基本信息
- 項目名稱：
- 半枝蓮醇提物抑制腫瘤血管新生的分子機制研究
- 小類：
- 生命科學
- 大類：
- 自然科學類學術論文
- 簡介：
- 本實驗通過在體實驗觀察半枝蓮醇提物（EESB）對血管新生的影響； MTT 法測定不同濃度EESB對HUVEC增殖的影響，通過劃痕損傷實驗觀察不同濃度EESB對HUVEC遷移的影響，采用體外管腔試驗觀察不同濃度EESB對新血管形成的影響；采用ELISA法檢測結腸癌細胞（HT-29）HUVEC中VEGF mRNA含量及其表達情況等實驗方法，以探討半枝蓮醇提物抑制腫瘤生長轉移的分子機制。
- 詳細介紹：
- 探討半枝蓮醇提物（ethanol extract of Scutellaria Barbata D. Don簡稱EESB）通過抑制血管新生實現(xiàn)抑制腫瘤生長的作用機制。實驗通過在體實驗（CAM模型）觀察半枝蓮醇提物（EESB）對血管新生的影響；采用人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）常規(guī)體外培養(yǎng)，隨機設定對照組和不同濃度半枝蓮提取物組，干預24 h。倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài)變化．MTT 法測定不同濃度半枝蓮醇提物（EESB）對HUVEC細胞增殖的影響，通過劃痕損傷實驗觀察不同濃度半枝蓮醇提物（EESB）對HUVEC細胞遷移的影響，采用體外管腔試驗觀察不同濃度半枝蓮醇提物（EESB）對新血管形成的影響；采用ELISA法檢測結腸癌細胞（HT-29）HUVEC細胞中VEGF mRNA含量及其表達情況。實驗結果顯示，高濃度的EESB能抑制雞胚新生血管的形成，實驗組血管數量明顯少于對照組；半枝蓮醇提物（EESB）干預HUVEC細胞24 h后，HUVEC細胞密度明顯減少、細胞變小， 可明顯抑制HUVEC細胞增殖（P＜0.01），具有顯著地劑量依賴；細胞遷移、生成實驗結果顯示半枝蓮提取物（EESB）各劑量均有顯著抑制血管遷移、生成，并具有明顯的劑量依賴性;RT-PCR和ELISA結果顯示，EESB能抑制HT-29和HUVEC細胞中VEGF的表達，同時與VEGF蛋白的表達明確相關。
作品專業(yè)信息
撰寫目的和基本思路
- 目的：清熱解毒類中藥半枝蓮已被廣泛應用于臨床抗腫瘤治療，且療效顯著，闡明其抗腫瘤作用機制，有助于為臨床應用提供實驗依據，為臨床用藥提供更好的理論指導。 基本思路： （1）、培養(yǎng)人臍靜脈內皮細胞（HUVEC）和結腸癌細胞（HT-29）； （2）、采用CAM模型法、MTT法、劃痕試驗法、體外血管網生成實驗、RT-PCR和ELISA實驗法等試驗對該實驗進行探討驗證。
科學性、先進性及獨特之處
- 大量研究已表明，腫瘤的惡性生長和轉移依賴于腫瘤血管新生。腫瘤血管新生作為靶點的治療已成為腫瘤治療研究領域的主要方向之一。清熱解毒類中藥半枝蓮已被廣泛應用于臨床抗腫瘤治療，并取得顯著療效。但是以往的研究主要注重于半枝蓮的臨床療效觀察，對其抗腫瘤作用機制的研究還不夠系統(tǒng)和深入，本研究將著重探討半枝蓮抗腫瘤血管新生的分子機制，以闡明半枝蓮通過抑制血管新生而達到抑制腫瘤生長、轉移的作用機制。
應用價值和現(xiàn)實意義
- 此作品的結果進一步明確闡述半枝蓮通過抑制血管新生而實現(xiàn)其抑制腫瘤的生長、轉移的機制，為后續(xù)進一步探討半枝蓮與血管調節(jié)因子關系等研究提供了方向，同時也為臨床用藥提供更為可靠的理論依據。
學術論文摘要
- 摘要：目的 探討半枝蓮醇提物（ethanol extract of Scutellaria Barbata D. Don簡稱EESB）通過抑制血管新生實現(xiàn)抑制腫瘤生長的作用機制。方法 通過CAM模型觀察EESB對血管新生的影響；MTT 法測定不同濃度EESB對HUVEC增殖的影響，通過劃痕損傷實驗觀察不同濃度EESB對HUVEC遷移的影響，采用體外管腔試驗觀察不同濃度EESB對血管形成的影響；采用ELISA法檢測結腸癌細胞（HT-29）和HUVEC中VEGF mRNA含量及其表達情況。實驗結果顯示，高濃度的EESB能抑制雞胚新生血管的形成，實驗組血管數量明顯少于對照組；EESB干預HUVEC24 h后，HUVEC密度明顯減少、細胞變小， 可明顯抑制HUVEC增殖（P＜0.01）；EESB各劑量均有顯著抑制血管遷移、生成，并具有明顯的劑量依賴性;RT-PCR和ELISA顯示，EESB能抑制HT-29和HUVEC中VEGF的表達，同時與VEGF蛋白的表達明確相關。 結論 半枝蓮提取物抑制腫瘤生長機制與抑制血管新生密切相關。 關鍵字：半枝蓮；HUVEC；VEGF ；血管新生
