥物的臨床治療水平亦不斷提高。如鈣拮抗劑、免疫抑制劑、谷胱甘肽耗竭劑等。由于這些藥物的毒副作用較大，至今仍未應用于臨床。但目前，臨床腫瘤治療面臨的最主要的難題仍是MDR，因此尋找一種高效低毒糾正多藥耐藥（MDR)的藥物及方法應用于臨床顯得尤為關鍵。國內在糾正MDR方面，曾做了大量的工作，建立了MDR模型（如KB/VCR，EAC/ADR(Fu)，MCF-7/ADR)。利用這些模型篩選出了一些逆轉MDR的藥物（如川芎嗪，漢防己甲素，黃連素）。但利用流式細胞術和免疫組化法檢測川芎嗪對BEL-7402/ADM中P-gp表達的影響，未檢索到國內外相同報道[4]。
