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基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 電針調(diào)節(jié)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB抑制大鼠腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)的作用機(jī)制研究
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 本項(xiàng)目以建立大鼠局灶性腦缺血再灌注模型探討電針神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。以Longa法觀察神經(jīng)功能缺損評(píng)分，采用激光多普勒組織血流儀檢測(cè)局部腦血流值判定造模情況及電針治療前后血流情況，以ELISA和RT-PCR法分別檢測(cè)電針前后缺血側(cè)腦組織細(xì)胞因子含量變化與NF-κBmRNA表達(dá)情況，從而證實(shí)電針抑制NF-κB表達(dá)對(duì)抑制腦缺血炎癥反應(yīng)的影響。該研究將為臨床尋找有效改善腦缺血的治療方法提供重要思路。
- 詳細(xì)介紹：
- 缺血性腦卒中作為神經(jīng)系統(tǒng)的常見病及多發(fā)病，是目前導(dǎo)致人類死亡的三大主要疾病之一，并且存活者中50%-70%患者遺留有嚴(yán)重殘疾，給社會(huì)和家庭帶來沉重的負(fù)擔(dān)。腦缺血再灌注損傷(cerebral ischemia reperfusion injury)指發(fā)生缺血性腦卒中后，一定時(shí)間內(nèi)恢復(fù)血液灌注后，腦組織細(xì)胞損傷反而進(jìn)行性加重的現(xiàn)象。 近年來，對(duì)于腦缺血再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制有諸多研究，已經(jīng)成為腦缺血疾病研究的熱點(diǎn)之一。而各項(xiàng)研究表明，炎癥反應(yīng)在缺血性腦損傷中起著重要作用，主要與IL-1β、TNF-α、IL-6 等炎性細(xì)胞因子,黏附分子及由此介導(dǎo)的炎癥介質(zhì)失控、釋放而形成的“瀑布效應(yīng)”密切相關(guān)。因而從抑制腦缺血所引起的炎癥反應(yīng)來改善腦梗死患者的腦損傷情況很有可能為臨床治療提供一種新思路。 本課題采用具有適應(yīng)癥廣、療效明顯、應(yīng)用方便、經(jīng)濟(jì)安全、無藥物性毒副作用等優(yōu)點(diǎn)的針灸療法，選取NF-κB這一對(duì)相關(guān)炎性因子的表達(dá)有調(diào)控作用的核轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行研究，觀察是否可能通過針刺來抑制NF-κB的表達(dá)，影響促炎相關(guān)靶基因的表達(dá)，將整個(gè)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)控制在一個(gè)相對(duì)平衡的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)，使細(xì)胞因子、粘附因子以及其他參與炎癥反應(yīng)的炎性介質(zhì)的表達(dá)趨向于正常比值，做到良性的調(diào)節(jié)，從而改善機(jī)體的機(jī)能狀態(tài)，進(jìn)而抑制腦缺血再灌注炎癥反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)神經(jīng)保護(hù)作用。 通過本研究證實(shí)，電針可以提高I/R損傷后大鼠的腦血流值，改善神經(jīng)功能缺損癥狀；電針可以降低I/R后腦組織中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的含量和NF-κB mRNA的表達(dá)，從而抑制炎癥反應(yīng)，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用；電針能夠減輕腦缺血后的炎癥反應(yīng)，增加腦缺血再灌注后的腦血流值，改善神經(jīng)功能的癥狀，可能是通過抑制NF-κB的表達(dá)從而調(diào)控相關(guān)炎癥因子的釋放而產(chǎn)生一系列的級(jí)聯(lián)反應(yīng)來發(fā)揮抗腦缺血損傷作用而實(shí)現(xiàn)的。
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作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 本項(xiàng)目旨在研究電針對(duì)腦缺血再灌注損傷的神經(jīng)保護(hù)作用產(chǎn)生機(jī)制。缺血后炎癥反應(yīng)是腦缺血中風(fēng)的重要病理機(jī)制之一。研究證實(shí)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB為炎癥介質(zhì)表達(dá)的主要調(diào)控靶點(diǎn)，與炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，因此我們通過電針干預(yù)NF-κB的表達(dá)來調(diào)控相關(guān)炎癥因子的表達(dá)，從而抑制腦缺血炎癥反應(yīng)，發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用。