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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 氯化銨保護(hù)氫醌所致人胚腎HEK293細(xì)胞毒性及機(jī)制研究
- 來(lái)源：
- 第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡(jiǎn)介：
- 研究工業(yè)化學(xué)品氫醌所致人胚腎293細(xì)胞的細(xì)胞毒性及可能的損傷機(jī)制. 本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)研究不同濃度的氫醌在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)293細(xì)胞的細(xì)胞毒性.采用噻唑藍(lán)法檢測(cè)氫醌的細(xì)胞毒性作用;采用熒光分光光度計(jì)法測(cè)定經(jīng)丫啶橙染色的溶酶體熒光強(qiáng)度的變化; 采用熒光分光光度計(jì)法測(cè)定線粒體膜電位的變化.為探討可能的損傷機(jī)制，采用膜結(jié)構(gòu)保護(hù)物質(zhì)氯化銨干預(yù)后，檢測(cè)氫醌所致293細(xì)胞的細(xì)胞毒性、溶酶體膜通透性及線粒體膜電位的改變。
- 詳細(xì)介紹：
- 本課題主要是研究氯化銨保護(hù)氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細(xì)胞（293細(xì)胞）毒性及可能機(jī)制。 采用的試驗(yàn)方法如下： 1) 噻唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)氯化銨對(duì)不同濃度氫醌所致293細(xì)胞毒性保護(hù)作用; 2) 臺(tái)盤蘭染色檢測(cè)氫醌染毒1h所致293細(xì)胞死亡率； 3) 熒光分光光度法測(cè)定293細(xì)胞經(jīng)氫醌染毒1h后溶酶體完整性的變化以及線粒體膜電位的改變。 試驗(yàn)得出以下結(jié)果： 1) 24h和48h的MTT結(jié)果顯示，NH4Cl對(duì)低濃度HQ所致293 細(xì)胞毒性具有保護(hù)作用； 2) HQ染毒1h所致293細(xì)胞死亡率小于13%; 3） HQ可以造成293細(xì)胞溶酶體和線粒體的損傷, NH4Cl對(duì)HQ 所致293細(xì)胞溶酶體損傷有一定的保護(hù)作用。 根據(jù)以上結(jié)果，我們得出結(jié)論： 1） NH4Cl對(duì)HQ所致293細(xì)胞毒性具有保護(hù)作用； 2） HQ所致293細(xì)胞毒性可能與其溶酶體和線粒體的損傷有關(guān)。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本文主要研究氯化銨保護(hù)氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細(xì)胞的毒性及可能機(jī)制。首先確定氯化銨對(duì)氫醌所致293細(xì)胞毒性具有保護(hù)作用，然后探討這種保護(hù)作用是否與溶酶體、線粒體損傷有關(guān)。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 本文采用噻唑藍(lán)（MTT）比色法、臺(tái)盤蘭染色法及熒光分光光度法對(duì)氯化銨保護(hù)氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細(xì)胞的毒性及可能機(jī)制進(jìn)行研究。該研究在國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)報(bào)道。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 本研究發(fā)現(xiàn)：經(jīng)NH4Cl預(yù)處理，能使較低劑量HQ所致293細(xì)胞的毒性顯著降低，說(shuō)明NH4Cl可以保護(hù)HQ所引起的毒性，并且日常生活中人們實(shí)際接觸HQ的劑量也較低。因此氯化銨對(duì)低劑量HQ的保護(hù)作用有實(shí)際意義。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的 研究氯化銨保護(hù)氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細(xì)胞（293細(xì)胞）毒性及可能機(jī)制。方法：噻唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)氯化銨對(duì)不同濃度氫醌所致293細(xì)胞毒性保護(hù)作用;臺(tái)盤蘭染色檢測(cè)氫醌染毒1h所致293細(xì)胞死亡率；熒光分光光度法測(cè)定293細(xì)胞經(jīng)氫醌染毒1h后溶酶體完整性的變化以及線粒體膜電位的改變。結(jié)果：24h和48h的MTT結(jié)果顯示，NH4Cl對(duì)低濃度HQ所致293細(xì)胞毒性具有保護(hù)作用；HQ染毒1h所致293細(xì)胞死亡率小于13%; HQ可以造成293細(xì)胞溶酶體和線粒體的損傷, NH4Cl對(duì)HQ所致293細(xì)胞溶酶體損傷有一定的保護(hù)作用。結(jié)論：NH4Cl對(duì)HQ所致293細(xì)胞毒性具有保護(hù)作用，HQ所致293細(xì)胞毒性可能與其溶酶體和線粒體的損傷有關(guān)。
獲獎(jiǎng)情況
- 無(wú)
鑒定結(jié)果
- 無(wú)
參考文獻(xiàn)
- 熒光分光光度法檢測(cè)線粒體膜電位及溶酶體膜完整性 方法參考文獻(xiàn)： Pourahmad, J., O’Brien, P.J., Jokar, F., Daraei, B.. Carcinogenic metal induced sitesof reactive oxygen species formation in hepatocytes. Toxicol. In Vitro ,2003,17, 803–810. 討論參考文獻(xiàn)： 1. de Duve, C., de Barsy, T., Poole, B., Trouet, A., Tulkens, P., and van Hoof, F.. Lysomotropic agents. Biochem. Pharmacol. 1974，23, 2495–2531. 2. Ohkuma, S., and Poole, B.. Fluorescence probe measurement of the intralysosomal pHin living cells and the perturbation of pHby various agents. Proc. Natl. Acad. Sci. 1978，USA 75, 3327–3331.
同類課題研究水平概述
- 無(wú)