獲獎情況
- 2011年3月份在臺灣元培科技大學參加由元培科技大學主辦的“2011 International Students Academic Presentation”
鑒定結果
- 該項目通過探討半枝蓮醇提物對腫瘤血管的遷移、生長的機制研究，進一步深入探究半枝蓮抑制腫瘤生長、遷移機制，為半枝蓮的臨床用藥提供更為可靠的理論依據。
參考文獻
- [1] Carron CP．Meyer DM，Pegg JA．et a1．A PeptIid- onlinletica- ntagenist 0f the interin alpha- (v)beta 3 Inhibitisleydigce- lltumor growth end development of hypercalcemia of malign- nancy- [J]．Cancer Res，1998，58(9)：1930． [2].Roberts WG, Whalen PM, Soderstrom E, et al. Antiangiogenic and antitumor activity of a selective PDGFR tyrosine kinase inhibitor, CP-673, 451. Cancer Res, 2005, 65(3): 957-966. [3].Liu YQ, Poon RT, Li QY, et al. Both antiangiogenesis- and angiogenesis-independent efects are responsible for hepatocellular carci- noma growth arrest by tyrosine kin- ase inhibitor PTK787/ZK222584. Cancer Res, 2005, 65(9): 3691-3699. [4].Li-Fen Yu , Ying Cheng ,Min-Min Qiao , et al. Activation of STAT3 signaling in human stomach adenocarcinoma drug-resistant cell line and its relationship with expression of vascular endo 9.Dument A,Mschein M,Bierei G ,et a1 ． Cancer Res ．1997．57(17) ：3860 - 3864 ．
同類課題研究水平概述
- 實驗以表明，腫瘤血管新生過程受血管新生促進因子與抑制因子的嚴密調控，其中促進因子包括血管內皮生長因子(VEGF)、堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)、血小板源性生長因子(PDGF) 等；抑制因子有血管生長抑素、內皮生長抑素和腫瘤抑素等。腫瘤血管新生始于上述兩類因子之間的平衡失調。在眾多血管新生促進因子中，血管內皮生長因子(VEGF) 活性最強，在腫瘤血管新生過程中發(fā)揮著非常重要的作用。 抗腫瘤血管生成治療已成為目前一種極具潛能的腫瘤治療策略，但目前應用的抗血管生成藥物有二十幾種，大多數處于臨床試驗階段，而且多為單一化合物，針對單一靶點，易產生耐藥，而且對心血管的毒副反應不可忽視，當前臨床試驗表明生物靶向藥物的聯(lián)合用也未能體現(xiàn)協(xié)同效應。 尋找高效低毒的血管生成抑制劑已經成為當前抗腫瘤藥物的熱點，大量的臨床及實驗研究發(fā)現(xiàn)，許多中藥及復方具有抗腫瘤轉移和抗血管生成的作用，其中，半枝蓮作為一種常用的抗腫瘤中藥，對肝癌、肺癌、胃癌、直腸癌、鼻咽癌等多種腫瘤細胞均有一定的抑制作用。但是以往的研究主要著重于半枝蓮的臨床療效觀察，對其抗腫瘤作用機制的研究還不夠系統(tǒng)和深入。