該研究將為臨床尋找有效的治療方法提供重要的思路。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 腦缺血再灌注后炎癥反應(yīng)是腦缺血損傷的重要病理機(jī)制，研究證實(shí)核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB為炎癥介質(zhì)表達(dá)的主要調(diào)控靶點(diǎn)，與炎癥反應(yīng)的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，故以此為切入點(diǎn)探討電針對(duì)腦缺血的神經(jīng)保護(hù)作用機(jī)制。本研究采用大鼠MCAO模型，觀察電針對(duì)模型大鼠神經(jīng)功能缺損評(píng)分、rCBF、細(xì)胞因子含量及NF-κB的表達(dá)影響，從新角度證實(shí)電針的神經(jīng)保護(hù)機(jī)制，為臨床尋找有效治療方法提供參考依據(jù)。本作品的獨(dú)特之處即體現(xiàn)于此。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 針灸通過干預(yù)炎癥反應(yīng)中間環(huán)節(jié)減少神經(jīng)元死亡或凋亡，能有效防治腦缺血再灌注損傷。該方面的基礎(chǔ)研究能指導(dǎo)醫(yī)生及早干預(yù)缺血性卒中的炎癥反應(yīng)，這有可能成為治療腦梗死新的有效途徑，具有重要的臨床意義。針灸是中醫(yī)學(xué)的重要組成部分，具有適應(yīng)癥廣、療效明顯、應(yīng)用方便、經(jīng)濟(jì)安全等優(yōu)點(diǎn)，特別是無藥物性毒副反應(yīng)。這些能極大節(jié)約醫(yī)療成本和社會(huì)資源，減輕患者的痛苦與經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)，為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域治療腦缺血中風(fēng)翻開新的一頁。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 目的：建立大鼠I/R模型，觀察和檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，探討電針抑制NF-κB表達(dá)抑制腦缺血炎癥反應(yīng)機(jī)制。方法：采用Zea- Longa線栓法制備大鼠I/R模型，隨機(jī)分為模型組、電針組和假手術(shù)組，其中模型組和電針組以腦缺血再灌注時(shí)間隨機(jī)分為12h、24h組。以Longa法觀察神經(jīng)功能缺損評(píng)分；采用激光多普勒組織血流儀檢測(cè)局部腦血流值判定造模情況及電針治療前后血流情況；以ELISA和RT-PCR法檢測(cè)電針前后缺血側(cè)腦組織細(xì)胞因子含量與NF-κBmRNA表達(dá)情況。結(jié)果：電針組治療后不同再灌注時(shí)間點(diǎn)的神經(jīng)功能缺損評(píng)分較相應(yīng)模型組減輕。缺血前大鼠rCBF無明顯差異，缺血即刻較缺血前降低；除假手術(shù)組外，再灌注即刻各組均值升高；再灌注不同時(shí)間各組均值升高，同時(shí)相電針組比模型組升高。造模后各組IL-1β、IL-6、TNF-α含量和NF-κBp65 mRNA表達(dá)測(cè)定升高，同時(shí)相電針組較模型組降低。結(jié)論：電針可以提高I/R損傷后大鼠腦血流值，降低腦組織中炎性因子含量和抑制NF-κB mRNA表達(dá)，可以減輕腦缺血后炎癥反應(yīng)，促進(jìn)腦血流恢復(fù)，這可能是抑制NF-κB表達(dá)調(diào)控相關(guān)炎癥因子釋放產(chǎn)生級(jí)聯(lián)反應(yīng)的結(jié)果。
獲獎(jiǎng)情況
- 1、獲2010年度浙江省大學(xué)生科技創(chuàng)新項(xiàng)目立項(xiàng) 2、綜述已被《浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志》錄用，擬發(fā)表在第21卷8~10期上。
鑒定結(jié)果
- 通過審核
參考文獻(xiàn)
- 1、本課題組為針灸推拿學(xué)高年級(jí)本科生，有鉆研精神和團(tuán)結(jié)協(xié)作能力。課題負(fù)責(zé)人有參加多項(xiàng)針灸治療缺血性腦血管疾病的實(shí)驗(yàn)研究經(jīng)歷，2009年曾參加浙江省第11屆“挑戰(zhàn)杯”大學(xué)生課外學(xué)術(shù)科技作品競賽，獲一等獎(jiǎng)。 2、本課題指導(dǎo)老師在缺血性腦血管疾病的研究方面具有堅(jiān)實(shí)的臨床與理論基礎(chǔ)，實(shí)驗(yàn)室人員實(shí)驗(yàn)技術(shù)操作熟練，可從理論與技術(shù)上給予有力支持。 3、本校有設(shè)施完備的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心和神經(jīng)生物實(shí)驗(yàn)室的支持，從實(shí)驗(yàn)條件上可保證本實(shí)驗(yàn)的順利完成。 主要參考文獻(xiàn)： 1.Danton GH,Dietrich WD.Inflammatory mechanisms after ischemia and stroke[J]. Neuropathol Exp Neurol,2003,62(2):127-136 2.Meretoja A,Tatlisumak T. Thrombolytic therapy in acute ischemic stroke-basic concepts[J].Curr Vasc Pharmacol,2006,4(1):31-44 3.