基本信息
- 項目名稱：
- 氯化銨保護氫醌所致人胚腎HEK293細胞毒性及機制研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 研究工業(yè)化學(xué)品氫醌所致人胚腎293細胞的細胞毒性及可能的損傷機制. 本實驗設(shè)計研究不同濃度的氫醌在不同時間點對293細胞的細胞毒性.采用噻唑藍法檢測氫醌的細胞毒性作用;采用熒光分光光度計法測定經(jīng)丫啶橙染色的溶酶體熒光強度的變化; 采用熒光分光光度計法測定線粒體膜電位的變化.為探討可能的損傷機制，采用膜結(jié)構(gòu)保護物質(zhì)氯化銨干預(yù)后，檢測氫醌所致293細胞的細胞毒性、溶酶體膜通透性及線粒體膜電位的改變。
- 詳細介紹：
- 本課題主要是研究氯化銨保護氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細胞（293細胞）毒性及可能機制。 采用的試驗方法如下： 1) 噻唑藍（MTT）比色法檢測氯化銨對不同濃度氫醌所致293細胞毒性保護作用; 2) 臺盤蘭染色檢測氫醌染毒1h所致293細胞死亡率； 3) 熒光分光光度法測定293細胞經(jīng)氫醌染毒1h后溶酶體完整性的變化以及線粒體膜電位的改變。 試驗得出以下結(jié)果： 1) 24h和48h的MTT結(jié)果顯示，NH4Cl對低濃度HQ所致293 細胞毒性具有保護作用； 2) HQ染毒1h所致293細胞死亡率小于13%; 3） HQ可以造成293細胞溶酶體和線粒體的損傷, NH4Cl對HQ 所致293細胞溶酶體損傷有一定的保護作用。 根據(jù)以上結(jié)果，我們得出結(jié)論： 1） NH4Cl對HQ所致293細胞毒性具有保護作用； 2） HQ所致293細胞毒性可能與其溶酶體和線粒體的損傷有關(guān)。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本文主要研究氯化銨保護氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細胞的毒性及可能機制。首先確定氯化銨對氫醌所致293細胞毒性具有保護作用，然后探討這種保護作用是否與溶酶體、線粒體損傷有關(guān)。
科學(xué)性、先進性及獨特之處
- 本文采用噻唑藍（MTT）比色法、臺盤蘭染色法及熒光分光光度法對氯化銨保護氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細胞的毒性及可能機制進行研究。該研究在國內(nèi)尚未見報道。
應(yīng)用價值和現(xiàn)實意義
- 本研究發(fā)現(xiàn)：經(jīng)NH4Cl預(yù)處理，能使較低劑量HQ所致293細胞的毒性顯著降低，說明NH4Cl可以保護HQ所引起的毒性，并且日常生活中人們實際接觸HQ的劑量也較低。因此氯化銨對低劑量HQ的保護作用有實際意義。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的 研究氯化銨保護氫醌（HQ）所致人胚腎HEK293細胞（293細胞）毒性及可能機制。方法：噻唑藍（MTT）比色法檢測氯化銨對不同濃度氫醌所致293細胞毒性保護作用;臺盤蘭染色檢測氫醌染毒1h所致293細胞死亡率；熒光分光光度法測定293細胞經(jīng)氫醌染毒1h后溶酶體完整性的變化以及線粒體膜電位的改變。結(jié)果：24h和48h的MTT結(jié)果顯示，NH4Cl對低濃度HQ所致293細胞毒性具有保護作用；HQ染毒1h所致293細胞死亡率小于13%; HQ可以造成293細胞溶酶體和線粒體的損傷, NH4Cl對HQ所致293細胞溶酶體損傷有一定的保護作用。結(jié)論：NH4Cl對HQ所致293細胞毒性具有保護作用，HQ所致293細胞毒性可能與其溶酶體和線粒體的損傷有關(guān)。
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻
- 熒光分光光度法檢測線粒體膜電位及溶酶體膜完整性 方法參考文獻： Pourahmad, J., O’Brien, P.J., Jokar, F., Daraei, B.. Carcinogenic metal induced sitesof reactive oxygen species formation in hepatocytes. Toxicol. In Vitro ,2003,17, 803–810. 討論參考文獻： 1. de Duve, C., de Barsy, T., Poole, B., Trouet, A., Tulkens, P., and van Hoof, F.. Lysomotropic agents. Biochem. Pharmacol. 1974，23, 2495–2531. 2. Ohkuma, S., and Poole, B.. Fluorescence probe measurement of the intralysosomal pHin living cells and the perturbation of pHby various agents. Proc. Natl. Acad. Sci. 1978，USA 75, 3327–3331.
同類課題研究水平概述
- 無
