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本研究采用濾紙條擴(kuò)散分離的方法,可以在富集的同時(shí)進(jìn)行初篩,并且可以初步分離出單菌落。由此可大大縮短篩選時(shí)間,提高效率。本研究采用濾紙條擴(kuò)散分離方法分離得到降解纖維素菌株,經(jīng)過(guò)剛果紅鑒定平板復(fù)篩和DNS法檢驗(yàn)酶活,證實(shí)菌株可以降解纖維素產(chǎn)生還原糖,最高FPA酶活力高達(dá)12300U,比報(bào)道的酶活力高40%。
目前,纖維素酶降解菌的分離鑒定一般過(guò)程為富集-初篩-復(fù)篩-分離-鑒定。本研究采用濾紙條擴(kuò)散分離的方法,可以在富集的同時(shí)進(jìn)行初篩,并且可以初步分離出單菌落。由此可大大縮短篩選時(shí)間,提高效率。本研究采用濾紙條擴(kuò)散分離方法分離得到降解纖維素菌株,經(jīng)過(guò)剛果紅鑒定平板復(fù)篩和DNS法檢驗(yàn)酶活,證實(shí)菌株可以降解纖維素產(chǎn)生還原糖,最高FPA酶活力高達(dá)12300U,比報(bào)道的酶活力高40%。濾紙條擴(kuò)散分離法結(jié)合培養(yǎng)溫度和pH值梯度分離得到在高溫、酸性或堿性條件下依然能降解纖維素的菌株。在pH值等于2的強(qiáng)酸性條件下,CMC酶活力和FPA酶活力可達(dá)2800U;pH值等于11的強(qiáng)堿性條件下CMC酶活力可達(dá)7800U,F(xiàn)PA酶活力可達(dá)4800U。在60℃高溫條件下仍具有較高的酶活力,CMC酶活力和FPA酶活力最高可達(dá)到7800U和5800U。
在改良高氏培養(yǎng)基和改良牛肉膏培養(yǎng)基上,得到2株能在60℃生長(zhǎng)并降解纖維素的菌株,經(jīng)酶活測(cè)定,其CMC酶活分別為7800U和5800U,F(xiàn)PA酶分別為6300U和5300U,顯示出較高的酶活力。其酶性質(zhì)與菌株特性有待進(jìn)一步研究。
第十二屆“挑戰(zhàn)杯”省賽作品 省賽二等獎(jiǎng)
無(wú)