題-1_100_100.jpg)
基本信息
- 項(xiàng)目名稱：
- 葉用芥菜 (Brassica juncea)和白菜型油菜 (B. rapa)之間體細(xì)胞雜交體的RAP
- 小類：
- 生命科學(xué)
- 簡介：
- 人工的細(xì)胞融合開始于20世紀(jì)50年代，60年代到70年代作為一門新興的技術(shù)發(fā)展非常快，應(yīng)用范圍也極為廣泛。細(xì)胞融合技術(shù)作為細(xì)胞工程的核心基礎(chǔ)技術(shù)之一，已在農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥、環(huán)保等領(lǐng)域取得了開創(chuàng)性的研究成果，而且應(yīng)用領(lǐng)域不斷擴(kuò)大。
- 詳細(xì)介紹：
- 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA (Random Amplified Polymorphism DNA- RAPD)是1990年由Wiliam和Welsh等人[3]利用PCR技術(shù)發(fā)展的檢測DNA多態(tài)性的方法。RAPD分子標(biāo)記建立在PCR基礎(chǔ)之上，通過使用一系列具有10個(gè)堿基的單鏈隨機(jī)引物，對基因組的全部DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增以檢測多態(tài)性。RAPD的重復(fù)性是限制其應(yīng)用的主要因素，影響其重復(fù)性的因素很多，如模板濃度及純度、Taq酶、dNTP濃度、引物濃度、Mg2+的用量等。但是RAPD技術(shù)因其操作簡便、反應(yīng)迅速、成本低、通用性好、靈敏度高且不需預(yù)先了解基因組的相關(guān)分子和DNA用量少等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛應(yīng)用于藥用植物種內(nèi)或種間親緣關(guān)系、種質(zhì)資源分析、生物種群劃分、基因定位、遺傳圖譜構(gòu)建和遺傳多樣性方面的研究。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：檢測葉用芥菜和野生型白菜型油菜雜交體的基因組，鑒定雜交體植株。 基本思路：利用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）技術(shù)篩選出最適引物，進(jìn)而對雜交體擴(kuò)增的基因組分析，鑒定雜交植株。
科學(xué)性、先進(jìn)性及獨(dú)特之處
- 隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RAPD）是1990年由Wiliam和Welsh等人利用PCR技術(shù)發(fā)展的檢測DNA多態(tài)性的方法，本實(shí)驗(yàn)利用RAPD技術(shù)對葉用芥菜和野生型白菜型油菜的細(xì)胞雜交體的基因組檢測。
應(yīng)用價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義
- 培育融合親本優(yōu)良性狀的雜合體，并利用分子標(biāo)記技術(shù)檢測其基因組，判斷雜交體是否含有親本的特異性基因，減輕雜交后代的篩選工作進(jìn)而建立對雜交體的培育方向。
學(xué)術(shù)論文摘要
- 以葉用芥菜（Brassica juncea）、野生型白菜型油菜(B.rapa)及其體細(xì)胞雜交體為材料，用隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA (RAPD)技術(shù)進(jìn)行基因組DNA多態(tài)性分析，共選用30個(gè)Operon10 bp隨機(jī)引物擴(kuò)增出DNA片段。通過PCR-RAPD擴(kuò)增選出了3個(gè)（OPA4，OPA8，OPB8）適合鑒定體細(xì)胞雜交體的引物。這些引物擴(kuò)增的雜交體條帶中都有葉用芥菜和白菜型油菜的特征帶，在少數(shù)雜交體中出現(xiàn)新增條帶，表明這些植株均可能為體細(xì)胞雜交體。
獲獎情況
- 無
鑒定結(jié)果
- 無
參考文獻(xiàn)
- [1] 霍乃蕊，韓克光. 細(xì)胞融合技術(shù)的發(fā)展及應(yīng)用[J]. 激光生物學(xué)報(bào)，2006，4:1-2. [2] 李志勇.細(xì)胞工程[M ].北京:科學(xué)出版社，2003: 3-21. [3] Williams J, Kubelik A, Livak K, et a1.DNA polymorphisms amplified by arbitrary primers are useful as markers[J].Nucleic Acids Research,1990,18: 6531-6535. [4] 胡立敏，陶興林，侯棟，朱惠霞，張東琴. 花椰菜溫敏型雄性不育系的RAPD標(biāo)記. 生物技術(shù)通報(bào). 2010，12: 1-2. [5] 周秀萍,楊長順,李爭鳴,陽大慶等.RAPD反應(yīng)體系優(yōu)化的研究[J]. 微生物學(xué)雜志.2010,1-4. [6] 李雪姣，張 耿，顧愛俠，軒淑欣，王彥華，趙建軍.蕓薹屬作物EST-SNP的發(fā)掘與分析 [J]. 植物遺傳資源學(xué)報(bào). 2010，11: 772-776. [7] Gerdemann-kn?rck M, Nielen S, Tzscheetzsch C. Transfer of disease resistance within the genus Brassica through asymmetric somatic hybridization. Euphytica. 1995, 85: 247-253 [8] Chèvreá AM, Eberá F, Barret P, Dupuyá P, Brace J. Identification of the different Brassica nigra chromosomes from both sets of B. oleracea-B. nigra and B. napus-B. nigra addition lines with a special emphasis on chromosome transmission and self-incompatibility. Theor Appl Genet. 1997, 95: 1104-1111.
同類課題研究水平概述
- 無
