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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 提取基因組DNA的優(yōu)化方法
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 針對(duì)傳統(tǒng)基因組DNA提取方法存在的問(wèn)題，本組成員提出該優(yōu)化方法，此方法操作簡(jiǎn)單、節(jié)省時(shí)間、無(wú)毒安全且純度較高，值得在今后的分子生物學(xué)領(lǐng)域廣泛推廣、運(yùn)用。
- 詳細(xì)介紹：
- 以大瀧六線魚(yú)（Hexagrammos otakii Jordan et Starks）的大側(cè)肌肌肉為材料，分別采用傳統(tǒng)的苯酚-氯仿法和優(yōu)化的基因組DNA提取方法提取大瀧六線魚(yú)基因組DNA。對(duì)兩種方法提取的結(jié)果進(jìn)行了紫外分光光度和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。結(jié)果顯示，本優(yōu)化方法提取的魚(yú)類基因組DNA的D260nm/D280nm比值為1.66～1.68，傳統(tǒng)方法提取的DNA的D260nm/D280nm比值為1.71～1.90，均在正常范圍之內(nèi)。瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果顯示兩種方法所提取的DNA的濃度沒(méi)有顯著差異。所提取的DNA可以滿足相關(guān)分子生物學(xué)研究的需要。而且優(yōu)化后的方法操作更為簡(jiǎn)潔，操作過(guò)程中避免了實(shí)驗(yàn)人員與毒性較大的苯酚、氯仿的接觸。因此，該基因組DNA提取方法效果較好，具有一定的應(yīng)用價(jià)值。
作品專業(yè)信息
撰寫(xiě)目的和基本思路
- 研究魚(yú)類基因組DNA提取的優(yōu)化方法在分子生物學(xué)基礎(chǔ)上對(duì)傳統(tǒng)基因組DNA提取方法的優(yōu)化
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 實(shí)驗(yàn)在專業(yè)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，采取對(duì)比的科學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，確保了實(shí)驗(yàn)的規(guī)范性和數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性；本實(shí)驗(yàn)避免了與毒性較大的苯酚、氯仿的接觸，實(shí)驗(yàn)時(shí)間較短，操作簡(jiǎn)便；值得在分子生物學(xué)領(lǐng)域廣泛推廣。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 本優(yōu)化方法更有利于基因組DNA的提取，實(shí)驗(yàn)過(guò)程簡(jiǎn)便、安全，更有利于實(shí)驗(yàn)員實(shí)際操作，為分子生物學(xué)的發(fā)展奠定基礎(chǔ)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 以大瀧六線魚(yú)（Hexagrammos otakii Jordan et Starks）的大側(cè)肌肌肉為材料，分別采用傳統(tǒng)的苯酚-氯仿法和優(yōu)化基因組DNA提取方法提取大瀧六線魚(yú)基因組DNA。對(duì)兩種方法提取的結(jié)果進(jìn)行了紫外分光光度和瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)。結(jié)果顯示，本優(yōu)化方法提取的魚(yú)類基因組DNA的D260nm/D280nm比值為1.66～1.68，傳統(tǒng)方法提取的DNA的D260nm/D280nm比值為1.71～1.90，均在正常范圍之內(nèi)。瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)結(jié)果顯示兩種方法所提取的DNA的濃度沒(méi)有顯著差異。所提取的DNA可以滿足相關(guān)分子生物學(xué)研究的需要。而且優(yōu)化后的方法操作更為簡(jiǎn)潔，操作過(guò)程中避免了實(shí)驗(yàn)人員與毒性較大的苯酚、氯仿的接觸。因此，該基因組DNA提取方法效果較好，具有一定的應(yīng)用價(jià)值。
