題-1_100_100.jpg)
基本信息
- 項(xiàng)目名稱(chēng)：
- 食肝源性磷脂酰乙醇胺的分離及其誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的研究
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類(lèi)：
- 生命科學(xué)
- 大類(lèi)：
- 自然科學(xué)類(lèi)學(xué)術(shù)論文
- 簡(jiǎn)介：
- 本實(shí)驗(yàn)采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)測(cè)定了在不同時(shí)間點(diǎn)PE對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果表明肝源性PE對(duì)癌細(xì)胞的增殖抑制作用可能具有組織特異性，這可能與肝臟中特殊的PE代謝路徑及其不同分子種類(lèi)有關(guān)。
- 詳細(xì)介紹：
- 采用氧化鋁柱色譜法以95%乙醇2氯仿為洗脫劑分離純化了肝源性磷脂酰乙醇胺(PE) ,并采用GF254 硅膠板薄層色譜法以氯仿2甲醇2水(65: 25: 4,體積比)為展開(kāi)劑檢測(cè)PE。結(jié)果表明,以95%乙醇2氯仿順序洗脫。氧化鋁色譜柱中的磷脂時(shí), PE與磷脂酰膽堿( PC) 可實(shí)現(xiàn)完全分離。采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)測(cè)定了在不同時(shí)間點(diǎn)25μmol/L PE對(duì)人肝癌SMMC27721細(xì)胞增殖的影響,并與子宮頸癌細(xì)胞Hela、正常人肝細(xì)胞HL7702做比較,發(fā)現(xiàn)肝源性PE對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用,且能誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡。
作品專(zhuān)業(yè)信息
撰寫(xiě)目的和基本思路
- 本實(shí)驗(yàn)研究了肝源性PE對(duì)人肝癌細(xì)胞增殖及凋亡的影響，并與子宮頸癌細(xì)胞、正常人肝細(xì)胞做比較，發(fā)現(xiàn)肝源性PE特異性抑制人肝癌細(xì)胞的增殖，并且下調(diào)抗凋亡蛋白Bcl-2及上調(diào)凋亡執(zhí)行蛋白Capase-3的表達(dá)，肝源性PE可能作為某種信號(hào)或信號(hào)的載體且能與肝癌細(xì)胞表面的受體特異性識(shí)別，進(jìn)而激活了肝癌細(xì)胞凋亡過(guò)程中關(guān)鍵性調(diào)節(jié)基。結(jié)果提示我們因bcl-2和capase-3的表達(dá)，從而誘發(fā)肝癌細(xì)胞凋亡。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 研究表明，不飽和脂肪酸和多烯磷脂酰膽堿有較為明顯的抑制腫瘤細(xì)胞增殖及保肝護(hù)肝的功效，提示我們肝源性磷脂酰乙醇胺可能具抑制腫瘤細(xì)胞增殖的生物學(xué)活性。目前對(duì)PE的研究主要集中在其作為磷脂雙分子層的藥物包埋體，但把PE獨(dú)立作為藥物進(jìn)行生物活性研究的報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用柱色譜法從肝臟總脂中分離得到PE，并對(duì)其抑制肝癌細(xì)胞增殖及機(jī)制進(jìn)行了研究，旨在為開(kāi)發(fā)肝源性PE抗肝癌新藥提供依據(jù)。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 實(shí)驗(yàn)表明肝源性磷脂酰乙醇胺具有抑制腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)活性，本實(shí)驗(yàn)把PE獨(dú)立作為藥物進(jìn)行生物活性研究，為開(kāi)發(fā)肝源性PE抗肝癌新藥提供依據(jù)。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 采用氧化鋁柱色譜法分離純化肝源性磷脂酰乙醇胺(PE)，并采用GF254硅膠板薄層色譜法檢測(cè)PE分離產(chǎn)生量。采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法)測(cè)定了在不同時(shí)間點(diǎn)PE對(duì)人肝癌SMMC-7721細(xì)胞增殖的影響，并與子宮頸癌細(xì)胞Hela、正常人肝細(xì)胞HL7702做比較，發(fā)現(xiàn)肝源性PE對(duì)肝癌細(xì)胞的生長(zhǎng)具有明顯的抑制作用，并能誘導(dǎo)其發(fā)生凋亡，且存在劑量依賴(lài)關(guān)系。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，肝源性PE對(duì)癌細(xì)胞的增殖抑制作用可能具有組織特異性，這可能與肝臟中特殊的PE代謝路徑及其不同分子種類(lèi)有關(guān)。這個(gè)結(jié)果為今后開(kāi)發(fā)低毒副作用的抗肝癌藥物提供了新思路。
獲獎(jiǎng)情況
- （1） 本實(shí)驗(yàn)獲得大連醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院第四屆大學(xué)生科技論文 二等獎(jiǎng) （2） 王亮等. 肝源性磷脂酰乙醇胺的分離及其誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡的研究.天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2010，22（2）
鑒定結(jié)果
- 肝源性PE對(duì)癌細(xì)胞的增殖抑制作用可能具有組織特異性，這可能與肝臟中特殊的PE代謝路徑及其不同分子種類(lèi)有關(guān)。
參考文獻(xiàn)
- 氧化鋁柱色譜法；GF254硅膠板薄層色譜法；四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT法) Lizard G,Fournel S,Genestier L,et al. Kinetics of plasma membrane and mitochondrial alterations in cells undergoing apoptosis. Cytometry, l995, 21:275
同類(lèi)課題研究水平概述
- 磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanolamine，PE）也稱(chēng)腦磷脂。在動(dòng)、植物及微生物中廣泛存在。PE作為生物膜上重要的磷脂組分之一參與維持其正常的結(jié)構(gòu)和功能，與細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、分化及癌變密切相關(guān)，其降解產(chǎn)物還參與細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和代謝調(diào)控，具有防衰老、降血脂、健腦、保肝等多種生理作用。有研究表明，肝源性PE的不飽和脂肪酸含量較高，并且在肝臟中PE與磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine,，PC)可以相互轉(zhuǎn)化。同時(shí)，不飽和脂肪酸和多烯磷脂酰膽堿有較為明顯的抑制腫瘤細(xì)胞增殖及保肝護(hù)肝的功效，提示我們肝源性PE可能具抑制腫瘤細(xì)胞增殖的生物學(xué)活性。目前對(duì)PE的研究主要集中在其作為磷脂雙分子層的藥物包埋體[3]，但把PE獨(dú)立作為藥物進(jìn)行生物活性研究的報(bào)道較少，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用柱色譜法從肝臟總脂中分離得到PE，并對(duì)其抑制肝癌細(xì)胞增殖及機(jī)制進(jìn)行了研究，旨在為開(kāi)發(fā)肝源性PE抗肝癌新藥提供依據(jù)。