魏崗之，柏華. 腦梗塞現(xiàn)代治療的熱點(diǎn)與展望[J]. 中國腦血管病雜志， 2004,1(5):193-194 4.甘云波，黃光英，張明敏. 針刺對(duì)大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷后神經(jīng)元凋亡的影響[J]. 山東醫(yī)藥,2007,47(15):24-25 5.劉喆，方劍喬. 針刺干預(yù)腦缺血損傷炎性反應(yīng)的作用機(jī)制及其研究新思路[J].針刺研究,2009,34(1):61-66 6. 李軍. 腦缺血性損傷級(jí)聯(lián)反應(yīng)的研究進(jìn)展[J]. 國外醫(yī)學(xué)麻醉學(xué)與復(fù)蘇分冊(cè)， 2001,22(6):364 7. 梁彥濤, 張敬軍. 腦缺血后活化星形膠質(zhì)細(xì)胞所致?lián)p傷因子的探討[J]. 中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用, 2008, 2(1): 17-20 8.梁慶成, 梁松嵐, 陳立杰. NF-κB在腦缺血再灌注損傷中的雙重作用[J]. 哈爾 濱醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2005, 39(1): 99-100 9.肖嵐, 黎杏群. 白介素-6與腦缺血損傷[J]. 國外醫(yī)學(xué)神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊(cè), 2000, 27(5): 258-261
同類課題研究水平概述
- 腦卒中（stroke）是指由于急性腦循環(huán)障礙所致的局限或全面性腦功能缺損綜合征或稱急性腦血管病事件。腦缺血再灌注損傷(cerebral ischemia reperfusion injury)指發(fā)生缺血性腦卒中后，一定時(shí)間內(nèi)恢復(fù)血液灌注后，腦組織細(xì)胞損傷反而進(jìn)行性加重的現(xiàn)象。 近年來，對(duì)于腦缺血再灌注損傷的發(fā)生機(jī)制有諸多研究。各項(xiàng)研究表明，炎癥反應(yīng)在缺血性腦損傷中起著重要作用，這主要是與 IL-1β、TNF-α、IL-6 等炎性細(xì)胞因子,黏附分子及由此介導(dǎo)的炎癥介質(zhì)失控、釋放而形成的“瀑布效應(yīng)”密切相關(guān)。因而從抑制腦缺血所引起的炎癥反應(yīng)來改善腦梗死患者的腦損傷情況很有可能為臨床治療提供一種新思路。 因?yàn)檠装Y反應(yīng)的存在，抗炎治療成為缺血性腦卒中治療的一個(gè)有效的策略。但在炎性反應(yīng)時(shí)，相當(dāng)一部分炎性因子形成級(jí)聯(lián)瀑布效應(yīng)，所以單一阻斷某一個(gè)炎性因子的活性作用很難達(dá)到理想的效果，因而本課題選取NF-κB這一對(duì)相關(guān)炎性因子的表達(dá)有調(diào)控作用的核轉(zhuǎn)錄因子進(jìn)行研究，觀察是否可能通過針刺來抑制NF-κB的活性，影響促炎相關(guān)靶基因的表達(dá)，將整個(gè)細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)控制在一個(gè)相對(duì)平衡的動(dòng)態(tài)范圍內(nèi)，使細(xì)胞因子、粘附因子以及其他參與炎癥反應(yīng)的炎性介質(zhì)的表達(dá)趨向于正常比值，做到良性的調(diào)節(jié)，從而改善機(jī)體的機(jī)能狀態(tài)。 核轉(zhuǎn)錄因子NF-κB是一類轉(zhuǎn)錄因子蛋白家族，它們具有和某些基因上啟動(dòng)子區(qū)的固定核苷酸序列結(jié)合，而啟動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄的功能。NF-κB能結(jié)合到參與炎癥反應(yīng)的大量基因的啟動(dòng)子上，例如ICAM-1、E選擇素、IL-1、IL-8、IL-6、TNF-α、COX2等，這提示NF-κB的活化是許多黏附分子和細(xì)胞活素上調(diào)的上游共同通路，因此阻止參與炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)的基因轉(zhuǎn)錄對(duì)急性缺血性中風(fēng)治療有重要意義。 目前已有不少證據(jù)顯示了針刺對(duì)急性腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用。主要包括：①改善微循環(huán)，增加腦血流量。②改善腦電活動(dòng)。③對(duì)腦組織形態(tài)學(xué)的影響。④拮抗自由基損傷及脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。⑤維護(hù)膜平衡，防止鈣超載。⑥調(diào)節(jié)能量機(jī)制，抑制興奮性氨基酸釋放化物大量進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)引起細(xì)胞毒性水腫。⑦分子生物學(xué)研究。這些說明針刺介入的意義值得重視，針灸能盡早抑制炎癥細(xì)胞因子的合成和功能，干預(yù)炎癥反應(yīng)來達(dá)到抗缺血腦灌注損傷的目的。