獲獎(jiǎng)情況
- 大連海洋大學(xué)初評(píng)二等獎(jiǎng)
鑒定結(jié)果
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果達(dá)到了預(yù)期效果
參考文獻(xiàn)
- [1]劉 臻、魯雙慶、肖調(diào)義、陳開(kāi)鍵。鯽魚(yú)基因組DNA 提取方法的探討，水利漁業(yè)，2004，24（6）：20～22 [2]張德華、周開(kāi)亞 、孫紅英。乙醇保存的動(dòng)物標(biāo)本基因組DNA 提取方法的比較，生物學(xué)雜志，2004，21（6）:46～48 [3] 馬洪雨、姜運(yùn)良、岳永生。一種從魚(yú)類肌肉組織中提取基因組,的簡(jiǎn)易方法，生物技術(shù)通訊，2005,16（5）：531～532 [4]張銳 、孫美榕 、林洽輝、楊燕貞、曾苑玲。魚(yú)類基因組DNA提取方法的優(yōu)化及PCR擴(kuò)增，水利漁業(yè)，2006,26（4）：7～9 [5]樂(lè)小亮、章群趙爽、范鳳娟 。一種高效快速的魚(yú)類標(biāo)本基因組DNA提取方法,生物技術(shù)通報(bào)，2010，（2）：202～204 [6]張繼民、劉霜 一、趙建民 、馬兆黨、張洪亮 。帶魚(yú)(Trichiurus haumela)魚(yú)卵DNA的提取及其18SrDNA初步分析，海洋通，2009,28（6）：62～65 [7]李明云、張海琪。大黃魚(yú)高質(zhì)量基因組DNA的簡(jiǎn)便提取方法，實(shí)驗(yàn)與技術(shù)，2002,26(10）：15～17 [8]張祖興、李明云、張春丹、劉偉成、管丹冬 。大黃魚(yú)血液基因組DNA的提取及其效果，水利漁業(yè)，2006,26(3）：24～25 [9]汪立平、馬相杰、趙勇。羅非魚(yú)幼魚(yú)腸道微生物基因組DNA的提取；湖南農(nóng)業(yè)科學(xué)；2009，(10)：147～15 [10] 汪永慶、王新國(guó)、徐來(lái)祥等。一種動(dòng)物基因組DNA提取方法的改進(jìn)，動(dòng)物學(xué)雜志，2001，36(1)：27～29
同類課題研究水平概述
- 近年來(lái)我國(guó)水產(chǎn)行業(yè)發(fā)展迅速，市場(chǎng)對(duì)水產(chǎn)品的需求量越來(lái)越大，導(dǎo)致野生水生資源的匱乏；同時(shí)，對(duì)養(yǎng)殖品種的質(zhì)量要求也在不斷提高，故為了保護(hù)和開(kāi)發(fā)我國(guó)水產(chǎn)生物資源 ,了解和研究其遺傳特性, 分子生物學(xué)技術(shù)必將成為其遺傳分析和品種改良的有力工具之一, 而提取高質(zhì)量的魚(yú)基因組DNA是進(jìn)行各種分子生物學(xué)研究的基礎(chǔ)和前提。盡管當(dāng)前國(guó)內(nèi)外對(duì)基因組DNA的提取方法在不斷改進(jìn)、優(yōu)化，從試劑盒法到苯酚－氯仿提取法，所用技術(shù)不斷更新，操作也逐漸簡(jiǎn)化，提取的基因組DNA的純度也在不斷提高，而我們的優(yōu)化方法在過(guò)去傳統(tǒng)方法的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，提取的基因組DNA清晰度、完整度、純度與以往方法均無(wú)明顯差異，但我們的方法實(shí)驗(yàn)時(shí)間較短，操作簡(jiǎn)便，避免了與毒性較大的苯酚、氯仿的接觸，對(duì)于提取基因組DNA不失為一種更好的方法，但整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程仍有些許值得改進(jìn)的地方，愿后來(lái)者繼續(xù)改進(jìn)，為分子生物學(xué)的科技進(jìn)步貢獻(xiàn)力量！
